“AÑO 

DEL BICENTENARIO DEL PERÚ: 200 AÑOS DE INDEPENDENCIA”

Universidad nacional pedro Ruiz gallo

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS

GRUPO Nº 03:
CASTAÑEDA BULNES CLAUDIA ROMINA
HEREDIA VASQUEZ ANDIRA PAOLA
LEYVA ACUÑA NAYELI ADELINDA
MANAY RONCAL GIANELLA REBECA
QUINTERO CAICEDO GIAN PIERRE

CURSO:
VIROLOGÍA

TEMA:
INFORME DE PRÁCTICA N°06

CICLO:
2021-I
INTRODUCCIÓN

Una curva de crecimiento se define como el aumento de la cantidad de constituyentes y

estructuras celulares, cuando hay crecimiento en ausencia de división celular hay
aumento en el tamaño y peso de la célula. Mientras que cuando el crecimiento es
seguido de división de células hay un aumento en el número de células.

El crecimiento de una población es el aumento del número de células como

consecuencia de un crecimiento individual y posterior división. Esto ocurre de una
manera exponencial. El crecimiento exponencial es una consecuencia del hecho de que
cada célula se divide dando dos células.

OBJETIVOS

MATERIAL Y MÉTODO

Materiales y equipos

• Asas

• Centrífuga Hettich Zentrifugen Rotofix 32A

• Filtro tipo jeringa con tamaño de poro de 0,22 µm

• Hisopos estériles

• Incubadora de cultivo Incucell MMM

• Papel filtro

• Placa Petri (Petri)

• Tubos de ensayo

• Tubos de ensayo 13 x 100 mm con tapa

• Tubos para centrífuga

Medios y reactivos

• Agar Mueller-Hinton (MH) (Merck)

• Agar Tripticasa de Soya (TSA) (Merck)

 • Agua destilada

• Caldo Tripticasa de Soya (TSB) (Merck)

• Cloruro de calcio

• Solución salina 0.9 %

Metodología

 Aislamiento de bacteriófagos

Según García y Porras (2018) se realizó según el método de enriquecimiento descrito

por Van Twest y Kropinski con modificaciones.

Se filtró la muestra de agua con papel filtro. Se añadió 50 mL de la muestra filtrada a

50 mL de TSB doblemente concentrado y suplementado con 5 mM de CaCl2. Se
filtró nuevamente con papel filtro y se centrifugó a 1500 RPM por 10 minutos. El
sobrenadante se filtró con filtro tipo jeringa de tamaño de poro de 0,22 µm
directamente sobre un vial estéril. El procedimiento se repitió con las 3 muestras de
agua y las 5 cepas bacterianas.

 Determinación de la presencia de bacteriófagos por Prueba de la Gota

Según García y Porras (2018) se llevó a cabo a través de la Prueba de la gota o Spot
test descrita por Van Twest y Kropinski con modificaciones.

Se inoculó la bacteria huésped, conservada en criovial, en TSB y se incubó por 24

horas a 37°C. Se sembró por agotamiento en agar MH y se incubó nuevamente por el
mismo tiempo. Las colonias aisladas se reconstituyeron en solución salina hasta
escala McFarland 0.5. Se diseminó la bacteria huésped, en la superficie de Petris con
TSA suplementado con 5 mM de CaCl2. Se añadió una gota de filtrado y se incubó
nuevamente bajo las mismas condiciones por 24 horas. Se verificaron las placas en
búsqueda de zonas de lisis

El procedimiento se realizó con cada filtrado obtenido en el paso anterior

REFERENCIAS

García, I., y Porras, M. (2018). Aislamiento de bacteriófagos de Pseudomonas

aeruginosa multidrogo – resistente en aguas de tres ríos de la Provincia de Lima-
Perú [Tesis de Pregrado, UNMSM].

https://cybertesis.unmsm.edu.pe/bitstream/handle/20.500.12672/8241/Garcia_si.pdf?
sequence=1&isAllowed=y