UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

CARRERA DE QUÍMICA FARMACÉUTICA
INFORME DE LABORATORIO

Asignatura: Bioquímica I Nota

Número de práctica: 4
Fecha de realización: 27 de febrero del 2021 Fecha de entrega: 2 de marzo del 2021
Integrantes / Grupo N°: Bermúdez García Claudia Milena (Química farmacéutica)
Chusin Pastuña Mónica Patricia (Química farmacéutica)

Enzima catalasa

1. Objetivos:

1.1 Objetivo general

Comprobar la acción enzimática de la catalasa en el rompimiento de los enlaces de peróxido de

oxígeno.

1.2 Objetivo específico

- Analizar la presencia de enzima catalasa en la papa.
- Comprobar la presencia de oxígeno desprendido en la reacción, mediante prueba con fuego.

2. Marco teórico.

Enzima Catalasa

La catalasa es una enzima antioxidante presente en

la mayoría de los organismos aerobios y cataliza la
dismutación del peróxido de hidrógeno (H2O2) en
agua y oxígeno. La mayoría de estas enzimas son
homotetrámeros con un grupo hemo en cada
subunidad.

𝟐𝑯𝟐 𝑶𝟐 → 𝟐𝑯𝟐 𝑶 + 𝑶𝟐

El peróxido de hidrógeno se forma por la

dismutación del radical superóxido y también en la
reacción de algunas oxidasas. Hay varias enzimas
capaces de degradar el peróxido de hidrógeno: las
catalasas, las peroxidasas y las peroxirredoxinas. Ilustración 1:Estructuta de la enzima catalasa.
(Gonzales., 2010)

Las peroxidasas eliminan el H2O2 usándolo para oxidar otros sustratos. Se han identificado tres grupos
de catalasas:

i) Las catalasas monofuncionales, que contienen hemo y están presentes tanto en los
organismos procariotos como en los eucariotas.
ii) Las Mn-catalasas, que son enzimas hexaméricas que no tienen hemo, tienen Mn en el sitio
activo y sólo están presentes en algunos organismos procariotos anaerobios.
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iii) Las catalasas-peroxidasas, que tienen actividad de catalasa y
de peroxidasa, contienen hemo y sólo están presentes en las bacterias y
los hongos. (DÍAZ, 2002)

Características Estructurales.

La catalasa a nivel celular se encuentra en la mitocondria y los

peroxisomas, excepto en los eritrocitos, donde se encuentran en el
citosol.

En algunas especies la catalasa (CAT) contiene moléculas de

Ilustración 2: nicotinamida
adenin dinucleotido fosfato
nicotinamín adenín dinucleótido fosfatado en su forma reducida
(NADPH) ligadas estrechamente a la enzima; así se ha demostrado que
la CAT humana y la de res están ligadas a 4 moléculas de NADPH, 1 en
cada subunidad y que no existe interacción directa entre el grupo hemo
y el NADPH. (Kirkman, 2011)

Fuentes de catalasa.

El cuerpo produce catalasa, pero las cantidades disminuyen durante el proceso de envejecimiento, lo
que hace que las personas desarrollen enfermedades como el cáncer. Afortunadamente, la catalasa está
presente en varias frutas y hortalizas en cantidades suficientes como para transformar los oxidantes
tóxicos en sustancias útiles para el cuerpo.

1. Pasto de trigo y brotes

Los brotes de gramíneas como el trigo y la cebada, contienen una gran cantidad de antioxidantes,
incluyendo la catalasa. La alfalfa, los repollitos de Bruselas y los brotes jóvenes de las plantas de
color verde oscuro contienen cantidades significativas. Las plantas frescas, crudas y cultivadas en
forma orgánica son las mejores fuentes de catalasa a comparación de las de producción industrial.

2. Hortalizas

El puerro, las cebollas, el brócoli, la chirivía, los zucchini, la espinaca, la col rizada, los rabanitos,
las zanahorias, los pimientos rojos, el nabo, los pepinos, el apio y el repollo colorado son ricos en
catalasa mientras que el zucchini tiene menos. Las papas son una fuente de catalasa económica y
versátil, además las paltas son una de las fuentes más ricas en catalasa, pero también son ricas en
grasas.

3. Frutas

Los kiwis, los duraznos, las cerezas, los damascos, las bananas, el melón y el ananá tienen grandes
cantidades de catalasa, mientras que las manzanas y las uvas tienen menos cantidad. Aunque la
catalasa es una de las enzimas más resistentes al calor, la cocción disminuye su actividad, por lo
que consumir las frutas crudas brinda mayores cantidades de esta sustancia.

4. Suplementos

Los suplementos pueden aportar catalasa, pero a menudo se digieren antes de llegar a los tejidos
para romper las moléculas de hidrógeno. Los suplementos antioxidantes funcionan mejor cuando
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están formados por una combinación de diferentes enzimas. Las vitaminas o los suplementos
hechos con alimentos orgánicos que contienen manganeso, cobre, zinc y selenio, pueden aportar al
cuerpo los componentes necesarios para fabricar más catalasa. (Whitehead, 2017)

3. Materiales y reactivos:

Tabla 1: Materiales y reactivos:

Materiales: Reactivos:
Vaso de precipitación. Peróxido de Oxigeno
Papa.
Piña
Mechero.
Autor: Chusin y otros.

4. Procedimiento (en un diagrama de flujo)

Autor: Bermudez y otros.

5. Discusión de resultados:

En la reacción de la catalasa ocurre la transferencia de dos electrones entre dos moléculas de peróxido
de hidrógeno en la cual una funciona como donador y otra como aceptor de electrones. El mecanismo
de reacción se lleva a cabo en dos pasos.

En el primero la catalasa se oxida por una molécula de peróxido formando un intermediario llamado
compuesto I (caracterizado por tener un grupo ferroxilo con FeIV y un radical catiónico de porfirina),
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en esta reacción se produce una molécula de agua. En el segundo paso de la reacción, el compuesto I es
reducido por otra molécula de peróxido regresando la catalasa a su estado inicial y produciendo agua y
dioxígeno. El compuesto II tiene un estado de oxidación intermedio a los observados en el compuesto
I y la catalasa en reposo. Al reaccionar con una molécula de H2O2 forma el compuesto III, que tiene un
estado de oxidación FeVI. El compuesto II y el compuesto III son inactivos cataliticamente. La catalasa
también puede catalizar ciertas reacciones como peroxidasa. En la reacción de peroxidasa de la catalasa,
el compuesto I puede oxidar el metanol, el etanol, el formato o el nitrato utilizando una molécula de
H2O2 como oxidante. (DÍAZ, 2002)

Ecuaciones: a,b,c.

Como la mayoría de las enzimas son hemotetrámeros con un grupo hemo en cada subunidad, se
distingue que la catalasa en la papa, pertenece a las catalasas pequeñas por ser resistentes a la
desnaturalización y al unirse al NADPH, tienen hemo b y se inhiben e inactivan por sustrato, el cual
funcionaría como una molécula donadora de electrones evitando la formación de los compuestos
inactivos II y III. Además, la ruta más corta el movimiento del electrón sería la nicotinamida (C4)-→-
Pro130-→-Ser196, por el hecho de que este último aminoácido tenga ángulos diedros desfavorables en
la cadena principal, generando una transferencia de electrones. (Miller, 2001)

Conclusiones

Se determinó la presencia de catalasa en la papa mediante la reacción con peróxido de hidrogeno dando
como resultado la presencia de oxígeno, para obtener este producto el proceso necesita de una
trasferencia de electrones en 2 moléculas de peróxido de hidrógeno que actúan como donador y aceptor.

Se detectó la presencia de oxígeno en la mezcla de catalasa con peróxido de hidrogeno mediante una
prueba de combustión que dio origen a una llama de coloración amarilla.

Bibliografía:

DÍAZ, A. (10 de Diciembre de 2002). La estructura de la Catalasa. Obtenido de Departamento de

Bioquímica, Instituto de Fisiología Celular, UNAM:
http://www3.uacj.mx/ICB/redcib/Documents/REB_DOC/2003/06/2003-
2_LA%20ESTRUC_.pdf
Gonzales., M. (25 de Octubre de 2010). Enzima Catalasa. Obtenido de La guia del quimico:
https://quimica.laguia2000.com/conceptos-basicos/enzima-catalasa
Kirkman, H. (11 de Mayo de 2011). Enzimas que participan como barreras fisiológicas para eliminar
los radicales libres: II. Catalasa. (I. H. E. Céspedes, Productor) Obtenido de Tesis de
Investigadores. Instituto de Ciencias Básicas y Preclínicas "Victoria de Girón":
http://tesisdeinvestigadores.blogspot.com/2011/05/la-catalasa-enzima.html
Miller. (2001). Manual de Laboratorio. En Química de alimentos. México: Limusa Wiley.
Whitehead, C. (20 de Noviembre de 2017). Frutas y hortalizas que son fuentes de catalasa. Obtenido
de El How, en español: https://www.ehowenespanol.com/cuanta-proteina-hay-lentejas-
info_156192/
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6. Anexos:

Tabla #2: Fotos del experimento

Figura 1: Materiales y reactivos Figura 2: Agitación de la mezcla

Figura 3: Inicio de la formación de oxígeno Figura 4: Presencia de oxígeno

Autor: Bermúdez y otros

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Tabla # 3: Ensayo 2 piña

Figura 5: Comprobación de la presencia de catalasa en la piña

Autor: Bermúdez y otros