BIOQUIMICA

Componente práctico – Prácticas No:

1. Cuantificación de proteínas.
2. Efectos de la temperatura y el pH sobre la actividad enzimática

Integrantes:

Nombre Código Programa Correo

José Guzmán 79652458 Ingeniería de Alimentos jdguzmancas@unadvirtual.edu.co

Casadiego

John Jairo Cárdenas 79672591 Tecnol. en calidad cjlaverdej@unadvirtual.edu.co

Laverde alimentaria

Jennifer Adriana 1030551336 Ingeniería de Alimentos jaserratov@unadvirtual.edu.co

Serrato Villamil

Paula Lorena Gutierrez 1022397267 Tecnol. en regencia de plgutierrezm@unadvirtual.edu.co

mateus farmacia

Brian steven Devia 1000792570 Tecnol. en regencia de bsdeviac@unadvirtual.edu.co

Caycedo farmacia

Presentado a tutora:
Eliana Yissel Aguilera Ángel

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA - UNAD

 Mayo 2022

Practica No 5: Cuantificación de proteínas

1. Objetivos
1.1.1. Objetivo General
● Relacionar las propiedades estructurales y químicas de los aminoácidos y
proteínas, a partir de procedimientos de laboratorio que describen su
comportamiento bioquímico.
1.1.2. Objetivos específicos
● Conocer métodos de cuantificación de proteínas y aplicar los conceptos de curva
de calibración.
2. Marco teórico
3. Procedimiento
 4. Datos u observaciones
4.1 graficar la absorbancia frente al pH, y determinar el punto Isoeléctrico experimental para
los datos obtenidos por cada grupo

Absorbancia a 640nm
pH Grupo 1
3,2 0,481
3,6 0,509
3,8 0,528
4 0,566
4,2 0,574
4,5 0,453
4,7 0,311
5,1 0,512
5,5 0,534

6,1 0,534

Absorbancia a 640nm
pH Grupo 2

3,2
3,6 0,275
3,8 0,325
4 0,327
4,2 0,376
4,5 0,377
4,7 0,438
5,1 0,496
5,5 0,212
6,1 0,311
 4.2 Consultar el punto isoeléctrico teórico de la caseína y compárelo con el
punto isoeléctrico experimental obtenido por cada grupo. En caso de
presentarse variaciones cuales podrían ser las causas de las diferencias
entre los puntos isoeléctricos teóricos y experimentales.
RTA:
● El punto isoeléctrico de la caseína es aproximadamente de 4,6.
● La caseína está formada por alpha(s1), alpha(s2)-caseína, ß-caseína, y
kappa-caseína formando una micela o unidad soluble. Ni la alfa ni la beta
caseína son solubles en la leche, solas o combinadas. Si se añade la kappa
caseína a las dos anteriores o a cada una de ellas por separado se forma
un complejo de caseína que es solubilizado en forma de micela. Esta
micela está estabilizada por la kappa caseína mientras que las alfa y beta
son fosfoproteínas que precipitan en presencia de iones calcio.
● El punto isoeléctrico de la caseína varía, esto depende a la forma iónica
predominante de la caseína en solución, es decir, depende del medio en
que la caseína sea disuelta va a variar su punto isoeléctrico

4.3 Ejercicio 1 Corrido electroforético simulador

Primer corrido simulado Segundo corrido simulador Tercer corrido simulado

4.4 Ejercicio 2. Efecto del porcentaje de la acrilamida en el corrido
electroforético
4.4.1 Primer corrido simulado (acrilamida al 7,5%)

4.4.2 Segundo corrido simulado (acrilamida al 12%)

 4.4.3 Tercer corrido simulado (acrilamida al 15%)

5. Análisis de resultados

a. La masa relativa de obtenida por usted con la masa relativa teórica en cada simulación

RTA: la masa relativa obtenida en cada corrido del simulado, el valor que obtuve de la masa relativa fue
cercano al valor teórico.

b. El valor de R y R2 en los tres corridos electroforéticos. (Movilidad Relativa)

c. De acuerdo con los datos obtenidos y los fundamentos de la técnica de electroforesis, considera usted
que es mejor usar más o menos muestras patrón, justifique su respuesta.

RTA: En el proceso de electroforesis, se adiciona una mezcla de proteínas con peso molecular conocido
como patrón. Estos patrones permiten hacer una estimación de la proteína de interés, para la cual se
debe calcular la movilidad relativa de la proteína y de los patrones y una vez identificados estos se
representa gráficamente el logaritmo del peso molecular vs. la movilidad relativa, obteniendo una recta
para después por medio de interpolación del valor de la movilidad relativa de la proteína de interés se
logre determinar su peso molecular (Menor, 2019). Por lo anterior, considero que es necesario emplear
de dos patrones en adelante para poder cumplir con el objetivo.
 5.1.1.1 Obtuvo los mismos valores de movilidad relativa, ¿por qué?
RTA: Los valores de la movilidad relativa en los tres corridos simulados fueron
diferentes, por que el valor de la movilidad relativa depende de la fuerza de
fricción y por tanto del tamaño de la partícula, su peso molecular y la viscosidad o
porcentaje de acrilamida del gel (Menor, 2019), es por ello que al cambiar el
porcentaje de acrilamida del gel el valor de la movilidad relativa varió.
5.1.1.2 Los cambios en la movilidad relativa afectaron la obtención de la masa relativa,
¿Por qué sucede esto?
RTA: Los cambios en la movilidad relativa perjudicaron la obtención de la masa
relativa, ya que al instante en que se realiza la interpolación el costo de la masa
relativa cambiará
5.1.1.3 Comparar los tres corridos electroforéticos (bandas en el gel) qué diferencias
encuentra, explique.

RTA: En los 3 corridos electroforéticos, las diferencias evidenciadas en relación a las

bandas de gel es que entre más incrementó el porcentaje de acrilamida en el gel, el
progreso que tenían estas era cada vez menos.

6. Conclusiones

7. Bibliografía
w.invima.gov.co/documents/20143/1268600/Anexo-24-P004-DS-OGM-P010-
Aseguramiento-De-LaCalidad.pdf/158d2380-4e4a-0d0e-eac7-bbb163569ca7?
t=1561610745041#:~:text=A260%2F280%3A%20Relaci %C3%B3n%20de
%20absorbancia,ADN%3A%20%C3%81cido%20Desoxirribonucleico.

Practica No 7: Efectos de la temperatura y pH sobre la actividad enzimática

1. Objetivos

1.1 Objetivo general

● Relacionar los conceptos básicos de enzimas y actividad enzimática a partir
de procedimientos de laboratorio que describen el comportamiento
bioquímico de las enzimas.
1.2 Objetivos específicos
● Relacionar actividad enzimática con parámetros físicos de velocidad y tiempo
2. Marco teórico
3. Procedimiento
3.1 Efectos del pH sobre la actividad enzimática
3.2 Efectos de la Temperatura sobre la velocidad enzimática

4. Datos u observaciones
5. Determinación de la actividad gamma-glutamiltranspeptidasa en una
muestra de orina
6. Análisis de resultados
7. Conclusiones
8. Bibliografía