UNIVERSIDAD NACIONAL DE BARRANCA

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

ACTIVIDADES DE CLASE SA 11

Docente:
Ana Melva Contreras Contreras

MICROBIOLOGÍA GENERAL

Alumna:
SANTOS TOCAS, ELSA

Barranca – 2022
TÉCNICAS BÁSICAS DE MICROBIOLOGÍA: SIEMBRA Y AISLAMIENTO DE BACTERIAS
AISLAMIENTO DE HONGOS FILAMENTOSOS
En la naturaleza, la mayoría de los microorganismos no se encuentran aislados, sino integrados
en poblaciones mixtas. Para llevar a cabo el estudio de estos microorganismos y de sus
propiedades, es necesario separar unos de otros y trabajar con especies aisladas, obteniendo
cultivos axénicos o puros. Un cultivo axénico o puro es aquel que contiene un sólo tipo de
microorganismo y que procede generalmente de una sola célula; el crecimiento de ésta
origina, en medio sólido, una masa de células fácilmente visible que recibe el nombre de
colonia. Para obtener cultivos puros a partir de una población microbiana mixta, se utilizan las
denominadas técnicas de aislamiento, que fueron desarrolladas durante el siglo XIX. En un
principio, Lister utilizó diluciones seriadas en medio líquido con esta finalidad, pero la
presencia de contaminación, es decir, de microorganismos no deseados, dificultó el
aislamiento. La escuela de Robert Koch introdujo los medios sólidos, complementados con
agar, y las placas de Petri en Bacteriología, permitiendo así la separación física de las colonias
sobre la superficie del medio de cultivo o en el interior del mismo. El aspecto de las colonias
sirve para diferenciar distintas especies microbianas
SIEMBRA Y FORMAS PARA REALIZAR LA TRANSFERENCIA

Sembrar o inocular es introducir artificialmente una porción de muestra (inóculo) en un medio

adecuado, con el fin de iniciar un cultivo microbiano. Para sembrar en microbiología es
necesario mantener la habitación sin corrientes de aire y estar al lado de la llama de un
mechero (no más de 15 cm. de distancia). También se puede trabajar bajo campana, o en flujo
laminar, previa esterilización con luz UV. La siembra puede realizarse en medio líquido, sólido
o semisólido, utilizando ansa, hilo, o bien hisopo o pipeta estéril. Se debe esterilizar en la llama
(hasta que todo el filamento se haya puesto al rojo vivo) el ansa o el hilo y enfriar, antes y
después de realizada la siembra. Para transferir los
microorganismos, se recomienda:

a) Medio líquido a medio líquido: utilizar pipeta

Pasteur o graduada, ansa o hilo.

b) Medio líquido a medio sólido: utilizar pipeta

Pasteur o graduada, ansa o hilo, e hisopo. c) Medio
sólido a medio sólido: utilizar ansa o hilo.

d) Medio sólido a medio líquido: ansa o hilo. Luego

de sembrado, el medio de cultivo se incuba a una temperatura adecuada para el crecimiento

TÉCNICAS DE AISLAMIENTO

Aislar es separar un tipo de microorganismo a partir de una población heterogénea de

microrganismos. En hábitats naturales raramente encontramos un solo tipo de
microorganismo en una muestra, por lo tanto, es necesario hacer algún procedimiento de
aislamiento para separar e identificar los distintos tipos de microorganismos presentes. El
objetivo del aislamiento es obtener colonias bien separadas (las colonias se forman a partir de
una sola “unidad formadora de colonias”) de las que se
conseguirá un cultivo puro. Una vez obtenidos los
cultivos puros se podrán estudiar las características
macroscópicas, microscópicas, fisiológicas, etc. de un
microorganismo en particular. Hay que tener en cuenta
que siempre el aislamiento se da en un medio sólido. El
medio líquido sirve para enriquecer, pero no para aislar.
El aislamiento se puede lograr directamente a partir de
una muestra cuando el o los microorganismos están en
una proporción adecuada. Cuando el microorganismo
que se desea aislar e identificar se encuentra en baja
proporción en la muestra, o interesa un solo tipo de
microorganismo, se lleva a cabo un procedimiento que
involucra una primera etapa de aumento del número de
microorganismos del tipo que se desea aislar en relación
al resto de la población (enriquecimiento). Luego se aísla
por el método de estrías o por dilución y se identifica.

Para aislar se utiliza alguno de los siguientes

procedimientos:

 Métodos generales
  Por diseminación en superficie (agotamiento de ansa, depósito y posterior quemado y
dilución)
 Por mezcla.
 Métodos especiales (calentamiento, agregado de álcali o ácido, por temperatura de
incubación, cambios en el pH y presencia de sales o colorantes).
 Estos métodos sirven cuando se desea aislar un microorganismo que posea una
característica especial (resistente al calor, anaerobio, etc.)

AISLAMIENTO DE HONGOS FILAMENTOSOS

Buenos productores de amilasa. Para ello, los mohos fueron aislados de sus medios naturales:
aire, suelo, pan enmohecido, arroz enmohecido, y se cultivaron en medios Agar Saboraud
común. Como cultivos puros, fueron adaptados a las condiciones de cultivo que propiciara la
producción de una buena cantidad de amilasa, empleándose para ello Agar almidón al 1%
enriquecido con sales. Se seleccionaron los cultivos de mayor producción de amilasa después
de haber sido evaluados de manera cualitativa,
observando los halos de degradación del
almidón al crecer en placas de Agar almidón al
0,5% enriquecido con sales. Una vez obtenidos y
estandarizados los inóculos, se procedió a la
producción de amilasas en botellas planas de
vidrio conteniendo medios sólidos, semisólidos
y líquidos, a base de salvado de trigo. A los siete
días de incubación a 28–30 °C, los preparados enzimáticos crudos de amilasa fueron obtenidos
extrayéndolos de las botellas de vidrio a través de técnicas de homogenización, filtración
simple y al vacío y por centrifugación, después de lo cual fueron conservados en congelación
hasta sus subsiguientes usos. Se procedió a la evaluación cuantitativa de la producción de
amilasas, determinando su actividad con el Método de Street-Close y una técnica que expresa
las unidades de amilasa como UA/dL. Los cultivos de hongos filamentosos ambientales de
mayor producción de amilasa fueron Aspergillus niger LMa, A.

LOS HONGOS

El término Fungi (latín, literalmente "hongos") designa a un reino de organismos eucariotas

entre los que se encuentran los mohos, las levaduras y las setas. υLos hongos tienen como
característica ausencia de clorofila. υDeben de nutrirse a partir de materia orgánica
generalmente muerta. υSu pared celular está conformada por quinina. υReproducción sexual
o asexual.

Ecológica: La gran mayoría de los hongos se nutren de sustancia orgánica muerta, teniendo un
papel clave en la eliminación de este tipo de materia del suelo, la cual descomponen a materia
mineral y regresan al suelo, manteniendo su fertilidad.
Industrial: Gracias sus características bioquímicas son empleados en la fermentación de
quesos, vinos, cervezas, pan y pulque.

Medicinal: Tienen capacidad de producir

sustancias antibióticas, de igual forma
algunas especies son patógenas a los
seres humanos (aproximadamente 40).

Alimentaria: Las especies comestibles

aportan una gran cantidad de proteínas y
vitaminas, fibra y agua que los hace
nutricionalmente importantes

REFERENCIAS

 https://www.youtube.com/watch?v=p9SLGrTw_Cc
 https://www.youtube.com/watch?v=zVqrSpIFe_M
 https://www.youtube.com/watch?v=-TnHCd4sY24
 https://www.youtube.com/watch?v=8iPmWj1