Pruebas especiales: Citoquímica

Lic. T. M. Silvana Munayco Coronado

 Citoquímica

La citoquímica estudia la composición química de la

célula hematopoyética, permite detectar y precisar la
localización topográfica de enzimas, lípidos,
carbohidratos, proteínas y sustancias inorgánicas
(hierro) al interior de ésta. Por medio de métodos
tintoriales que permiten la formación de productos
coloreados visibles al microscopio óptico.
 Citoquímica
Finalidad
• Reconocimiento y diagnóstico celular
• Estudio de la fisiología y fisiopatología
celulares
• Diagnóstico de la patología
Citoquímica: PASOS FUNDAMENTALES
Fijación de la extensión:
Para preservar las estructuras y reactividad funcional celulares, impidiendo la
difusión de componentes bioquímicos entre los diferentes compartimientos
celulares, así como al medio extracelular.
Existen diversos fijadores: metanol, etanol, acetona, glutaraldehído,
formaldehído, etc.

Incubación en el medio de reacción:

Como consecuencia se liberan productos que por si mismos o al combinarse con
otra sustancia presente, forman precipitados visibles en el lugar de la reacción.

Contraste:
Para resaltar en lo posible el producto de reacción y permitir una óptima
visualización del núcleo y de citoplasma.
 Citoquímica
Requisitos para una reacción citoquímica:

1. Los reactivos empleados deben ser asequibles y exentos de toxicidad

2. Sensibles y específicas para una línea celular

3. Reproducibles

4. Reacciones no deben ser influenciadas por condiciones ambientales

5. Muestras recientes y en lo posible sin anticoagulante

6. Interpretación del resultado lo más objetiva posible

 Citoquímica
Que muestras podemos usar:

1. Frotices de sangre periférica

2. Extensiones de médula ósea

3. Impronta de tejidos

4. Muestras de líquidos biológicos

Citoquímica
 MIELOPEROXIDASA
RX:
MIELOPEROXIDASA
Pardo
oscuro

Ph 6.0

MIELOPEROXIDASA
POSITIVO POSITIVO NEGATIVO
DEBIL
Serie mieloide en Basófilos maduros
todos sus estadios de
maduración Serie Línea linfoide
monocítica
Línea
Eosinófilos megacariocítica
Línea eritroide
APLICACIÓN CLÍNICA - MIELOPEROXIDASA

LMA VS OTROS TIPOS DE LEUCEMIAS

 FOSFATAS ALCALINA GRANULOCÍTICA
RX:
Pardo
oscuro

FOSFATASA ALCALINA GRANULOCÍTICA

POSITIVO NEGATIVO

Metamielocito Todas las demás

Abastonado células de sangre
periférica y
Neutrófilo médula ósea.
Normal: 20 – 180
Incrementado:  180
Bajo o disminuido: 0 - 19
 APLICACIÓN CLIINICA - FOSFATAS ALCALINA
GRANULOCÍTICA

ELEVADA DISMINUIDO

• Anticonceptivos orales • Leucemia Mieloide

• Cortisol Crónica
• Stress • Hipofosfatasia hereditaria
• Hemoglobinuria
MUY ELEVADA paroxística nocturna

• Mieloma Múltiple
• Enfermedad de Hodgkin
• Policitemia Vera
• Leucocitosis infecciosa
 RX:
FOSFATASA ÁCIDA Rojo

Sal diazoica
(cromógeno + sol. nitrito=)

Ph 5.4

FOSFATASA ÁCIDA
POSITIVO
Macrófagos Osteoclastos CON TARTRATO
Megacariocitos Macrófagos
Monocitos Plasmocitos
Serie eritroide Serie granulocítica
Linfocitos normales
Linaje B Mutifocal
Linaje T Polar
 ESTERASA INESPECIFICA ALFA NAFTIL ACETATO ESTERASA (ANAE) RX:
Verde-
pardo

Sal diazoica
(cromógeno + sol. nitrito=)

Ph 7.0
ANAE
POSITIVO POSITIVO DEBIL NEGATIVO
Monocitos Mieloblastos Neutrófilos
Megacariocitos Promielocitos Eosinófilos

Histiocitos Linfocitos Basófilos

Linfoblastos Células mastociticas

Eritroblastos

Células Plasmáticas

Células peludas
ESTERASA INESPECÍFICA ALFA NAFTIL ACETATO ESTERASA CON FNA

ESTERASA INESPECÍFICA ALFA NAFTIL ACETATO ESTERASA CON FNA

POSITIVO DÉBIL NEGATIVO
Células linfoides Monocitos
 Azul de prusia o de perls
RX:
Azul
Sales que
contienen
el hierro

Azul de prusia
POSITIVO
Eritrocitos
Macrófagos