PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:

 Cloroformo.
 Dietil Carbamato de Sodio.
 Alcohol Etílico (Etanol Absoluto).
 Bencina.
 Ácido Sulfúrico Concentrado.
 Ácido Nítrico Concentrado.
Reactivos:
 Ácido Clorhídrico.
 Hidróxido de Sodio.
 Hidróxido de Bario.
 Ácido Ascórbico.
 Cloruro de Hierro (III).
 Azul de Metileno.
 Tubos de Ensayo.
 Vasos de Precipitado.
 Balanza Analítica.
Materiales:  Papel de Filtro.
 Termómetro.
 Mortero.
 Pipetas.

1. Test sobre Retinol (Vitamina A)

FUNDAMENTO

El método se basa en la capacidad del ácido sulfúrico de deshidratar el Retinol con la

formación de propionato de Retinol que se presenta como un líquido oleoso pardo rojizo
en la fase orgánica del cloroformo
CURSO DE LA DETERMINACIÓN Y DISCUSION DE RESULTADOS:

En tubo de ensayo se tomó 2 gotas de aceite de pescado y se adicionó 5 gotas de

cloroformo, posterior a esto se añadió por las paredes del tubo 1 o 2 gotas de ácido
sulfúrico concentrado produciendo un cambio de coloración con respecto al color del
aceite de pescado. Ver fotos 1 y 2.

 El ácido sulfúrico deshidratar el Retinol con la formación de propionato de

Retinol que se presenta como un líquido oleoso pardo rojizo.
 2. Determinación de calciferol (vitamina D)

El método se basa en la interacción del calciferol con hidrocloruro de anilina con la

formación de productos coloreados.

CURSO DE LA DETERMINACIÓN Y DISCUSION DE RESULTADOS:

En tubo de ensayo se tomó 2 gotas de aceite de pescado y se adicionó 10 gotas de

reactivo anilinico, posterior a esto se añadió por las paredes del tubo 5 gotas de aceite de
pescado, por 30 segundos se calienta cuidadosamente. Ver foto

3. Reacción Cualitativa sobre Naftoquinona (Vitamina K)

FUNDAMENTO:

El método se fundamenta en la interacción del dietilditiocarbamato de sodio con la

estructura naftoquinoica de la vitamina K en un medio ligeramente básico formando un
complejo de coloración celeste.

CURSO DE LA DETERMINACIÓN Y DISCUSION DE RESULTADOS:

En un tubo de ensayo se colocó 4 gotas de una solución alcohólica de vitamina K –

extracto de espinaca (alcoholizada con etanol absoluto) se le añadió a esta solución 8
gotas de dietilditiocarbamato de sodio y 4 gotas de hidróxido de sodio para dar el medio
básico. Se agitó vigorosamente el tubo se ensayo observando un cambio de coloración
de verde a celeste como se ve en las fotos.

 El dietilditiocarbamato de sodio con la estructura naftoquinoica de la vitamina K

en un medio ligeramente básico forma un complejo de coloración celeste.

4. Reacción Cualitativa sobre la Rutina (Vitamina P)

FUNDAMENTO:

El método se fundamenta en la interacción de la Rutina con el cloruro de hierro (III) en

un medio neutro formando un complejo de coloración negruzco.

CURSO DE LA DETERMINACIÓN Y DISCUSION DE RESULTADOS:

En un vaso de precipitado se pesaron 100g de té en polvo (molido en mortero) se lo

disolvió en agua destilada y se hirvió por 3 minutos .Después de hervir se tomó 1mL de
esta solución (ver foto) y se le adicionaron algunos cristales de cloruro de hiero (III)
formándose un precipitado complejo de color gris (Ver foto), posterior a esto se diluyó
el precipitado obtenido con 2 veces el volumen de agua destilada provocando la
disolución del complejo formado. (Ver foto)

 Rutina con el cloruro de hierro (III) en un medio neutro formando un complejo

de coloración negruzco soluble en exceso de agua destilada.

5. Reacción sobre la Vitamina C

FUNDAMENTO:

Este método se fundamenta en la capacidad de la vitamina C de intervenir fácilmente en

reacciones de oxido – reducción por acción de la enzima aldehidoxidasa con el azul de
metileno, generando la decoloración del azul de metileno, es decir, el cambio a su forma
leico, por la reducción del mismo.

CURSO DE LA DETERMINACIÓN Y DISCUSION DE RESULTADOS:

A 1mL de extracto de coliflor (extraído en mortero) se le añadió 1mL de azul de

metileno al 0.01% aproximadamente. Se agitó la mezcla y se la tapó para evitar el
contacto de oxigeno con la muestra (pudo usarse también glicerina sobre la superficie
de la muestra para aislarla) la solución adquirió la coloración azul del azul de metileno.
La probeta se colocó en un baño de agua caliente entre 37 – 40 °C. Después de un largo
tiempo se observo una ligera decoloración del azul de metileno producto de su
reducción (cambio a su forma leico). Ver foto:

 La vitamina C de interviene fácilmente en reacciones de oxido – reducción por

que cuenta con la presencia de la enzima aldehidoxidasa.

. Bibliografía: Blanco, Guía de Trabajos Prácticos de Química Biológica, 1972