LABORATORIO IV-PROF.

ASSOF

FONTEMACHI KARINA -JABDOR ROMINA -

MARIELA CASADIDIO-ALBORNOZ PATRICIA

TRABAJO PRÁCTICO 13

DETERMINACION DE CARBOHIDRATOS
(Tamizaje químico)
OBJETIVO:

 DISTINGUIR CUALITATIVAMENTE DIFERENTES TIPOS DE

CARBOHIDRATOS

ALGUNOS MATERIALES - SOLUCIONES

- Vasos de precipitado, agua destilada, pipetas graduadas, pipetas Pasteur,

tubos de ensayo, probetas, balanza, cucharitas.

MUESTRAS:

 AGUA (NEGATIVO)
 ALMIDÓN
 GLUCOSA
 FRUCTUOSA
 GASEOSA
 TORTITA.

- REACTIVO DE BENEDICT: 1,73 g de Sulfato cúprico pentahidratado + 17,3 g

de citrato de sodio + 10 g de carbonato de sodio anhidro. Vf: 100 mL con agua
destilada. (Disolver primero el sulfato en 15 mL de agua, luego el citrato y
carbonato de sodio en 50 mL, agregar el sulfato y lentamente la mezcla de
citrato/carbonato en el matraz de 100 mL y enrasar).

- SOLUCIONES DE MONOSACÁRIDOS Y POLISACÁRIDOS AL 5%.

- REACTIVO DE FEHLING A: 3,5 g de sulfato cúprico pentahidratado. Vf:

50mL.

- REACTIVO DE FEHLING B: 173 g de tartrato de sodio y potasio o tartrato de

sodio o de potasio + 5 g de hidróxido de sodio. Vf: 50 mL. Mezclar partes
iguales de A y B.

- LUGOL

- REACTIVO DE SELIWANOFF: Disolver 0,5 g de resorcinol en 100 ml de

agua destilada. A 3 ml de esta disolución añadir 12 ml de HCl concentrado.
Llevar a 35 mL con agua destilada.
 EXPERIENCIA 1: REACTIVO DE BENEDICT

Reacción de Benedict:

 Detecta la presencia de azúcares reductores.

 Se basa en la reducción de Cu2+ a Cu+ en medio básico débil.
 Aunque es similar a la reacción de Fehling, el medio básico débil y el
estabilizante (citrato sódico) utilizados hacen que este test sea más
sensible y estable.

PROCEDIMIENTO

1-Se colocan en la gradilla tubos de ensayo, rotulados con el nombre de

la muestra a observar

2-Se añade a cada tubo 10 ml de: agua (ensayo blanco), lactosa, gaseosa,
fructosa.

3-Se añaden 2 ml de reactivo de Benedict a cada uno de ellos y se mezcla

bien.

4-Se calientan en un baño de agua hirviendo durante 5 minutos

La reacción o prueba de Benedict identifica azúcares reductores en
disoluciones alcalinas pueden reducir el Cu +2, que tiene color azul a Cu + , que
en medio alcalino precipita como CuO de color rojo-naranja .

Reactivo Agua Lactosa Gaseosa Glucosa fructuosa

Benedict - + + + +

- Si la reacción es positiva aparece un precipitado rojizo

Conclusión: La solución de benedict se utiliza para detectar azúcares

reductores , normalmente monosacáridos o disacáridos se observará un
resultado positivo para los azúcares reductores como la glucosa , la fructuosa,
la lactosa, la maltosa y la galactosa.

Algunos azúcares tienen la propiedad de oxidarse en presencia de agentes

oxidantes suaves como el ion Fe+3 o Cu+2. Esta característica radica en la
presencia de un grupo carbonilo libre, el cual es oxidado y genera un grupo
carboxilo.

El fundamento de esta reacción radica que, en un medio alcalino, el ion cúprico

(otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo
aldehído del azúcar (-CHO) a su forma de Cu+.

Este nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al

óxido cuproso (Cu 2O).
 EXPERIENCIA 2

LUGOL

El lugol o disolución de Lugol es una disolución de yodo molecular I2 y yoduro

potásico KI en agua destilada. Se preparó por primera vez en 1829 y recibe su
nombre en honor al médico francés Jean Guillaume Auguste Lugol.

La prueba del yodo (lugol) es una reacción química usada para determinar la
presencia o alteración de almidón u otros polisacáridos. El reactivo de Lugol,
que contiene una mezcla de yodo y yoduro, permite reconocer polisacáridos,
particularmente el almidón por la formación de una coloración azul-violeta
intensa y el glucógeno y dextrinas por la formación de coloración roja. Esta
reacción es el resultado de la formación de cadenas de poliyoduro a partir de la
reacción del almidón con el yodo presente en la solución de Lugol.La amilosa,
el componente del almidón de cadena lineal, forma hélices donde se juntan las
moléculas de yodo, formando un color azul oscuro a negro.

El Reactivo de Lugol para el reconocimiento de almidón

El reactivo de Lugol se puede utilizar para reconocer la presencia de almidón,

porque esta sustancia adsorbe el yodo produciendo una coloración azul
intensa, coloración que desaparece al calentar, porque se rompe la estructura
que se ha producido, pero vuelve a aparecer al enfriar.

Nos permite reconocer la presencia de almidón en alimentos como el pan, las

papas, pero también en otros como en diversos tipos de jamón de York y
queso, porque se les añade papa cocida para aumentar el peso. También es
frecuente encontrar almidón en el papel porque se utiliza para darle
consistencia.
Resultados

La coloración producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce entre

las espiras de la molécula de almidón, entre mayor sea la cantidad de almidón,
más intensa será la coloración.

En presencia de almidón, el lugol reacciona cambiando de color marrón

(u ocre) al color violeta. De esta manera, el lugol actúa como un indicador
químico.
 EXPERIENCIA 3:

Reactivo de Fehling

El reactivo de Fehling, también conocido como Licor de Fehling, es una

disolución descubierta por el químico alemán Hermann von Fehling. Se utiliza
como reactivo para la determinación de azúcares reductores.

Sirve para demostrar la presencia de glucosa, así como para detectar

derivados de ésta tales como la sacarosa o la fructosa. El licor de Fehling
consiste en dos soluciones acuosas:

- Reactivo de Fehling A: 3,5 g de sulfato cúprico pentahidratado. Vf: 50 mL.

- Reactivo de Fehling B: 173 g de tartrato de sodio y potasio o tartrato de

sodio o de potasio + 5 g de hidróxido de sodio. Vf: 50 mL. Mezclar partes
iguales de A y B.

Ambas se guardan separadas hasta el momento de su uso, para evitar la

precipitación del hidróxido de cobre

Procedimiento:

 Se enumeran 4 tubos de ensayo.

 Se añade a cada tubo 10 ml de: agua (ensayo blanco), lactosa, gaseosa,
fructosa.
 Se añaden 2 ml de reactivo de Fehling a cada uno de ellos y se mezcla
bien.
 Se calientan en un baño de agua hirviendo durante 5 minutos.
 El ensayo con el licor de Fehling se fundamenta en el poder reductor del
grupo carbonilo de los aldehídos. Éste se oxida a ácido y reduce la sal de
cobre en medio alcalino a óxido de cobre, formando un precipitado de color
rojo.

Conclusión:

Un aspecto importante de esta reacción es que la forma aldehído puede

detectarse fácilmente aunque exista en muy pequeña cantidad. Si un azúcar
reduce el licor de Fehling a óxido de cobre rojo, se dice que es un azúcar
reductor.

Esta reacción se produce en medio alcalino fuerte. Por lo que algunos

compuestos no reductores como la fructosa que contiene un grupo cetona,
puede enolizarse a la forma aldehído dando lugar a un falso positivo. Al
reaccionar con monosacáridos se torna verdoso, y si lo hace con disacáridos
toma el color del ladrillo, en la ebullición se decolora el reactivo.

EXPERIENCIA 4:

REACTIVO DE SELIWANOFF:

La prueba de Seliwanoff es una prueba química que se usa para distinguir

entre aldosas y cetosas. Es decir, permite identificar si un azúcar está formado
estructuralmente por un aldehído o una cetona. Es un método cualitativo de
reconocimiento (el medio pasa de incoloro a rojo

La prueba de seliwanoff es un aprueba química que se usa para distinguir

aldosas y cetosas.Es decir, permite identificar si un azúcar está formado
estructuralmente por un aldehído o cetona .

Es un método cualitativo de reconocimiento (el medio pasa de incoloro a

rojo).Las cetosas se deshidratan más rápidamente que las aldosas,dando
furfurales . Estos se condensan con el resorcinol produciendo un complejo
coloreado.si el tiempo de ebullición se prolonga , puede dar también positivo
para otros azúcares .aunque ambas producen la reacción , las cetosas la dan
rápidamente y las aldosas lentamente.

Es específica para cetosas que contengan 5 o más átomos de carbono , pero

se usa casi exclusivamente para identificar fructuosa.

El reactivo consiste en resorcinol y ácido clorhídrico concentrado.el ácido

clorhídrico se utiliza en la reacción de deshidratación (del monosacárido) y el
resorcinol (en la reacción de condensación del derivado del furfural(el
hidroximetilfurfural)
La prueba se basa en la formación de furfural o en un derivado de esté y su
posterior condensación con el resorcinol , dando un color rojo fuego para
cetosas y rosa para aldosas.

Conclusión:

Con este reactivo se llegó a la conclusión que da positivo en fructuosa y

sacarosa al ser las 2 cetosas, mientras que se obtuvo una reacción negativa en
glucosa, maltosa y lactosa que indican que son aldosas.

Bibliografía:

https://ciencias.ua.es/es/extension-universitaria/documentos/extension-
universitaria/ven-a-hacer-practicas/2017/bioquimica-identificacion-de-
azucares.pdf

https://blog.uchceu.es/eponimos-cientificos/reactivo-de-fehling/

https://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0187-
893X2013000100006

TRABAJO PRÁCTICO N° 14

MUESTRAS: PROTEÍNAS Y AMINOÁCIDOS

MUESTRAS:
ALBUMINA, DILUIDO, 1ML MUESTRA

YOGUR, DILUIDO, 1ML

LECHE 1ML

GELATINA, 1ML

QUESO MORTERO, UN POQUITO AL TUBO DE ENSAYO

AGUA (NEGATIVO)