3.2. OVA Práctica - Diagnóstico de Micosis Cutáneas

UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
UNT
MICOLOGÍA
UNIDAD III
SESIÓN PRÁCTICA:
DIAGNÓSTICO DE MICOSIS CUTÁNEA
Elaborado por Dr. Juan Héctor Wilson Krugg

Cátedra de Micología
CONSIDERACIONES A TENER EN CUENTA
1. Si el paciente ha recibido tratamiento previo

2. Si presenta alguna inmunodeficiencia
3. Si hay presencia de materiales que interfieran con el posterior análisis de la muestra:
cosméticos, desodorantes, perfumes, sustancias inertes como talco, cremas.
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Mblgo. Juan Wilson Krugg.
MATERIALES
Portas y Cubres objetos

Placas de Petri estériles
Torundas de algodón
Bisturí y pinzas de disección
Espátulas de siembra
Asas de siembra
Pipetas Pasteur estériles y no estériles
Cinta adhesiva
Guantes
Laca de uñas para sellar portas objetos
TOMA DE MUESTRA
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UTENSILIOS PARA LA TOMA DE MUESTRAS DE
UÑAS, PELOS, ESCAMAS
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Mblgo. Juan Wilson Krugg
Técnica para toma de muestras.
Obtención de escamas de piel:

1. Limpiar la zona afectada con un trozo de gaza empapado en alcohol
2. Raspar la lesión con el borde de un portaobjeto (esterilizados en pares y envueltos en
papel manila).
3. Recibir las escamas en el otro portaobjeto.
4. Empalmar los portaobjetos y envolverlos de nuevo en el papel manila.
5. Escribir los datos del paciente sobre la envoltura.
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• Obtención de cabellos parasitados con dermatofitos
1) Examinar la lesión en cuero cabelludo del paciente con lupa.

2) Depilar con pinzas los cabellos quebrados a la altura del foliculo piloso y al mismo
tiempo colectar sobre un portaobjetos o caja de petri estéril de escamas.
3) Empalmar los portaobjetos y envolverlos o cerrar la caja de petri.
4) Escribir los datos del paciente sobre la envoltura.
Cuando el paciente es un niño que no puede resistir la depilación se toma una muestra con
cinta de scotch.
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Obtención de raspado de uñas:
1) Limpiar la uña con esponja con alcohol.

2) Colocar la yema del dedo afectado sobre el margen de un portaobjetos estéril o dentro la
superficie de una caja de petri estéril.
3) Raspar la uña con una navaja estéril pasándola de la parte proximal a la distal.
4) Empalmar los portaobjetos o cerrar la caja de petri y envolverlos.
5) Los fragmentos de uñas se obtienen mediante tijeras o cortaúñas estériles y se depositan
en una caja de petri.
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Obtención de raspado de uñas:
Si mas de una uña necesita ser raspada se utiliza material estéril para cada una. Para la
obtención de muestras de uñas de los pies, el laboratorista debe sentarse frente el
paciente quien debe acomodar el talón sobre su rodilla, esto permite una posición
cómoda para la toma de muestra.
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ESTUDIO CON LUZ DE WOOD
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PROCESAMIENTO
KOH: 10 al 20 % (30%)
• Clarifica y ablanda muestras clínicas y, permite observar la morfología y pigmentación fúngica.
• El efecto clarificador puede demorar desde 10 min hasta horas, en el caso de las muestras de uñas, y
puede reducirse calentando ligeramente la preparación.
• Se suelen utilizar dos concentraciones, una más fuerte del 20-30% para uñas, y del 10% para el
resto de muestras.
• INCONVENIENTES:
– puede crear unos artefactos que pueden parecerse a los hongos
– Carácter corrosivo del KOH
– Aparición, con el tiempo, de cristales que dificultan la observación.
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DIFICULTADES DEL EXAMEN DIRECTO
• Un examen directo negativo nunca descarta una infección fúngica.

• La sensibilidad de la técnica puede estar entre 10³-105 elementos fúngicos por ml y
puede depender del lugar anatómico, tipo de paciente, tinción y experiencia del
observador.
• • La presencia de falsos positivos: (gotas de grasa, restos celulares, etc.), puede
minimizarse con un segundo examen o con la experiencia del observador.
• • Posee una relativamente baja sensibilidad diagnóstica.
• • En la mayoría de los casos, no es posible identificar la especie fúngica.
• No permite la realización de estudios de sensibilidad a los antifúngicos.
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CULTIVO
Agar Sabouraud
- Peptona + Dextrosa + Agar, antibiótico
Agar Extracto de levadura

-Extracto de levadura, dextrosa, cloranfenico, agar
Agar Mycosel
- Peptona de soya, Dextrosa, Cicloheximida, cloranfenicol
Incubar hasta por 3 semanas a temperatura ambiente
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CULTIVO SOBRE PELO O MÉTODO DEL ANZUELO
Se depositan en tierra húmeda pelos o cabellos para aislar dermatofitos del
suelo.
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RESULTADOS
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Elaborado por Dr. Juan Héctor Wilson Krugg

CONSIDERACIONES A TENER EN CUENTA

1. Si el paciente ha recibido tratamiento previo

Portas y Cubres objetos

Obtención de escamas de piel:

1) Examinar la lesión en cuero cabelludo del paciente con lupa.

1) Limpiar la uña con esponja con alcohol.

obtención de muestras de uñas de los pies, el laboratorista debe sentarse frente el

cómoda para la toma de muestra.

• Un examen directo negativo nunca descarta una infección fúngica.

Agar Extracto de levadura

Incubar hasta por 3 semanas a temperatura ambiente

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