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Industrias Alimentarias MICROBIOLOGÍA GENERAL 1

PRÁCTICA N° ……
MÉTODO DE CULTIVO Y DESCRIPCIÓN MORFOLÓGICA DE HONGOS

OBJETIVO
Que el alumno aprenda las técnicas de cultivo y manipulación de diferentes tipos de hongos. Que el
estudiante conozca las principales características morfológicas de los hongos (microscópicas y
macroscópicas) de los hongos.
INTRODUCCIÓN
Son organismo eucarioticos de mayor tamaño que las
bacterias se caracterizan por carecer de movimiento y
no realizar la fotosíntesis son organismos heterótrofos.
Dependen de nutrientes orgánicos que son
solubilizados diferentes enzimas específicas y son
absorbidos a través de su pared celular y membrana
plasmática.
Por el número de células los hongos son unicelulares
(levaduriformes) y pluricelulares (filamentosos:
mohos), algunos hongos presentan las dos formas, es
decir, son dimórficos generalmente este tipo de hongos
son patógenos, para que sean dimorficos va a depender
de las condiciones ambientales como son nutrientes y
temperatura.
Los hongos levaduriformes presentan una forma oval o
esférica, ampliamente distribuida en la naturaleza,
frecuentemente se encuentran en la superficie de
algunas frutos y hojas (superficie polvosa).
Las levaduras se reproducen asexualmente por gemación donde a partir de la célula madre brota una
protuberancia o yema que posteriormente se separa de la célula madre.
El cuerpo o estructura vegetativa propia de los hongos filamentosos – mohos se denomina talo que
está constituido de hifas y al conjunto de hifas se le denomina micelio.
El mecanismo de reproducción de los hongos es asexual donde las hifas vegetativas se fragmentan o
por la producción de esporas en las estructuras de nominadas conidióforos y esporangiosporas. Los
hongos presentas estructuras de reproducción sexual y sirve para clasificar algunos hongos en 3
subdivisiones o phylum: Zygomicota, Ascomycota y Basidiomycota.
Del total de hongos estudiados solo se conocen 150 especies patógenas para el humano pero también
hay hongos que causan patologías en plantas y animales. Los hongos tienen gran importancia en el
desarrollo de la vida, sobre todo en el proceso de degradación de materia orgánica (biorremediación),
producción de: bebidas alcohólicas, medicamentos (penicilina), cura de quesos, alimentación,
controladores biológicos (bioinsecticida), además es de importancia en la asimilación de nutrientes por
la planta al formar las micorrizas que es la asociación de hongos con las raíces de las plantas.
MATERIALES:
4 placas Petri con 25 ml de PDA
4 placas Petri con 25 ml de medio Czapek Dox
3 tubos de cultivo inclinados con 7 ml de PDA
3 matraces Erlenmeyer de 250
1 probeta de 100 ml
1 vaso de precipitación de 100 ml
1 mechero
5 portaobjetos y cubreobjetos
1 aguja de disección
1 asa de siembra
Cinta adhesiva transparente
Microscopio óptico de campo claro
Aceite de inmersión

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Autoclave
Incubadora a 30°C
Azul de lactofenol
PROCEDIMIENTO
Se proporcionara tubos de cultivo con Aspergillus niger, Penicillum chrysogenum, Rhizopus
oligosporum, Trichoderma viride y de levadura Saccharomyce cerevisiae.
• El alumno inoculará cada una de las cepas en las placas Petri con dos medios de cultivo:
a) Czapk – Dox a base de sales y sacarosa y b) Agar Papa Dextrosa (PDA), que es un medio complejo.
• Para la descripción macroscópica de cada especie en los dos medios de cultivo y la observación
microscópica la realizará aplicando la técnica de cinta Scotch con azul de lactofenol.
SIEMBRA DE HONGOS:
1. Para la siembra de hongos filamentosos, se deberá separar una parte del micelio de los tubos de
cultivo con aguja de disección, previamente calentada en la llama del mechero y fría.
2. Colocar el micelio en el cetro de una placa Petri con PDA y de la misma manera inoculara la caja
con medio de Czapek – Dox.
3. Las levaduras se inocularán por estría cruzada sobre la superficie de las placas, en forma semejante
a la realizada para la siembra de bacterias.
4. Colocar las placas envueltas en papel o bosas de plástico en forma invertidas dentro de una
incubadora a 28 – 30°C durante 3 a 5 días.
DESCRIPCIÓN MACROSCÓPICA DE LEVADURAS Y MOHOS
1. Hacer la descripción de la forma, tamaño y aspecto, textura y color de las colonias de
Saccharomyse cerevisiae.
2. En los cultivos de mohos (hongos filamentosos) describir la forma, tamaño y el tipo de colonia, sí
como las características del micelio (algodonoso, aterciopelado, velloso, aéreo o pegado al medio)
el color del micelio, el color de esporas, cambios en el medio de cultivo etc.
DESCRIPCIÓN MICROSCÓPICAS DE LEVADURAS
1. De las colonias de levaduras preparar un frotis fijado al calor y teñirlo con azul de metileno.
2. Hacer observaciones al microscopio con objetivo 40x y 100x.
Descripción microscópica de mohos en montaje con cinta adhesiva
1. Se corta una cinta de 4 – 5 cm de cinta adhesiva transparente tomándola sólo por los extremos.
2. Cerca del mechero se abre la placa Petri y se presiona ligeramente la cinta adhesiva transparente
sobre la periferia de la colonia.
3. Colocar la cinta con la muestra adherida sobre la una gota de azul de lactofenol, previamente
colocada en el centro del portaobjeto (lámina). La cinta adhesiva transparente hará como si fuera
el cubreobjetos (laminilla) por lo que deberá presionar evitando la formación de burbujas, sin
alterar demasiado la estructura.
4. Dejar reposar durante 3 – 5 minutos y hacer las observaciones en el microscopio con los objetivos
de 10x y 40x.
5. Localizar en las preparaciones hifas, estructuras especiales como conidióforos, conidios,
esporagioforos, esporangios y rizoides. Determine si las hifas presentan septos o no.
RESULTADOS
A. Reportar sus observaciones en el cuadro. Hacer los dibujos de las observaciones morfológicas de
cada uno de los microorganismos y colorearlos.
B. Comparar las observaciones realizadas con los esquemas de la figura
C. Investigar en la bibliografía como se clasifican los hongos observados en la práctica.

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Penicillum Rhizopus

Descripción macroscópica
PDA en

Descripción microscópica
PDA en

Aumento Total:

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CUESTIONARIO
1. ¿Cuáles son las principales estructuras características de mohos y levaduras?

Los hongos se dividen en mohos y levaduras. Los mohos son microorganismos eucariotas no
fotosintéticos, que se caracterizan por formar un entramado filamentoso conocido como micelio
La levadura tiene una pared celular gruesa, compuesta de proteína y polisacáridos, y con carga superficial
neta negativa debido a los fosfatos presentes en la pared celular.

2. Elabore un cuadro comparativo donde indique las diferencias de los sgtes. mohos ambientales:
Penicillum, Aspergillus y Rizophus

penicillum aspergillus rizophus

Las especies de En el género Rhizopus es un género de mohos que
género Penicillium Aspergillus, los incluyen especies
son mohos comunes conidios constituyen cosmopolitas de hongos filamentosos hallados en
que se desarrollan cadenas que se el suelo, degradando frutos y vegetales, heces
sobre los más originan en la célula animales, y residuos.
diversos substratos: conidiógena o fiálide, Las especies de Rhizopus producen esporas asexuales
cereales, paja, En algunos casos hay y sexuales. Las esporangiosporas asexuales se
cueros, frutas, etc. La células adyacentes a producen dentro de una estructura aguzada, el
importancia de estos las fiálides esporangium, y son genéticamente idénticas a su
mohos en la denominadas métulas padre.
alimentación humana o células de soporte.
y animal se debe a
que, además de
causar deterioro,
producen
micotoxinas
Kk,

3. Esquematice e indique las partes de los hongos del género Penicillum, Aspergillus y Rizophus

1-Penicillium es un hongo filamentoso hialino, saprófito perteneciente al filo Ascomycota.

Macroscópicamente las colonias son normalmente de crecimiento rápido; al principio de color blanco y con
el tiempo adquieren color azul, azul verdoso, verde, gris oliva o tonos rosados, con reverso amarillo
cremoso.

2-Aspergillus es un hongo filamentoso hialino, saprofito, perteneciente al filo Ascomycota. Se encuentra

formado por hifas hialinas septadas y puede tener reproducción sexual.

3-Rhizopus es un género de mohos que incluyen especies cosmopolitas de hongos filamentosos hallados en
el suelo, degradando frutos y vegetales, heces animales, y residuos.

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BIBLIOGRAFÍA UTILIZADA PARA EL DESARROLLO DE LAS PREGUNTAS

• http://www.pv.fagro.edu.uy/fitopato/cursos/fitopato/practicas/hongos.html

• https://www.prevensystem.com/internacional/427/noticia-hongos-en-los-alimentos.html

• https://www.fsis.usda.gov/food-safety/safe-food-handling-and-preparation/food-safety-basics/molds-
food-are-they-dangerous-0

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FLORA MICROBIANA NORMAL DEL CUERPO HUMANO

Los seres humanos están expuestos de forma constante por a los microorganismos que ocupan el
medio ambiente. Sin embargo, los seres humanos no constituyen un hábitat favorable para la
mayoría de estos saprófitos porque deben competir con la flora comensal ya adaptada al
organismo humano. Los microorganismos que constituyen la flora normal deben superar las
barreras para la colonización producidas por el flujo de jugos corporales, la depuración mucociliar
y mecanismos inmunitarios locales. La persistencia de varios microorganismos en sus nichos
específicos puede depender de su unión a las células del huésped en esas áreas.
La piel.
Conjuntivas
Nariz y nasofaringe.
Boca y orofaringe.
Tracto intestinal
- Estómago e intestino delgado.
- Intestino grueso.
Tracto genitourinario
- Genitales externos y uretra anterior.
- Vagina.
Sangre y tejidos.

FLORA NORMAL PREDOMINANTE EN DIFERENTES SITIOS DEL CUERPO

SITIOS DEL CUERPO FLORA MICROBIANA

Piel.
Conjuntivas.
Nariz y nasofaringe.
Boca y orofaringe.
Tracto intestinal: intestino delgado.
Tracto intestinal: intestino grueso.
Tracto genitourinario.
Sangre y líquido cefaloraquídeo.
Tejidos, vejiga, útero y trompas
falopio, oído medio, senos paranasales.
Staphylococcus epidermidis, Corynebacterium,
Propionibacterium, Micrococcus, Levaduras.
Staphylococcus epidermidis.
Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus,
Streptococcus spp.
S. epidermidis, Estreptococo no grupo A,
Streptococcus pneumoniae, Streptococcus mitis,
salivarius, Neisseria, Haemophilus, Veillonella,
Bacteroides, Fusobacterium, Treponema,
Lactobacillus, Streptococcus spp, Enterococcus,
Veillonella, Actinomicetos, levaduras.
Bacteroides, Clostridium, Fusobacterium,
Eubacterium, Bifidobacterium, Lactobacillus,
Peptostreptococcus, Enterococcus, Enterobacterias.
Corynebacterium, Estreptococos alfa y no hemolíticos,
Staphylococcus epidermidis,
Enterococcus, Lactobacillus, Mycobacterium
smegmatis, Enterobacteriaceae, Bacteroides,
Estéril.
de
Estéril.

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CONCEPTOS BÁSICOS
Asepsia: Ausencia de microorganismos patógenos.
Microorganismos Patógenos: Es causante de enfermedad.
Contaminación: Presencia de agentes infecciosos vivos en la superficie del cuerpo, prendas de
vestir o artículos sucios (no constituye infección).
Infección: penetración y desarrollo o multiplicación de un agente infecciosos en el organismo de
una persona o animal.
Enfermedad infecciosa: Enfermedad clínicamente manifiesta del hombre resultados de una
infección.
Asepsia médica: Normas ideadas para reducir el número de transmisión de microorganismos
patógenos, ej: lavado de manos.
Desinfección: proceso por el que se da muerte a microorganismos patógenos, pero no
necesariamente a sus esporas, aplicado sobre un objeto inanimado (inerte).
Desinfectante: Sustancia empleada para la desinfección, ej: alcohol yodado, sablón.
Antisepsia: Proceso de lisis o inhibición del crecimiento bacteriano sobre la superficie de tejidos
vivos.
Antiséptico: Sustancia empleada para la antisepsia. Por lo general su uso es inocuo en las
personas ej: alcohol 70°, agua oxigenada.
Espora: Microorganismos que en determinadas circunstancias producen una especie de cápsula
que le permite pasar por una fase de inactividad, que más tarde en situaciones adecuadas recuperan
su actividad, ej: Clostridium tetani, causante del tétanos.
Limpieza: Es la remoción mecánica de toda materia extraña en el ambiente, en superficies y
objetos utilizando para ello el lavado manual o mecánico. Normalmente se usa agua y detergente
para este proceso. El propósito de la limpieza es disminuir el número de microorganismos a través
de arrastre mecánico y no asegura la destrucción de éstos.
Bactericida: Sustancia química que elimina todas las bacterias, patógenas y no patógenas, pero no
necesariamente las esporas bacterianas.
Bacteriostático: Sustancia química que previene el crecimiento de bacterias, pero no
necesariamente las destruye. En muchas ocasiones la diferencia entre bactericida y bacteriostático
únicamente depende de las condiciones de aplicación: tiempo, temperatura, pH

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GLOSARIO
AGENTE ETIOLOGICO: Factor o elemento de naturaleza viva o inerte, que inicia o perpetúa un
proceso morboso.
AGENTE INFECCIOSO: Organismo (bacteriano, rickettsioso, viral, micótico, protozoario o
helmíntico) capaz de producir una infección o una enfermedad infecciosa.
ANTROPOFILIA: Apetencia selectiva de ciertos artrópodos por la sangre humana. (Ej.: Pediculus
capitis).
BIOTOPO: Lugar o área donde vive una especie. Está caracterizado por factores del suelo, climáticos
y biológicos.
CALCIFICACION METASTASICA: Calcificación patológica que se produce en tejido necrosado.
CICLO EVOLUTIVO: Etapas secuenciales del desarrollo de un parásito. Si existen fases sexuales,
comprende desde el cigoto hasta la generación de gametos, o desde el huevo hasta el estado adulto.
CICLO DE TRANSMISION: Etapas por las cuales pasa un parásito desde el huésped infectado hasta
un huésped susceptible.
COLONIA: Grupo de organismos unicelulares que viven en asociación, a menudo derivado de una
sola célula.
COMENSALISMO: Relación simbiótica en la cual una especie, el comensal, vive a expensas de otra
especie, el hospedero, sin ocasionarle ningún daño.
CONTAMINACION: Presencia de agentes infecciosos en objetos (ropa, instrumentos, juguetes),
sustancias inanimadas (agua, leche, alimentos) o en la superficie de organismos vivos.
CONTACTO: Individuo (humano o animal) que ha estado en asociación con un individuo infectado,
teniendo la oportunidad de adquirir la infección.
CONTAGIO: Transferencia directa del agente infeccioso desde la fuente de infección al nuevo
huésped.
CONTROL: Conjunto de medidas para reducir la prevalencia o incidencia de una enfermedad o
infección.
DISENTERIA: Evacuación frecuente de deposiciones, generalmente en escasa cantidad las cuales
contienen sangre y mucosidades. Por lo general traduce inflamación del colon y se acompaña de dolor
abdominal, pujo y tenesmo.
ENFERMEDAD: Conjunto de fenómenos que se producen en un organismo a consecuencia de la
acción de una causa patógena, reaccionando contra ella.
ENCUESTA: Conjunto de acciones destinadas a lograr una información sobre un objetivo
determinado.
ENCUESTA EPIDEMIOLOGICA: Conjunto de métodos usados para obtener datos que sirvan para
caracterizar un fenómeno en una comunidad. Orienta y permite obtener información sobre la
prevalencia de casos clínicos, portadores, contactos y susceptibles, o bien, sobre el factor o factores
causales o vinculables al proceso que se investiga.
ENDEMIA: Prevalencia elevada y mantenida de una enfermedad humana determinada dentro de un
área geográfica.
ENZOOTIA: Prevalencia elevada y mantenida de una enfermedad animal determinada dentro de un
área geográfica.
EPIDEMIA: Producción, en una comunidad o región, de casos similares en un determinado período,
en número claramente superior a la frecuencia habitual y derivados de una fuente común o por
diseminación.
EPIZOOTIA: Lo mismo que epidemia, pero referido a animales.
FOMITE: Objeto (agua, aire, toalla, etc.) que contiene elementos infectantes y pasivamente puede ser
vehículo mecánico en su transmisión indirecta.
FORMA INFECTANTE: Fase del parásito capaz de infectar el huésped.
FRECUENCIA: Número de veces que se ha verificado o registrado un suceso o una característica
determinada en una población.
FUENTE DE INFECCION: Persona, animal, vegetal o sustancia desde la cual el agente infeccioso
pasa al huésped.
FASE CRÓNICA: Es la fase que sigue a la fase aguda, se caracteriza por la disminución de los
síntomas clínicos y existe un equilibrio relativo entre el hospedador y el agente infeccioso.

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GAMETOGONIA: proceso de reproducción sexuada de los esporozoos.

HABITAT: Lugar donde en forma natural vive un ser biológico.
INCIDENCIA: Número de casos nuevos de una enfermedad que se presentan durante un período
determinado, en relación con la población donde ocurren. Generalmente se expresa en forma de tasa.
INFECCION: Entrada y desarrollo o multiplicación de un agente infeccioso en el organismo de una
persona o animal.
INFESTACION: Alojamiento, desarrollo y reproducción de artrópodos en la superficie del cuerpo,
pelos, ropas objetos e incluso ambientes. Se emplea también en el caso de roedores.
INSECTO: Artrópodo con 3 pares de patas.
INESPECIFICIDAD. Porcentaje de casos en que la reacción resulta falsamente positiva
INTRADERMORREACCION: Reacción inmunodiagnóstica que consiste en inyectar en las capas
superficiales de la piel del antebrazo del paciente un antígeno. Existe una intradermorreacción precoz
que se lee habitualmente a los 30 minutos y una tardía cuya lectura se efectúa por lo general a las 24
horas.
LIENTERIA: Diarrea que contiene alimentos sin digerir.
LETALIDAD: Relación entre el número de casos mortales y el número total de casos de una
determinada enfermedad.
LETRINA: Instalación para la recepción de excretas humanas.
MECANISMO DE TRANSMISION: Las circunstancias mediante las cuales el parásito pasa de un
huésped a otro.
MORBILIDAD: Relación entre el número de afectados de una enfermedad determinada y la
población total de una zona.
MORTALIDAD: Relación entre el número de muertos por todas las causas y la población total de
una zona.
MUTUALISMO: Tipo de simbiosis en la cual se benefician recíprocamente hospedero y simbionte.
PARASITO PERMANENTE: Parásito que vive toda su existencia en o sobre su hospedero.
PARASITO TEMPORAL: Parásito que intermitentemente depende de un hospedero para subsistir y
luego lo abandona.
PATOGENICIDAD: es la capacidad de un agente infeccioso de producir daño (enfermedad) en el
huésped – hospedador – hospedero.
PERIODO PREPATENTE: Etapa de la infección parasitaria comprendida desde el momento de la
infección hasta la aparición de la sintomatología o la presencia del parásito.
PERIODO DE INCUBACION: Intervalo que transcurre entre la infección de un sujeto susceptible
(persona o animal) y el momento que presenta las primeras manifestaciones de la respectiva
enfermedad.
PESTICIDAS: Sustancias químicas que se usan para combatir distintas plagas (Ej.: insecticidas,
rodenticidas, moluscocidas, herbicidas).
PREDADOR: Ser que ataca y destruye animales o plantas para obtener alimento; habitualmente
organismos más pequeños y más débiles que constituyen su presa.
PREVALENCIA: Número de casos de una infección o enfermedad que existe en un grupo específico
de población en un momento determinado.
PREVENCION: Medidas para proteger al hombre o animales contra una enfermedad. Pueden ser
independientes de las destinadas al control.
PRE – MUNICIÓN: es un tipo especial de estado inmunitario ligado a la necesidad de la presencia
del agente infeccioso en niveles asintomáticos en el huésped – hospedador – hospedero.
PORTADOR (INFECTADO ASINTOMATICO): Individuo que alberga un agente infeccioso
específico, sin presentar manifestaciones de enfermedad y que puede ser fuente de infección para otros
individuos.
PROFILAXIS: Conjunto de medidas que llevan a la prevención, erradicación o control de las
enfermedades.
PROFILAXIS: Conjunto de medidas que sirven para prevenir o atenuar enfermedades o dolencias, o
sus complicaciones o secuelas.

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RESERVORIO (DE AGENTES INFECCIOSOS): Hombre, animal, planta, suelo o materia

orgánica inanimada, en los cuales el agente infeccioso vive y se multiplica, y de los que depende
principalmente para su subsistencia, de manera que pueda ser transmitido a un huésped susceptible.
RESISTENCIA: Conjunto de mecanismos que algunas especies tienen para defenderse de la invasión
o multiplicación de agentes patógenos, o contra los efectos nocivos que pueden causar los productos
tóxicos, ya sea producido por éstos o de otra procedencia. (Ejs.: resistencia del hombre a algunos
microorganismos; resistencia de algunos microorganismos a antibióticos y quimioterápico; resistencia
de algunos artrópodos a insecticidas).
SANEAMIENTO: Aplicación de procedimientos especiales para procurar que los factores del medio
resulten impropios para mantener o vehiculizar agentes o causas de enfermedades.
SANEAMIENTO AMBIENTAL BASICO: Adecuado suministro de agua potable, disposición de
excretas y eliminación de basura.
SENSIBILIDAD (DE UNA REACCION INMUNODIAGNOSTICA): Porcentaje de resultados
positivos encontrados en individuos afectados por una determinada infección.
SEROLOGIA (REACCION): Reacción inmunodiagnóstica de laboratorio que se practica en el suero
de un sujeto sospechoso con el objeto de detectar anticuerpos y/o antígenos producidos frente a una
determinada infección.
SIMBIOSIS: Condición en la cual dos seres vivos de diversas especies, habitualmente (pero no
necesariamente) viven juntos, con beneficio para uno o para ambos.
SINANTROPISMO: Característica de algunos animales, que aunque pueden llevar una existencia
silvestre, viven en el interior o en las proximidades de la vivienda humana. (Ej.: moscas, cucarachas.
ratas).
SP: Término usado cuando se diagnostica el género de un parásito y no se puede identificar la especie.
SUSCEPTIBLE: Persona o animal que carece de resistencia contra un agente patógeno y que en
consecuencia puede contraer la enfermedad si se expone a la infección por dicho agente.
VECTOR: organismo animal, generalmente artrópodo, que puede transportar activamente un agente
desde la fuente infectante hasta un susceptible.
VECTOR MECANICO: Es el vector que lleva en el exterior de su cuerpo o en interior agentes
patógenos.
VIA DE INFECCION: Sitio (s) a través de los cuales se introduce el agente etiológico en el
organismo del huésped.
XENO: Huésped.
ZOONOSIS: Infección que se transmite en forma natural entre el hombre y animales vertebrados y
viceversa.

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BIBLIOGRAFÍA

1- Aquiahualt Ramos, M. Pérez Chabela. 2004. M. Manual de prácticas del laboratorio de

microbiología. 1era edición. Editorial Universidad Autónoma Metropolitana. México.
2- Botero, D., Restrepo, M. Parasitosis Humana.2013. 5ta ed. Medellín Colombia: Fondo CIB.
3- Brooks y Geo F. Microbiología Médica. 25 edición. Mc Graw Hill.
4- Ciencias Biológicas. 2008. Manual de Microbiología General. Dpto. Microbiología.
5- Instituto Nacional de Salud. Manual de procedimientos de laboratorio para el diagnóstico de
parásitos intestinales del hombre. 2003. Serie de Normas Técnicas N° 37. Lima.
6- Instrumentación Científico Técnica. CULTIMED. Manual Básica de Microbiología.
7- Jawetz, Melnick y Adelberg. Microbiología Médica. 2010. 25 edición. Editorial el Manual
Moderno.
8- Vílchez Cáceres Héctor Alexander. 2010. Manual de prácticas de microbiología.

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