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CONCEPTOS

Son un complemento de las


tinciones hematolgicas.
Por medio de ellas se localizan
enzimas y sustancias inorgnicas.
As se mejora la diferenciacin
celular.
Tambin sirven para el diagnstico
de ciertas leucemias.

PROCESOS EN LA TCNICA
CITOQUMICA
Fijacin de la extensin:
Evita el deterioro celular.
Con metanol, etanol, formol,
acetona...
Se coagulan las protenas celulares.
Formando puentes inter e
intraproteicos

Incubacin:
Produce el precipitado caracterstico.

Tincin de contraste:

Progenie linfoide normales


(-)

Hasta llegar al linfocito


donde un 30% es (+) en
corona de grnulos

Linfoblastos leucmicos (+) Positividad en mazacotes


Serie roja normal (-)

Serie roja anormal (+)


[LMA6]

Serie granulocitica (+)


difusa

PAS EN NEUTRFILOS CON PATRN DIFUSO

LMA6 (eritroide) MO PAS: todos los precursores


eritroide contienen glucgeno, nunca los normales.

PAS, mdula sea.


Grnulos gruesos en el
citoplasma de los
linfoblastos.

MIELOPEROXIDASA
La demostracin citoqumica de esta enzima se
basa en la accin oxidante de la peroxidasa sobre
un sustrato (bencidina) en presencia de perxido
de hidrgeno, apareciendo un precipitado azul en
el lugar del citoplasma en donde se ha producido
la reaccin.

BENCIDINA

H2O2
MPO

Tie tanto los grnulos azurfilos


inespecficos como los especficos
de los neutrofilos

LMA2 (con eosinofilia t(8;21): intensa


tincin de las clulas en maduracin y de
los grnulos de los eosinfilos anormales.

FOSFATASA ALCALINA
La fosfatasa alcalina es una hidrolasa perteneciente
al grupo de las fosfomonoesterasas.
Ligeros cambios de pH determinan una rpida
inactivacin de la enzima.
Es un marcador de granulaciones secundarias o
especificas.

La demostracin citoqumica se basa en la


hidrlisis de ciertos substratos, de los cuales se
liberan unos productos intermedios que
combinados con una sal diazoica dan un precipitado
coloreado.

Se encuentran actividad FA en
algunas clulas maduras y
semimaduras de la
granulopoyesis neutrofilica
(segmentados y bandas)

La actividad granulocitica de la FA se
manifiesta en forma de un
precipitado de color pardo negruzco
localizado en el citoplasma

ndice de actividad de
Grado 0: sin reaccinFAL

Grado I: coloracin difusa o con pequeos


puntos coloreados
Grado II: mayor densidad cromtica, por lo
general en la zona del hilio nuclear.
Grado III: mayor granulacin oscura, tie todo
el citoplasma.
Grado IV: completamente oscuro

FOSFATASA ACIDA
Se basa en la hidrlisis del substrato
naftol-AS-Bi-fosfato.
La aplicacin prctica del estudio de la FA se refiere
sobre todo al estudio de los sndromes
linfoproliferativos crnicos (LPC) y leucemia aguda
linfoblstica (LAL), dnde existe una buena
correlacin entre el tipo de positividad y el fenotipo
de membrana.

FAC LT(+) Y LB (-)

El 90% de las LAL de origen T dan una reaccin + intensa de


localizacin centrosmica. La LLC-T y otros SLPC T suelen
cursar con valores elevados de FAC que es tartrato sensible.
La LLC-B presenta muy escasa actividad al igual que ocurre con
otras proliferaciones de linfocitos B.

Tricoleucemia: Tincin fosfatasa cida (+)


tartrato resistente
LLA-T: INTENSA ACTIVIDAD CENTROSOMICA DE FOSFATASA ACIDA EN MAS DEL 70
% DE LOS BLASTOS.

ESTERASAS
4 sustratos:
Naftol-AS-C-cloroacetato (CAE)
Naftol-AS-D-acetato
-naftil-acetato
-naftil-butirato

hidrolizados

precipitado insoluble
sal diazoica

ESTERASAS

Son un grupo de enzimas capaces de hidrolizar steres en sus componentes


cidos y alcoholes. Existen diferentes variedades segn el substrato
empleado.

GR y su
progenie

Granulocitos
y su
progenie

Linfocitos
y su
progenie

Naftil
butirato/
acetato

Normales
(-)
(+) M6

(-) o con
(-) o +
algunas
dbil
granulacione
s F Resit

(+++++)
Fluoruro
sensible

Naftil
cloro
acetato

Idem

(+++++)

(+)

(-)

Monocitos
y su
progenie

BETA - GLUCURONIDASA
En los
lisosomas.
Granulacin
rojiza.
En la
diferenciacin
de los
sindromes
linfoproliferativ

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