UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN

FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGÍA – MICROBIOLOGÍA

INFORME DE PRACTICA

OBSERVACION DE QUISTES Y TROFOZOITOS DE Giardia lamblia y TROFOZOITOS

DE Trichomonas vaginalis. TECNICAS DE DIAGNOSTICO COPROPARASITOLOGICO

Estudiante: Maria del Carmen Chambi Centeno

Código: 2019-118004

Grupo de practica: ¨B¨

Asignatura: Parasitología

Docente: Luis Lloja Lozano

Semestre: 2021 – I

TACNA-PERÚ

2021
 PRACTICA N°3
OBSERVACION DE QUISTES Y TROFOZOITOS DE Giardia lamblia y TROFOZOITOS
DE Trichomonas vaginalis. TECNICAS DE DIAGNOSTICO COPROPARASITOLOGICO

I. INFORMACIÓN TEÓRICA
El parásito es un ser vivo que vive a expensas de otro organismo de distinta
especie obteniendo de éste sus nutrientes y morada y al cual puede producirle
daño. Dentro de los muchos organismos que pueden parasitar al ser humano
encontramos a los enteroparásitos cuyo hábitat lo constituye el intestino del
hombre (Magaró et al, s.f).
Los parásitos no constituyen flora normal en el ser humano y cuando ingresan a
un organismo será considerado como un agente extraño, por lo tanto, el individuo
parasitado pondrá en juego todos los elementos necesarios para eliminarlos. Es
así como el diagnóstico de los parásitos intestinales se debe realizar por métodos
directos que consisten en el hallazgo e identificación de los mismos. Las
muestras destinadas a tales fines deben llegar al laboratorio parasitológico en un
estado que permita su correcta identificación (Magaró et al, s.f).
El examen coproparasitario es un conjunto de técnicas diagnósticas que
constituyen la indicación metodológica para la identificación de la mayoría de las
enteroparasitosis motivadas por protozoarios o helmintos. Su eficacia y
sensibilidad para establecer un diagnóstico correcto dependen de la adecuada
indicación y preparación de la muestra (Salvatella & Eirale, 1996).

II. OBJETIVOS

- Identificar las formas evolutivas de Giardia lamblia a partir de muestras de

heces
- Identificar al trofozoito de Trichomonas vaginalis de una secreción vaginal.
- Conocer las técnicas directas y de concentración para el diagnóstico de
formas evolutivas de parásitos.

III. MATERIALES Y MÉTODOS

III.1Materiales
III.1.1 Observación de quistes y trofozoitos de Giardia lamblia y
trofozoitos de Trichomonas vaginalis
- Láminas portaobjetos.
- Laminillas cubreobjetos.
- Aplicador de vidrio o madera.
- Microscopio óptico.
- Marcador de vidrio.
- Solución salina fisiológica.
- Solución de lugol.
- Muestra de heces
- Secreción vaginal.
III.1.2 Técnicas de diagnóstico coproparasitologico
 a. Examen mediante técnica directa al microscopio.
- Láminas portaobjetos.
- Laminillas cubreobjetos.
- Aplicador de vidrio o madera.
- Microscopio óptico.
- Marcador de vidrio.
- Suero fisiológico.
- Solución de lugol.
- Verde brillante.
- Rojo neutro.
- Presencia de moco, sangre, alimento sin digerir), así como la
presencia de gusanos cilíndricos, anillados o aplanados
(enteros o parte de ellos).
b. Métodos de concentración
- Método de concentración por sedimentación:
Técnica de la sedimentación espontánea en tubo TSET
(técnica de concentración por sedimentación, sin
centrifugación)
Tubos de vidrio o plástico de 13 x 100, 16 x 150, o tubos de 50
mL de capacidad que terminen en forma cónica. Láminas
portaobjetos. Laminillas de celofán recortadas adecuadamente
(22 x 22 mm o 22 x 30 mm). Solución fisiológica. Pipetas de
vidrio o plástico. Agua destilada, hervida o de lluvia. Gasa
recortada en piezas de 9 x 9 cm.
Técnica de Faust: Método de sedimentación y flotación
por centrifugación con sulfato de zinc al 33% y densidad
1180.
Gradilla para tubos de ensayo. Tubos de prueba 15 x 150.
Tubos de prueba 13 x 100. Láminas portaobjetos. Laminillas
cubreobjetos. Embudo pequeño de vidrio. Baja lengua o
bagueta. Gasa. Sulfato de zinc 33,3%, densidad 1180.
Solución de lugol.
- Método de concentración por flotación:
Sheather Sugar: método de concentración por flotación
con centrifugación en una solución de azúcar
Tubos de ensayo 13 x 100. Láminas portaobjetos. Laminilla
cubreobjetos. Aplicador. Solución de azúcar. Asa de platino.
Gradilla para tubos de ensayo. Suero fisiológico. Embudo de
vidrio. Gasa.
Método de Baermann (método de concentración por
migración)
Copas cónicas de 200 a 300 mL. Coladera metálica o rejilla.
Pipetas de transferencia. Gasa. Láminas cavadas. Suero
fisiológico
III.2Procedimiento
III.2.1 Observación de quistes y trofozoitos de Giardia lamblia y
trofozoitos de Trichomonas vaginalis
a. Giardia lamblia
- Coloque en un extremo de la lámina portaobjeto una gota de
suero fisiológico y, con ayuda de un aplicador, agregar 1 a 2
mg de materia fecal; emulsionarla y cubrirla con una laminilla
cubreobjetos.
- Coloque en el otro extremo de la lámina portaobjeto, una gota
de lugol y proceda a la aplicación de la muestra fecal como en
el párrafo anterior.
- Con el suero fisiológico los trofozoítos y quistes de los
protozoarios se observan en forma natural; con lugol se
observan las estructuras internas, núcleos y vacuolas.
- Observe con el microscopio a 10X o 40X. No es aconsejable
usar objetivo de inmersión (100X), puestoque se puede
contaminar el microscopio.
- Recorra la lámina siguiendo un sentido direccional, por
ejemplo, de derecha a izquierda, o de arriba hacia abajo
b. Trichomonas vaginalis
Toma de muestra del exudado vaginal: El exudado vaginal se
toma con un hisopo estéril y con la ayuda de un espéculo también
estéril. La muestra recogida se coloca en un tubo de ensayo que
contiene entre 1-2 mL de solución salina estéril hasta su
observación y cultivo.
Observación directa al microscopio: Para efectuar la observación
directa se elimina el sobrenadante del exudado y se coloca una
gota del sedimento en un portaobjeto, se cubre con una lámina
cubreobjeto y se observa al microscopio óptico en un lente 40x.
Cultivo del exudado vaginal: Se coloca alrededor de 100 µL del
exudado vaginal en un tubo de cultivo de tapa de rosca que
contenía 5 mL de medio de cultivo Diamond modificado.
Posteriormente se incuba a 37°C durante 48 h, pasado ese tiempo
se toma una gota del sedimento con ayuda de una pipeta Pasteur
y se coloca sobre un portaobjeto para observarla en el microscopio
en el lente de 40x.
III.2.2 Técnicas de diagnóstico coproparasitologico
a. Examen mediante técnica directa al microscopio.
- Coloque en un extremo de la lámina portaobjeto una gota
de suero fisiológico y, con ayuda de un aplicador, agregar 1
a 2 mg de materia fecal; emulsionarla y cubrirla con una
laminilla cubreobjetos.
- Coloque en el otro extremo de la lámina portaobjeto, una
gota de lugol y proceda a la aplicación de la muestra fecal
como en el párrafo anterior.
- Con el suero fisiológico los trofozoítos y quistes de los
protozoarios se observan en forma natural; con lugol se
observan las estructuras internas, núcleos y vacuolas.
- En algunos casos se recomienda el uso de colorantes
vitales, debido a que no alteran la actividad del trofozoíto.
 Los más usados son verde brillante 0,2% y rojo neutro
0,01%, así como fucsina 0,01%.
Fundamento: Observe, principalmente en muestras
frescas, la presencia de formas evolutivas móviles o
quistes, ooquistes, larvas o huevos de parásitos de tamaño
microscópico (trofozoítos, quistes de protozoos:
Entamoeba histolytica, Giardia lamblia, Balantidium coli,
Isospora, Cryptosporidium, etc.; así como larvas o huevos
de helmintos: Strongyloides stercoralis, Ancylostoma o
Necator, Trichostrongylus sp., Paragonimus, Fasciola
hepatica, etc.).
b. Métodos de concentración

- Método de concentración por sedimentación:

Técnica de la sedimentación espontánea en tubo TSET
(técnica de concentración por sedimentación, sin
centrifugación)
Colocar una porción de heces (1 - 2 g) en un tubo limpio y
homogenizar con suero fisiológico o en el mismo recipiente
en que se encuentra la muestra. Coloque una gasa,
hundiéndola en la abertura del tubo y sujetándola con una
liga alrededor de ella. Filtre el homogenizado a través de la
gasa, llenando el tubo hasta la cuarta parte de su
contenido. Agregue suero fisiológico hasta 1 cm por debajo
del borde del tubo. Ocluya la abertura del tubo con una
tapa, parafilm o celofán. Agite enérgicamente el tubo por
15 segundos, aproximadamente. Deje en reposo de 30 a
45 min. En caso que el sobrenadante esté muy turbio,
eliminarlo y repetir la misma operación con solución
fisiológica o agua filtrada. Aspire la parte media del
sedimento en el tubo con una pipeta y colocar 1 o 2 gotas
en una lámina portaobjeto. Agregue 1 o 2 gotas de solución
lugol a una de las preparaciones. Cubra ambas
preparaciones con las laminillas de celofán y observar al
microscopio.
Fundamento: Se basa en la gravidez que presentan todas
las formas parasitarias para sedimentar espontáneamente
en un medio menos denso y adecuado como la solución
fisiológica. En este método es posible la detección de
quistes, ooquistes, trofozoítos de protozoarios, huevos y
larvas de helmintos.
Técnica de Faust: Método de sedimentación y flotación
por centrifugación con sulfato de zinc al 33% y
densidad 1180.
Coloque 1 a 2 g de la muestra de heces en el tubo de
prueba 13 x 100 o 15 x 150 mm y agregue de 7 a 10 Ml de
agua filtrada o destilada. Realice una buena
 homogenización con ayuda de la baja lengua. Coloque en
el tubo la muestra homogenizada hasta alcanzar 1 cm por
debajo del borde del tubo. Centrifugue entre 2000 a 2500
r.p.m. durante 2 a 3 minutos. Decante el sobrenadante,
adicione agua al sedimento, homogenice y repita la
centrifugación 1 o 2 veces, hasta que el sobrenadante se
observe limpio. Elimine el sobrenadante y agregue la
solución de sulfato de zinc (3-4 mL), homogenice y
complete con la misma solución hasta 1 cm del borde del
tubo. Centrifugue de 1 a 2 minutos entre 2000 a 2500
r.p.m. Coloque el tubo en la gradilla y agregue, con ayuda
de un gotero, la solución de sulfato de zinc hasta formar un
menisco en la boca del tubo. Coloque una laminilla cubre
objeto sobre el menisco y deje en reposo durante 5 a 6
min. Deposite una gota de solución lugol en la lámina
portaobjeto. Retire la laminilla cubreobjeto, colocarla sobre
la lámina con lugol, o con asa de Kolle colocar 3 o 4
asadas en la lámina y cubrir con una laminilla cubre objeto
luego observar al microscopio.
Fundamento: Se basa en que los quistes y/o huevos de
los parásitos flotan en la superficie por ser de menor
densidad que el sulfato de zinc al 33,3%, cuya densidad es
1180. Es útil para la búsqueda de quistes y/o huevos de
parásitos y, excepcionalmente, se observan larvas. Se
recomienda controlar la densidad del sulfato de zinc y usar
agua filtrada para el lavado previo de la muestra.
- Método de concentración por flotación:
Sheather Sugar: método de concentración por
flotación con centrifugación en una solución de azúcar
Homogenice 1 a 2 g de materia fecal en suero fisiológico
en un tubo 13 x 100mm. Centrifugue el tubo con el material
homogeneizado a 2500 r.p.m. durante 2 a 5 min. Elimine el
sobrenadante, y agregue la solución de azúcar hasta 1 cm
del borde del tubo; agite hasta disolver el sedimento,
centrifugue como en el paso anterior, complete con la
solución de azúcar hasta el borde y espere de 2 a 5
minutos la formación de un menisco. Con la ayuda del asa
de platino, tome una muestra de la superficie del menisco y
colóquela en una lámina portaobjeto; agregue lugol, cubra
con una laminilla y observe al microscopio. En caso de
observar coccidios, de la superficie del preparado tomar,
con el asa de platino o con una pinza curva, una muestra
para preparar un frotis para teñir por el método de Ziehl-
Neelsen modificado.
Fundamento: Se basa en la flotación de quistes, ooquistes
y huevos de parásitos en una solución de azúcar que
posee mayor densidad que ellos. Esta técnica es útil para
la concentración de quistes y ooquistes de protozoos y
 huevos de helmintos y se usa como método preferencial en
el diagnóstico de los coccidios: Cryptosporidium,
Cyclospora, Isospora, etc.
Método de Baermann (método de concentración por
migración)
Coloque la coladera o rejilla metálica con la gasa doblada
(2 a 3 capas) dentro de la copa. Coloque sobre la gasa de
3 a 8 g de la muestra de heces en fresco. Vierta solución
salina a 37 ºC o a temperatura ambiente, en cantidad
suficiente, por el borde de la copa. Deje a temperatura
ambiente o en estufa entre 28 – 37 ºC por 30 a 50 min.
Retire la coladera o rejilla y, con ayuda de una pipeta de
transferencia, obtenga 1 mL de sedimento. Coloque el
sedimento en una luna de reloj o una lámina cavada y
observe al microscopio o estereoscopio.
Fundamento: Se basa en los tropismos positivos:
geotropismo, termotropismo e hidrotropismo de los
trofozoítos de protozoos y larvas de helmintos. Es útil
principalmente para Balantidium coli y larvas de
Strongyloides stercoralis.
IV. RESULTADOS
Giardia lamblia

Muestra: Heces, contenido

duodenal
Fase evolutiva: Quiste
Especie: Giardia lamblia
Método: Lugol
Características: El quiste
tiene forma ovalada, cuatro
núcleos y el axoistlo.

Muestra: Heces, contenido

duodenal
Fase evolutiva: Trofozoito
Especie: Giardia lamblia
Numero de aumentos:
200x
Método: Coloración con tionina
Características: El trofozoito tiene forma de pera y presenta dos grandes núcleos
ovalados, poco visibles.

Trichomonas vaginalis

Muestra: Flujo vaginal

Fase evolutiva: Trofozoito
Especie: Trichomonas
vaginalis
Numero de aumentos: 100x
Método: Coloración con
Wright-fucsina
Características: Tiene una forma globosa, en la parte anterior se ubican los
flagelos (forma de latigo) y en la posterior está el axostilo. En la parte izquierda
está ubicada una membrana
ondulante

Examen mediante técnica

directa al microscopio

Muestra: Heces
Fase evolutiva: Trofozoíto
Especie: Entamoeba
histolytica
Numero de aumentos: 400x
Método: Técnica directa al microscopio

Técnica de la sedimentación espontánea en tubo TSET (técnica de

concentración por sedimentación, sin centrifugación)
Muestra: Heces
Fase evolutiva: Quiste
Especie: Giardia sp.
Numero de aumentos:
400x
Método: Sedimentación
espontánea en tubo
Técnica de Faust:
Método de
sedimentación y
flotación por
centrifugación con
sulfato de zinc al 33% y
densidad 1180

Muestra: Heces
Fase evolutiva: Quiste
Especie: Giardia sp.
Numero de aumentos:
400x
Método: Técnica de Faust

Sheather Sugar: método de concentración por flotación con centrifugación

en una solución de azúcar

Muestra: Heces
Fase evolutiva: Ooquiste
Especie: Cryptosporidium
parvum
Numero de aumentos:
100x
Método: Flotación de
azúcar de Sheather
 Método de Baermann (método de concentración por migración)

Muestra: Heces
Fase evolutiva: Larva
Especie: Strongyloides stercoralis
Numero de aumentos: 40x
Método: Método de Baermann

V. COMENTARIO
Los resultados obtenidos de la practica evidencia las diferencias que existen
entre Giardia lamblia y Trichomonas vaginalis, una de estas diferencias es que
una de ellas adopta forma de quiste y trofozoito (Giardia lamblia), mientras que la
otra solo de trofozoito (Trichomonas vaginalis); también se observaron
diferencias en cuanto a su morfología, en su forma de trofozoito Giardia lamblia
tiene un aspecto de pera y Trichomonas vaginalis una estructura globosa
acompañada de una membrana ondulante. Finalmente, la practica aporto nuevos
conocimientos acerca de técnicas coproparasitologicas, las cuales son
complementarias y conducen hacia un diagnóstico confiable de parásitos
intestinales.
VI. REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA
Fabián, M., Tello, R., & Náquira, C. (2003). Manual de procedimientos de
laboratorio para el diagnóstico de los parásitos intestinales del hombre.
Instituto Nacional de Salud, 37(9972 – 857 – 35 – 2 (N°37)).
http://bvs.minsa.gob.pe/local/INS/165_NT37.pdf
Magaró, H., Uttaro, A.,
Serra, E., Ponce de
Leon, P., Echenique,
C., Nocito, I.,
Vasconi, M. D.,
Bertorini, G., Bogino,
B., & Indelman, P.
(2011). Tecnicas de
Diagnostico
parasitologico.
Universidad
Nacional de Rosario,
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Pocaterra, L., Pérez, G., Rojas, E., Hernán, A., Castro, J., Goldstein, C., & Núñez,
L. (2016). Urinary rhabditiform larvae of Strongyloides stercoralis in
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Salcedo Vélez, P. (2004). Coloraciones utiles para facilitar la identificación de
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https://repositorio.uniandes.edu.co/bitstream/handle/1992/10506/u258287.p
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Tarqui Terrones, K., Ramirez Carranza, G., & Beltrán Fabián, M. (2019).
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