Plan de clase del Laboratorio de

Biomoléculas

Curso 2010-2011

Lic. Alfredo Rodríguez Puentes

Dr. Raúl Mocelo
Dra. Clara Nogueiras

1
 Práctica # 1

Título: Síntesis del pentaacetato de β-D (+) Glucosa y pentaacetato de α-D (+) Glucosa.
Ensayos de azúcares.
Semana:
Sumario:
1. Introducción.
2. Acetilación de la β-D(+) Glucosa.
3. Acetilación de la α-D(+) Glucosa
4. Aislamiento y purificación de los productos obtenidos.
5. Ensayos químicos para la caracterización de los productos.
6. Determinación de la actividad óptica del producto.
7. Caracterización por espectroscopia IR.
8. Asignación de espectro NMR-1H

Objetivos:
• Plantear un problema científico que involucre la necesidad de la síntesis del
pentaacetato de β-D(+)Glucosa.
• Acetilar un monosacárido.
• Aislar y purificar el derivado acetilado de un monosacárido.
• Caracterizar por medio de ensayos químicos azúcares desconocidos.
• Determinar la actividad óptica del pentaacetato de β-D(+)Glucosa y de su anómero
empleando el polarímetro.
• Caracterizar por espectroscopia IR el derivado acetilado de un monosacárido.
• Asignar las bandas del espectro NMR-1H del producto.

2
Preguntas iníciales
1. ¿Cuál es la función del acetato de sodio en esta síntesis?
2. ¿Por qué los equipos deben estar completamente secos?
3. ¿Cuál es la doble función del anhídrido acético en esta síntesis?
4. ¿Con qué objetivo se realizan los lavados con agua, etanol y éter del precipitado de
pentaacetato de β-D(+)Glucosa?
5. ¿Cómo se puede comprobar con una prueba general y sencilla si un azúcar es
reductor o no?
6. ¿Cuál es la función del cloruro de zinc anhidro en esta reacción?
7. Plantee las reacciones de esta práctica.
8. Si la α- D(+) glucosa estuviera húmeda como se afectaría el rendimiento de la
reacción.
9. Dibuje la conformación más estable para el pentaacetato de β-D(+)Glucosa. ¿Los
grupos acetoxi son axiales o ecuatoriales?
10. ¿Cuál de los siguientes disacáridos es de suponer que presente mutarrotación?
Justifique.
OH OH OH OH
HO OH
OH
H OH O O OH
H H H O OH
H HO H OH H HO O
OH H H
O H H OH H H H
HO OH H OH H O OH
OH H O H
H OH HO H H
H
H OH H OH
H OH
H OH

Sacarosa Maltosa Lactosa

11. ¿Qué productos debería obtenerse al tratar la maltosa con metanol y cantidades
catalíticas de cloruro de hidrógeno? Formule las reacciones correspondientes.
12. ¿Qué conclusiones deben deducirse sobre las configuraciones de los átomos de
carbono, numerados con 3, 4 y 5 en las formulas de la D-(+)-glucosa y D-(-)-
fructosa, como resultado de la preparación de su fenilhidrazona?

3
 H O
1 CH2OH 1

H OH 2 O 2

HO H 3 HO H 3

H OH 4 H OH 4

H OH 5 H OH 5

6 CH2OH 6
CH2OH

Glucosa Fructosa

Problema de Síntesis de Pentaacetato β-D(+) Glucosa.

Para la obtención de la 2-amino glucosa necesaria para la obtención de vacunas es
necesario la obtención de Pentaacetatoβ -D (+) Glucosa. En los almacenes no existe en
estos momentos este reactivo, pero sin embargo hay en existencia α-D(+) Glucosa,
anhídrido acético, y acetato de sodio a partir del cual se puede obtener con buen
rendimiento.

Introducción
Los azúcares, hidratos de carbono o carbohidratos, son compuestos sintetizados por las
plantas verdes, a partir de dióxido de carbono y agua, cuya fórmula empírica es Cn(H2O)n y
constituyen un alimento imprescindible para los organismos vivos.
Los azúcares son polihidroxialdehidos o polihidroxicetonas quirales o compuestos que
conducen a ellos por hidrólisis.
Atendiendo al número de unidades constitutivas, los azúcares se clasifican en:
• Monosacáridos: No se hidrolizan y constituyen las unidades básicas del resto de los
azúcares.
• Oligosacáridos: Se hidrolizan, dando de 2 a 9 unidades de monosacáridos. Pueden
ser di-, tri-, tetrasacáridos, etc.
• Polisacáridos: Son polímeros de alto peso molecular, constituidos por más de 100
unidades de monosacáridos.

4
Debido a la polifuncionalidad de los monosacáridos, sus reacciones son numerosas y
variadas, ocurriendo por el grupo carbonilo o por grupos hidroxilos.
Las principales reacciones por el grupo carbonilo son la oxidación y la formación de
osaxonas, mientras que las principales reacciones de los grupos hidroxilos son las
alquilaciones y las acilaciones.
Las reacciones de oxidación se utilizan mucho en el análisis orgánico, utilizando agentes
oxidantes débiles como el reactivo de Baeyer, el de Tollens, el de Fehling y el de Benedict.
Cuando se trata un monosacárido con fenilhidracina en exceso, se obtiene el derivado
sólido denominado osazona. Esta reacción es típica de aldehídos y cetonas hidroxilados, es
de gran importancia en la identificación de monosacáridos, ya que las osazonas pueden
ser aisladas, purificadas y caracterizadas con facilidad.
Los grupos hidroxilo de los monosacáridos pueden reaccionar con diversos agentes
alquilantes, obteniéndose los éteres correspondientes.
Los principales métodos para metilar los monosacáridos son:
• Haworth: Sulfato de dimetilo en disolución acuosa de hidróxido de sodio al 30%.
• Purdie: Yoduro de metilo y óxido de plata en dimetil sulfoxido (DMSO) ó Dimetil
formamida (DMF).
• Hakamori: Yoduro de metilo con hidruro de sodio en DMSO
Los monosacáridos pueden acetilarse con anhídridos y cloruros de ácido, siendo el
anhídrido acético el más utilizado para este fin.
Cuando se acetila la glucosa, se obtienen los derivados α y β tetraacetilados, en
dependencia de la proporción de cada isómero que se desee obtener, se selecciona el
catalizador (ácido ó básico).
Así la acetilación de la glucosa con anhídrido acético y acetato de sodio como catalizador
básico, favorece la formación del
β derivado, mientras que si se utiliza ZnCl 2 anhidro
(catalizador ácido) y a mayor temperatura, se favorece la formación del α derivado.

5
 O CH3
CH3
H O
O O
O H
Ac2O / ZnCl 2
H3C O H H

H OH O
H O O
HO O O
H H3C
HO H

α
O CH3
OH H,OH
H Pentaacetato de -D(+) Glucosa

Ac2O / NaAc
O CH3
CH3
H O
O O
O H
H3C O H O O

H O
H
CH3
O H3C

O
Pentaacetato de β-D(+) Glucosa

Los monosacáridos totalmente acetilados, son sólidos de punto de fusión definidos,

cristalizan con facilidad, son insolubles en agua, pero solubles en solventes no polares.
Acetilación de la glucosa. Aislamiento y purificación del pentaacetato de β-D(+)Glucosa.
Reacción fundamental
O CH3
CH3
H OH O
H
HO O O O
H + 5 Ac2O O H + 5 AcOH
HO H O H H
H3C
OH H,OH
H H O
O O
O H3C
O CH3

D(+)Glucosa Pentaacetato de β-D(+)Glucosa

6
Mecanismo de reacción

O O
O O

H
R OH + H3C O CH3 +
H3C O O CH3

+H+ -H+

R
H3C O

Reacciones auxiliares

O O O

+ H2O 2
H3C O CH3 HO CH3

Reacciones colaterales
Formación del pentaacetato de α-D-glucosa (anómero)

Técnica Operatoria para la síntesis del Pentaacetato β-D(+) Glucosa.

En un mortero se colocan 5g α-D(+)glucosa anhidra y 4g de acetato de sodio1 también
anhidro y ambos compuestos se machacan íntimamente con la mano del mortero.
La mezcla se pasa a un balón de 250ml, y se añaden 25ml de anhídrido acético, se adapta
al balón un refrigerante de aire y la mezcla se calienta sobre baño de agua durante una
hora y media, agitando de vez en cuando hasta obtener una disolución clara.
La mezcla de reacción caliente se vierte, agitando sobre 250ml de una mezcla de agua y
hielo, previamente preparada en un vaso de precipitados. Agitando de vez en cuando, la
mezcla se deja estar durante cuarenta minutos2, 3.
El sólido formado se filtra con succión, se lava con pequeñas cantidades de agua fría,
alcohol y éter4 y, aproximadamente 1 g del producto, se recristaliza de etanol. Se

7
determina el punto de fusión de la muestra purificada y todo el sólido, secado al aire, se
pesa para determinar el rendimiento de la reacción.

Diagrama de flujo

Mortero
5g Glucosa anhidra

4g de acetato de sodio (anhidro)1

Pulverizar y mezclar íntimamente

Poner la mezcla en un balón

de 250ml

25ml de anhídrido acético

Conectar al balón un condensador

de aire

Calentar en baño vapor 1 hora

Agitar la mezcla cada 10 min

Verter la mezcla caliente, agitando

sobre 400ml de agua helada

Dejar reposar durante 40 min

aprox.2,3

Filtrar a vacio

Residuo Cristales (impuros)

Ácido acético Pentaacetato β-D(+) Glucosa

Lavar con agua fría, etanol y éter.4

Pentaacetato β-D(+) Glucosa Dejar secar al aire Residuo: Anómero

8 α
Notas:
1. El acetato de sodio anhidro se obtiene fundiendo su sal hidratada (CH3COONa 3H2O),
en una cápsula de porcelana con agitación constante. Al ser calentada la sal funde y
desprende vapores de agua, posteriormente y sin dejar de calentar está cristaliza y
vuelve a fundir cuando esto ocurra se quita el mechero y se mantiene la agitación
con la varilla de vidrio para evitar que los cristales que van apareciendo se peguen a
la cápsula. Debe evitarse el sobrecalentamiento de la sal, el mismo se detecta debido
a la aparición de gases y partículas negras de carbón (carbonización).
2. El Pentaacetato de β-D-(+) glucosa es insoluble en agua y precipita, mientras que el
anhídrido acético en exceso se hidroliza.
3. El producto de reacción se vierte aún caliente en forma de chorrito fino y agitando
sobre la mezcla de hielo-agua. Si se adiciona todo de una vez se forma un aceite
difícil de cristalizar. Raspar las paredes con la varilla de vidrio para ayudar a la
precipitación.
4. El lavado con agua elimina el ácido acético formado por la hidrólisis del exceso de
anhídrido acético. El etanol elimina el anómero α (1,32 g/100ml). El éter elim ina los
derivados parcialmente acetilados. (Tanto el etanol como el éter contribuyen al
secado del producto)

9
 Esquema de aparatos

Condensador de aire

Balón

Baño de vapor

Marco contextual
Nombre y α-D(+) Glucosa Acetato de sodio Anhídrido acético Etanol Éter dietílico
Fórmula C6H12O6 CH3COONa (CH3CO)2O C2H5OH (CH3CH2)2O
(IUPAC)
Sinónimo Glucosa - - Alcohol etílico Éter etílico
MM 180,16 82,03 102,09 46,07 74,12
(g/mol)
18 20 20 20
1,5620 1,528 1,082 0.9873 0,7138
3
(g/cm )
Aspecto Polvo blanco Cristales incoloros Líquido incoloro Líquido incoloro Líquido volátil
físico
20 20 20
nD - - 1,3901 1,3611 1,3526
0
TF ( C) 146 (Descomp) 328,2 -74,1 -114,14 -116,2
0
TE ( C) - - 139,5 78,29 34,5
ms-H2O, ms- H2O; s- EtOH, misc- H2O, EtOH, s- H2O,
25
Solubilidad ls- EtOH; i- 50,4 g/100g H2O C6H6; misc- Et2O; ls- Et2O, acetona, misc- EtOH, C6H6
acetone, EtOAc, s- CCl4 CHCl3, s- C6H6 ms-acetona
py
Otras - - µ / D ≈ 2,8 gas µ / D = 1,69 gas
propiedades

10
Nocividad de los reactivos y del producto
Sustancia Nocividad
Glucosa No es toxica
Acetato de sodio No es toxico
Anhídrido acético Toxico, irritante. Corrosivo
Etanol Inflamable, narcótico
Éter dietílico Inflamable. Anestésico
Pentaacetato β-D(+) Glucosa No es toxico

Cantidades de reactivos a utilizar

Reactivos Moles Gramos Militros
Glucosa 0,028 5 -
Acetato de sodio anhidro 0,05 4 -
Anhídrido acético 0,26 27 25
Etanol (Lavado) - - -
Éter dietílico (Lavado) - - -

Cálculos Estequiométricos
M ( Anh. Acetico ) 102
RT = = = 0,57
M (Glu cos a ) 180,2
m( Anh. Acetico ) 27
RP = = = 5,4
m(Glu cos a ) 5
Sustancia limitante= Glucosa
Rendimiento Teórico=10,83g
Rendimiento practico medio= 6,2g

11
Propiedades físicas del producto

Nombre y Otras
3
Fórmula Sinónimo MM (g/cm ) Aspecto nD TF TE Solubilidad propiedades
0 0
(IUPAC) (g/mol) físico ( C) ( C)
Pentaaceta Agujas i-H2O; ls- EtOH, éter
20 20
to β-D(+) - 390,34 1,2740 blancas - 134 sublim de petróleo, Et2O; s- [α]D +4.2°,
Glucosa (en C6H6, misc- CHCl3 c=1g/100ml de
etanol) CHCl3

O CH3
10 9 23
CH3
24 H O O
12 H 7aC H8 22
O 3a
3 7 27b
13 O O 21 CH3
11 O
H 1 27
H3C H 5a
5 O
4 2a 6
25 15 14 20
H O
17 H
4a 6a
O H3C 18
16 26
O
19

Caracterización del producto

Medición de espectro IR

El espectro mostrado corresponde al de un producto de elevada pureza, por lo que se

debe de alejar de los espectros que se obtengan en nuestro laboratorio. En el mismo
aparecen las bandas características de este compuesto, siendo la banda de vibración de
valencia carbonilica ν(C=O)=1760cm-1 la más notable de todas.

12
Asignación del espectro NMR-1H del Pentaacetato β-D(+) Glucosa
# del H Integración Multiplicidad δ (ppm)
6a 1 d 6,3
5a 1 t 5,5
4a 1 m 5,2
3a 1 m 5,3
2a 1 dd 4,3
7a 2 m 4,2
7b
27 3 s 2,3
26 3 s 2,2
24 3 s 2,1
25 3 s 2,05
23 3 s 2,01

13
14
Acetilación de la glucosa. Aislamiento y purificación del pentaacetato de α -D(+)glucosa.

Reacción fundamental

H OH H OAc

H H O
O 5 Ac2O
HO AcO + 5 AcOH
HO H ZnCl3 AcO OAc
H H OAc
OH

H OH H H

Mecanismo de reacción
Demasiado

Reacciones auxiliares

O O O

+ H2O 2
H3C O CH3 HO CH3

Reacciones colaterales
Formación del pentaacetato de β-D-glucosa (anómero).

15
 Técnica Operatoria para la síntesis del Pentaacetato α-D(+) Glucosa.
En un balón de 250ml ponga 0,5g de cloruro de zinc anhidro1,2 y 13,5g(12,5ml, 0,13mol) de
anhídrido acético, conéctele un refrigerante de aire y caliente la mezcla en un baño de
agua hirviente de 5-10 min, con agitación ocasional hasta que el cloruro de zinc se
disuelva completamente. Adicione lentamente 2,5g de α-D(+)glucosa, y agite durante la
adición para controlar la vigorosa reacción. Caliente la mezcla 1 hora en un baño de agua
hirviente. Añada el contenido del balón a 125ml (aprox) de agua con hielo y agite
vigorosamente para facilitar la hidrólisis del anhídrido que no haya reaccionado. Pasados
30 min el aceite que inicialmente se separó gradualmente solidificará. Filtre a vacio y lave
con varias porciones de agua helada. Recristalice en éter de petróleo. Rendimiento=3,5g
mp=110-1110C

1. El cloruro de zinc es extremadamente delicuescente por lo que al trabajar con él se

debe evitar en todo momento dejar el frasco que lo contenga, mucho tiempo abierto.
Pese esta sustancia lo más rápido posible y una vez que se tome la cantidad necesaria
guarde el reactivo en una desecadora.
2. Media hora antes de comenzar el laboratorio se debe de poner el cloruro de zinc a
utilizar en la práctica, en el horno para garantizar su absoluta sequedad. El horno debe
estar previamente caliente, en el momento de poner a desecar la sal.

16
Diagrama de flujo

Balón 250ml
0,5g ZnCl2 anhidro

12,5ml de anhídrido acético

Conectar un refrigerante de aire

Calentar en baño de agua

hirviente (5-10min)

2,5g glucosa anhidra

Calentar en baño de agua

hirviente 1 hora

Calentar en baño vapor 1 hora

Añadir sobre 125ml de agua con hielo

Agitar vigorosamente durante 5min

Dejar reposar durante 30 min aprox.

Filtrar a vacio

Residuo Cristales (impuros)

Ácido acético Pentaacetato α-D(+) Glucosa

Lavar con agua fría

Recristalizar en éter de petróleo Residuo: Anómero β

Pentaacetato α-D(+) glucosa Residuo

17
Cantidades de reactivos a utilizar
Reactivos Moles Gramos Militros
α-D(+) Glucosa 0,014 2,5 -
Cloruro de zinc (anhidro) - 0,5 -
Anhídrido acético 0,13 13,5 12,5
Éter dietílico (Lavado) - - -

Cálculos Estequiométricos
M ( Anh. Acetico ) 102
RT = = = 0,57
M (Glu cos a ) 180,2
m( Anh. Acetico ) 13,5
RP = = = 5,4
m(Glu cos a ) 2,5
Sustancia limitante= Glucosa
Rendimiento Teórico=5,42g
Rendimiento practico medio= 3,5g
Propiedades físicas del producto

Nombre y Otras
3
Fórmula Sinónimo MM (g/cm ) Aspecto nD TF TE Solubilidad propiedades
0 0
(IUPAC) (g/mol) físico ( C) ( C)
Pentaaceta - Prismas ó - 113,3 sublim ls-H2O,EtOH, CS2
18
to α-D(+) - 390,34 agujas s-Et2O,CHCl3,AcOH [α]D +101,6°,
Glucosa blancas c=0,28g/100ml
(etanol) de CHCl3

O CH3
10 9 23
CH3
24 H O
12 H 7aC H8
O 3a
3 7 27b
13 O O
11 O
H 1
H3C H 5a
5 H
4 2a 6 6a
25 15 14
H O
17 O O
4a 20 22
O 18 21
H3C
16 26
O CH3
19 27

18
Caracterización del producto
Medición de espectro IR

Asignación del espectro NMR-1H del Pentaacetato α-D(+) Glucosa

# del H Integración Multiplicidad δ (ppm)
6a 1 d 6,3
4a 1 t 5,5
3 2 m 5,2
5a
2a 1 dd 4,3
7a y 7b 2 m 4,2
27 3 s 2,25
26 3 s 2,17
24 3 s 2,10
25 3 s 2,08
23 3 s 2,05

19
20
 Ensayo de Azúcares
• Ensayo de Molisch:
Este es un ensayo general para detectar la presencia de azucares. Ponga 5 mg de glucosa
en un tubo de ensayos y añádale 0,5 ml de agua, mézclelo con 2 gotas de disolución al
10% de α-Naftol en etanol o cloroformo. Manteniendo el tubo de ensayos inclinado,
añádale poco a poco y por las paredes del mismo 1ml de ácido sulfúrico concentrado de
manera que el ácido forme una capa por debajo de la disolución acuosa sin que estas se
mezclen. En la unión de las dos capas irá apareciendo un anillo de color rojo, este color
cambia rápidamente a purpura. Agite y deje la disolución en reposo durante 2 minutos
luego diluya la disolución con 5ml de agua; se nota la aparición inmediata de un
precipitado violeta opaco. Repetir el ensayo empleando arabinosa y xilosa.

• Ensayo de la Antrona
En un tubo de ensayos que contenga 1ml de agua, colocar 1-5 mg de glucosa. Inclinar el
tubo y verter por el borde 2ml de disolución al 2% de Antrona en ácido sulfúrico al 95%.
Agitar muy suavemente. Si no aparece una franja verde en 30 segundos, agitar la mezcla y
calentar ligeramente. Los azúcares producen un color verde que cambia a azul verdoso.
Repita este ensayo empleando arabinosa y xilosa.
• Formación de furfural a partir de las aldopentosas.
En un tubo de ensayos verter 2 gotas de una disolución al 5% de furfural en metanol.
Añadir 1ml de agua y 2 gotas de fluoroglucirol. Observar el color. Colocar 1-5mg de
glucosa y arabinosa en sendos tubos de ensayo que contengan 1ml de agua cada uno.

21
Añadir 5 gotas de ácido clorhídrico concentrado y calentar cada disolución hasta
ebullición. Enfriar y añadir 2 gotas del reactivo de floroglucinol. Observar y formular.
Acción de agentes oxidantes.
• Con permanganato de potasio
En un tubo de ensayos, colocar 2 ml de una disolución de glucosa al 10% y añadir unas
gotas de disolución de permanganato de potasio al 0,3%. Observar si ocurre algún cambio
en la coloración. En caso negativo, calentar la mezcla.
Repetir el ensayo con una disolución de glucosa al 10% a la que se haya añadido una gota
de disolución de hidróxido de sodio al 10%. Observar y anotar los resultados.
• Reactivo de Tollens
Coloque en un tubo de ensayos 1 ml de disolución acuosa al 5% del correspondiente
carbohidrato y añadir 3 ml de reactivo de Tollens. Agitar y dejar reposar 5 minutos a
temperatura ambiente. Si no aparece un espejo de plata en la pared interior del tubo,
introducir el tubo en un baño de agua hirviendo.

• Reactivos de Fehling y de Benedict

En 2 tubos de ensayo, verter 2 ml del reactivo de Fehling o de Benedict, recientemente
preparado. Añadir 2 gotas de disolución al 1% de glucosa en uno y de fructosa en el otro.
Hervir la disolución durante 5 minutos y dejar reposar. Observar y anotar el tiempo
requerido por cada azúcar para que ocurra la reacción y el cambio de coloración.
fehling

22
 • Velocidad de formación de osazonas
En 4 tubos de ensayos marcados, colocar 1 ml de disolución acuosa al 5% de glucosa,
fructosa, manosa y arabinosa respectivamente. Añadir a cada uno 12 gotas de
fenilhidracina. Agitar los tubos y sumergirlos en un recipiente con agua hirviendo, durante
20min anotando la hora. Los tubos se agitan ocasionalmente para eliminar la
sobresaturación y se anota el momento en que aparecen las ozasonas sólidas. Si al cabo
de 20min no se ha separado ningún producto sólido, se deja enfriar y se frotan las paredes
de los tubos con una varilla de vidrio para inducir la cristalización. Agitar los tubos
ocasionalmente y observar la aparición de la osazona, anotando el tiempo para cada
azúcar.
• Acción reductora de los disacáridos
Preparar 10ml de disolución al 5% de cada uno de los siguientes disacáridos: lactosa,
maltosa y sacarosa (0,5g en 10ml de agua). Realizar los ensayos con los agentes oxidantes.
Observar los resultados y formular.
• Hidrólisis de la sacarosa
En un tubo de ensayos termoresistente, colocar 6ml de disolución de sacarosa al 10% y
añadir 2 gotas de ácido clorhídrico concentrado. Calentar la disolución durante 5 minutos
en un baño de agua hirviendo. Neutralizar con disolución de hidróxido de amonio
cuidadosamente y realizar el ensayo de Tollens con 1ml de disolución. La aparición de un
precipitado indica la presencia de azúcares reductores. Explicar y formular.

23
Preguntas finales
1. ¿Podría acetilarse la glucosa con cloruro de acetilo? Explique.
2. ¿Qué resultados se obtendría al hacer reaccionar la glucosa y la sacarosa con el
reactivo de Fehling y de Tollens? Explique.
3. ¿Qué variación Ud. haría a la técnica para obtener el anómero α en lugar del β?
4. ¿Podría utilizarse el cloruro de zinc en esta síntesis? ¿Qué se obtendría?
5. Compare las ozasonas obtenidas de la D-glucosa y de la D-fructosa.
6. Explique la función de los lavados con agua, etanol y éter.
7. ¿Reacciona la D (-)-fructosa con el reactivo de Fehling? ¿Cómo se comporta, en
general, una α-hidroxiacetona frente a este reactivo?
8. ¿Qué es el reactivo de Molisch? ¿Cómo se utiliza para detectar la presencia de un
carbohidrato?
9. Formule un acetal típico. ¿Cómo deberá comportarse este acetal frente a: a) agua b)
HCl diluido c) NaOH diluido?
10. ¿Se puede preparar el ácido D-glucónico por oxidación de la D-(+)-Glucosa con el
reactivo de Fehling o el de Tollens? ¿Proponga otro reactivo para la preparación de
este ácido?
11. ¿Cómo se diferencian los espectros IR de la D-(+)-glucosa acetilada y sin acertilar?

Posibles preguntas de sondeo

1. ¿cuántos centros esteriogénicos tiene la β-glucosa?
2. ¿Cuál es la utilidad de la reacción de los azucares con la fenilhidracina?
3. ¿Por qué la velocidad de reacción de la glucosa con la fenilhidracina es mayor que
con la fructosa?
4. ¿si se quisiera metilar en lugar de Acetilar que reactivos ud usaría?
5. ¿qué bandas de IR características ud esperaría que aparecieran en el espectro de la
β-glucosa?
6. ¿Cuáles son los productos de la hidrólisis de la sacarosa? ¿ocurre esta misma
reacción en el proceso metabólico de la misma en nuestro organismo?

Notas:

24
Anexos
Preparación de reactivo de Fehling
En 350-400ml de agua destilada se disuelven 34,64 g de sulfato de cobre II puro (CuSO4
5H2O) y la disolución se diluye a 500 ml. Esta disolución se etiqueta como disolución
Fehling I.
Se prepara otra disolución con 173g de sal de Rochelle (tartrato de sodio y potasio) y 65g
de hidróxido de sodio en unos 350 ml de agua y la disolución se diluye hasta 500ml. Esta
disolución se etiqueta como Fehling II.
Al hacer los ensayos se utilizan volúmenes iguales de las disoluciones I y II. 1ml de mezcla
de disoluciones puede oxidar a 0,005g de glucosa.

Preparación de reactivo de Tollens

Este reactivo tiene que ser de reciente preparación, pues con el tiempo se va formando
fulminato de plata que es explosivo.
1. Forma #1: En un tubo de ensayos se añaden 2 ml de nitrato de plata al 5 %, y 1mL de
NaOH al 10%. Se forma abundante precipitado de Ag2O, agitar fuerte. A parte se
prepara un disolución acuosa al 2.8 % de amoniaco mezclando 1 ml de disolución al 28
% de amoniaco con 10 ml agua destilada. De esta última disolución se añade 2 ml al
precipitado de Ag2O y se agita hasta la disolución del mismo.
2. Forma #2: En 500ml de agua se disuelven 30g de nitrato de plata y se añade una
disolución de hidróxido de amonio hasta que el precipitado de óxido de plata que se
forma en primer lugar se haya disuelto completamente. A continuación la disolución
se diluye a 1L, quedando así lista para su uso. Si se desea una mayor sensibilidad, una
parte de la disolución se puede mezclar, inmediatamente antes de su uso, con un
volumen igual de disolución de hidróxido de sodio al 5%.

Preparación del reactivo de Molisch

En 100ml de alcohol etílico o de cloroformo se disuelven 10 g de α-Naftol.

Preparación del reactivo de Benedict

La disolución A se prepara disolviendo 173 g de citrato de sodio y 100g de carbonato de
sodio anhidro en unos 600ml de agua y diluyendo la disolución a 850ml. La disolución B se
prepara disolviendo 17,3 g de sulfato de cobre II (CuSO4 5H2O) en 100ml de agua y
diluyendo la disolución a 150ml. Para la preparación de la disolución Benedict se añade la
disolución B sobre la disolución A y se agita para homogenizar bien la mezcla.

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 Bibliografía
• Curso Práctico de Química Orgánica. R. Q. Brewster, C. A. Vanderwert, W. E.
McEwen.pag 163
• Experimentos de Química Orgánica. Louis Fieser
• Fundamentals of Organic Chemistry. T. W. Graham Solomons. Chapter 22
Carbohydrates.
• http://www.sigmaaldrich.com
• Espectroscopía (Volumen 1). Carlos S. Pérez, Pedro Ortiz
• CRC Handbook of Chemistry and Physics, 84th Edition, 2003-2004. David R. Lide
(Ed.)

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