El examen coproparasitoscópico, consiste en un estudio de laboratorio con el
cual se hace un análisis de la materia fecal, con el objetivo de detectar la existencia de parásitos intestinales. El examen coproparasitario es la mayor herramienta diagnóstica disponible en el caso de las enteroparasitosis, y su composición puede ser variada de acuerdo con las necesidades eventuales de un diagnóstico, presencia de nuevas afecciones emergentes o peculiaridades regionales. que impongan el diagnóstico de una endemia loca
o Condiciones de Toma de muestras, número de muestras de
utilidad.
Una muestra correcta de materia fecal para el examen
coproparasitario debe ser suficiente (más de 50 g), reciente (conservar en heladera hasta 8 horas y aplicar conservadores en plazos mayores), correctamente rotulada (nombre del paciente y fecha de emisión), en frasco de vidrio transparente, limpio, seco y de boca ancha con tapa-rosca y sin mezcla de orina (para evitar deterioro de 216 parásitos o dificultades para extender frotis de coloración.
El cronograma de obtención del material debe considerar:
a) Las muestras únicas solo permiten diagnósticos positivos en 60% de las materias con parásitos
b) Los parásitos (protozoarios y helmintos) tienen ciclos de eliminación
de huevos y quistes con períodos negativos para la presencia de los mismos en las materias fecales
c) Existen diversos esquemas sobre la secuencia de las muestras
recolectables. Los esquemas de recolección más empleados indican tres muestras en días alternos, colectadas según lo anteriormente expresado. o Propiedades organolépticas (Macroscópico).
El “Examen macroscópico” de la materia fecal que consiste en un
tamizado de la misma para el hallazgo e identificación de macroparásitos. Con la materia fecal inicial o la obtenida luego del enriquecimiento se pueden preparar extendidos que serán fijados y teñidos con coloraciones específicas según el parásito que se quiera investigar. La materia fecal recogida luego de la administración de un purgante salino lleva sólo 2 días de recolección por lo tanto se llega más rápido al diagnóstico, pero presenta el inconveniente que no puede realizarse en personas que presenten dolores intestinales, diarrea y en todos los casos que estén contraindicados los purgantes. Tiene como otras ventajas que permite ver la movilidad de los protozoarios y se logra una mejor visualización de los macroparásitos ya que por la dieta en el tamizado aparecen muy pocos restos
o Técnicas de concentración y sedimentación.
La concentración fecal ha llegado a ser un procedimiento de rutina como
parte de un examen completo para el diagnóstico de parásitos. La finalidad de la concentración de heces es separar los parásitos de la masa de material de la muestra, (formada por bacterias, alimento no digerido, etc.) y tratar de aumentar la cantidad de microorganismos para favorecer su visualización debido a que los parásitos microscópicos no se multiplican en las heces como lo hacen algunos de ellos en ciertas condiciones de cultivo in vitro
A veces la cantidad de microorganismos en una muestra fecal es escasa.
Esto puede suceder por intermitencia en la eliminación (característica de los parásitos), porque algunos parásitos eliminan pocos huevos, quistes u ooquistes durante su ciclo de vida, o bien porque el paciente es portador o ha recibido tratamiento antiparasitario. Un método de enriquecimiento siempre debe ir acompañado de una observación directa de la muestra no solo para evaluar la eficacia en el método de concentración empleado sino también porque estas técnicas generalmente no concentran los trofozoítos y en algunos casos puede presentarse esta forma parasitaria únicamente . La técnica de sedimentación se basa en la concentración de elementos parasitarios por la acción de la gravedad, y se lleva a cabo suspendiendo las heces en agua corriente, agua destilada o solución salina y dejando que se verifique un asentamiento natural, o bien se puede acelerar el proceso mecánicamente por medio de la centrifugación.
Estos métodos son principalmente útiles para la concentración de quistes,
ooquistes y huevos, es decir que son aplicables para casi todos los parásitos fecales y son recomendados de uso general cuando el diagnóstico no esta orientado a ningún parásito en particular. La desventaja que tienen con respecto a los de flotación es que a veces la observación microscópica puede dificultarse por la presencia de la concentración de restos no parasitarios
Hay una gran variedad de métodos de sedimentación
TIPO DE METODO SEDIMENTACION
Sedimentación Método de sedimentación sencilla
espontanea Método de sedimentación simple deLumbreras Método de Baermann- Moraes Sedimentación por Método de Charles- Batherlemy centrifugación Método de formol-eter o Ritchie Método de Acetato de Etilo (macro y micro técnicas)
o Fundamento de técnicas cualitativas y cuantitativas (Microscopicas).
El examen MICROSCÓPICO se debe realizar lo antes posible. Puede tratarse de
análisis cualitativos (si solamente perseguimos la determinación de presencia/ausencia de formas parasitarias en las muestras) o cuantitativos (si además queremos determinar el número de formas parasitarias presentes en la misma). Técnicas Fundamento microscópicas Cualitativas Técnica de Kato o Método que consiste en la diafanización método de o aclaración de las heces con el uso de concentración glicerina, que permite preparar una capa cualitativo. transparente y observar las formas parasitarias. Cuantitativas Kato-Katz Se basa en la técnica de Kato y que (análisis cuantitativo= permite cuantificar la presencia de hpg) huevos de helmintos. Se expresa en número de huevos por gramo de heces (hpg)
o Investiga las siguientes técnicas especiales, fundamento y
metodología.
TECNICA FUNDAMENTO METODOLOGIA
Graham Es el método de elección para 1. Con anterioridad instruir al paciente
el diagnóstico de Enterobius para que llegue por la mañana al vermicularis, aunque también laboratorio, sin bañarse ni defecar para se han encontrado huevos de evitar el arrastre mecánico de los huevos Taenia, huevos de Ascaris del parásito. lumbricoides de T. trichiura y de H. nana 2. Tomar el abatelenguas y cerca de los extremos colocar la punta de la cinta adhesiva, con la parte adherente hacia fuera, sujetar con otra porción de cinta. Como de muestra en la fig. No. 3. Colocar al paciente en posición genupectoral. 4. Hacer presión sobre la porción perineal y perianal, con movimientos de arriba hacia abajo y de derecha hacia izquierda. 5. Separar cuidadosamente la cinta del abatelenguas con ayuda de las tijeras. 6. Adherir al portaobjetos y en uno de los extremos rotular la muestra.
Amiba en Es un método sencillo de 1.La muestra se toma directamente del
fresco realizar y que ayuda en la búsqueda de protozoarios así recto del paciente (Rotación delicada) como sus quistes y trofozoítos. Permite observar 2.Se utiliza un hisopo estéril de algodón que se coloca en un tubo de ensallo con la motilidad de los microorganismos. 2-3 ml de solución salina 3. Tomar una gota de la muestra y colocar en un portaobjetos. 4.Colocar el cubreobjetos y observar al microscopio
Citología de Permite diferenciar la 1. Se toma una pequeña porción de moco
moco fecal etiología de una infección viral presente en la muestra o materia fecal, o bacteriana se realiza un extendido en un portaobjetos limpio y desengrasado 2.Se deja secar, a continuación de tiñe con la tinción de Wrigth: cubrir el frotis con colorante de Wrigth durante 8 minutos. Sin volcar agregar una cantidad igual del amortiguador de Wright sopando ligeramente para mezclar ambos liquidos. Dejar actuar de 6 a 10 minutos, se formara una superficie de brillo metálico, volcar y lavar con agua corriente y dejar secar. 3.Observar al microscopio en objetivo de 100x y se realiza un recuento de 100 células mononucleares y polinucleares.
Método de Esta técnica es para la 1. Colocar un embudo en un soporte
Baerman separación de larvas, se vertical, agregando al vástago del emplea principalmente en embudo una goma de caucho cerrada estrongiloidiasis, para con una pinza. concentrarlas a partir de heces, cultivos o tierra. 2. Verter agua en el embudo, a temperatura de 37º- 42º, hasta cerca del borde. 3. Colocar sobre el embudo una malla metálica o colador, cubierto con gasa doble de tal forma que haga contacto con el agua tibia. 4. Poner sobre la gasa 8 a 10 gramos de materia fecal, tierra o material de cultivo. Puede ponerse una bolsa con hielo en la parte superior del colador para acelerar el proceso. 5. Dejar de 60 a 90 minutos. 6. Las larvas migran por diferencia de temperatura y sedimentan en la porción de la goma de caucho de donde se colectan en un tubo por apertura de la pinza.
Técnica de Este método se fundamenta 1. Agregar al tubo 1 ó 2 mL de agua
Harada – Mori en que los huevos de ciertos destilada o solución salina. nematodos pueden tener su desarrollo hasta estadios 2. Cortar una tira de papel filtro de 12-15 x 1,5-2 cm dependiendo del diámetro y larvales permitiendo su diferenciación morfológica, tamaño del tubo. bajo condiciones favorables. 3. Extendido de la muestra 4. Con el aplicador, extender la muestra de heces (0,5 a 1 g) sobre la superficie del papel, dejando libre los extremos. 5. Colocar cuidadosamente el papel filtro dentro del tubo, evitando el contacto de las heces con el líquido. 6. Tapar el tubo y rotular con los datos del paciente. 7. Incubar a 27ºC - 37°C por 4 a 10 días
Sedimentación Este procedimiento de 1. En el recipiente donde se llevó la
simple en decantación en copas es una muestra al laboratorio se homogeneiza la copas técnica farmacéutica conocida muestra con agua de la llave y se hace desde muchos años en el cual pasar a través de la gasa previamente se utiliza un procedimiento colocada en un embudo y recibiendo la físico para la separación de suspensión en la copa. mezclas. 2. Se colocan 5 ml de colorante y se agita con un aplicador 3. Se agregan 5 ml de la solución de detergente y se agita nuevamente 4. Se completa el volumen de la copa y se deja reposar durante 15 min. 5. Se decanta el sobrenadante y se agrega más agua, mezclando con el aplicador y se deja reposar otros 15 min. 6. Se decanta nuevamente el sobrenadante. 7. Con la pipeta con bulbo, se toma del sedimento la muestra que se coloca en el portaobjetos y se pone el cubreobjetos. 8. Se observa con el microscopio, usando objetivos de 10X y 40X, cuando sea necesario. 9. Se hacen tres preparaciones de cada sedimento para asegurar la positividad de la muestra. Cuando se tiene suficiente practica se puede utilizar la lupa del microscopio, sobre todo cuando se busca la F. hepática.
Estudios de gabinete (Endoscopia, colonoscopia)
Endoscopia: La endoscopia es un examen de las estructuras internas mediante
una sonda de fibra óptica flexible (endoscopio) Colonoscopia: Procedimiento que usa un médico para observar el interior del colon y del recto con un colonoscopio (tubo flexible del grosor de un dedo que tiene una luz y una pequeña cámara de video en uno de sus extremos. Se introduce por el ano y se lleva hasta el recto y el colon. Se pueden pasar instrumentos especiales a través del colonoscopio para tomar una biopsia (muestra) o para extirpar cualquier área de apariencia sospechosa, como pólipos, si es necesario.
Referencias
1. R Salvatella C Eirale Examen coproparasitario. Metodologia y empleo.
Revision técnico metodológica Rev Med Uruguay 1996: 2015-223 2. H Magato A Uttaro P Ponce Técnicas de diagnóstico parasitológico FACULTAD DE CIENCIAS BIOQUIMICAS Y FARMACEUTICAS. UNR. Departamento de Microbiología Área parasitología 3. S Ortigoza M Cruz Parasitología general Facultad de bioanálisis región Veracruz. Manual de procedimientos para el laboratorio de la E.E. Universidad veracruzana.
INFORME N°3 OBSERVACION DE QUISTES Y TROFOZOITOS DE Giardia Lamblia y TROFOZOITOS DE Trichomonas Vaginalis. TECNICAS DE DIAGNOSTICO COPROPARASITOLOGICO