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UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN MARTÍN

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS


Escuela Profesional De Medicina Veterinaria
Semestre Académico 2023-I
GUIA PRACTICA DE PARASITOLOGIA VETERINARIA

TOMA DE MUESTRAS DE HECES

1. Propósito

El hallazgo de huevos o larvas en las heces puede indicar la presencia de infecciones


parasitarias y facilitar el diagnóstico de enfermedades parasitarias. Los huevos y las
larvas pueden ser identificados y cuantificados. Para este fin, el material fecal puede ser
procesado por:

• un frotis directo en un microscopio para una identificación preliminar de huevos


• una técnica de flotación para concentrar los huevos y separar los detritos para
su identificación y conteo
• cultivo de heces para eclosionar los huevos y desarrollar las larvas hasta su
tercer estadio para su identificación

2. Principio

Los huevos y larvas producidos por helmintos adultos en el animal hospedero,


generalmente son eliminados en las heces.

3. Equipamiento

• Botella de tapa-rosca con boca ancha, capacidad mínima 30 ml


• Recipientes de plástico con tapas, capacidad mínima de 30 ml
• Guantes desechables para toma de muestras
• Bolsas de plástico
• Plumón marcador para etiquetado
• Contenedor térmico para transportación de muestras
• Refrigerador en laboratorio apropiado para almacenamiento de muestras
fecales

4. Procedimiento

a. Muestreo directo del recto

• Las muestras para examen parasitológico deben ser, preferentemente, tomadas


directamente del recto. Se deben usar guantes desechables apropiados.

• La toma de muestras puede ser más fácil de realizar en animales grandes que
en animales más pequeños.
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• Animales pequeños como los corderos pueden ser inducidos a defecar


insertando un dedo humedecido en el recto y proporcionando masaje hasta que
el esfínter se relaje.
• Si es un hato el que está siendo examinado, las muestras deberán ser tomadas
de varios animales seleccionados al azar o de animales afectados por helmintos
parásitos, dependiendo de las circunstancias.

• Al examinar aves, las muestras de heces no deberán ser tomadas directamente


de la cloaca. Si se requiriera de una evaluación individual. El ave deberá ser
enjaulada separadamente para colectar las deposiciones frescas. Si no se
requiriera una evaluación individual de las aves entonces se podrán colectar las
heces directamente del corral comunal.

b. Muestreo del suelo

• Las muestras pueden ser colectadas del suelo si se ve al animal defecando. Las
muestras colectadas de esta manera deben ser frescas para que sean
apropiadas para un examen parasitológico.

• Si se está examinando un hato, se deben tomar varias muestras provenientes


de diferentes animales.

c. Envasado y trasnporte

• Llenar el recipiente a toda su capacidad antes de cerrar con la tapa o atar el


guante desechable tan cerca de las heces como sea posible.

• Es importante excluir el aire del recipiente dado que esto retardará el desarrollo
de los huevos.

• Cada muestra deberá ser cuidadosamente etiquetada con la identificación del


animal del que se tomaron las heces, la fecha y el lugar de colecta.

• Las muestras deberán ser empacadas en un contenedor térmico para su


transportación al laboratorio.

d. Almacenamiento

• Tan pronto como las muestras lleguen al laboratorio deberán ser almacenadas
en un refrigerador a una temperatura de 4 °C hasta que estas sean procesadas.

• Las muestras pueden ser mantenidas en refrigeración hasta por tres semanas
sin presentar cambios significativos en la cuenta de huevos y en su morfología.
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• Si no es posible almacenar las muestras en un refrigerador por algún tiempo


después de su colección, se puede añadir formalina a las heces para preservar
los huevos. La concentración final de formaldehido en la mezcla deberá ser de
al menos 3% (por ejemplo mezclando 1 ml de formalina concentrada por cada
10 ml de heces).
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FROTIS FECAL

1. Propósito

• Demostrar la presencia de helmintos e identificar especies o grupos de


helmintos presentes.

• Proporcionar un método rápido y simple pero relativamente insensible para


demostrar una infección por helmintos e identificar los huevos y larvas
presentes.

2. Principio

Los huevos y larvas de helmintos pueden ser identificados en un frotis delgado de heces
en un portaobjetos.

3. Equipamiento

• Portaobjetos
• Cubreobjetos
• Solución salina (0.85%) o agua

4. Procedimiento

a. Frotis

• Hacer un frotis con una pequeña cantidad de heces sobre un portaobjetos


limpio.
• Mezclar con unas cuantas gotas de agua o suero fisiológico.
• Colocar un cubreobjetos sobre el frotis.
• El material fecal no deberá estar muy concentrado en el centro del
cubreobjetos, más bien deberá estar uniformemente distribuido de tal modo
que deje pasar la iluminación del microscopio.
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b. Lectura

• Examinar el frotis empezando en una esquina moviendo el portaobjetos hasta


llegar a la esquina opuesta.

• Hacer el movimiento de reversa traslapando el campo y continuando hasta que


el frotis ha sido examinado en su totalidad.

5. Interpretación de resultados

• Este método no puede ser usado para obtener resultados cuantitativos.


• El frotis solo muestra la presencia de huevos o larvas de helmintos y permite la
identificación de especies o grupos presentes.
• El método es relativamente insensible y dependiente de que el número de
huevos en la muestra sea alto.
• Puede ser difícil observar o identificar los huevos debido a que pueden estar
parcial o completamente cubiertos por los detritos.
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FLOTACION SIMPLE

1. Propósito

La prueba simple de flotación en tubo es una prueba cualitativa para la detección de


huevos de nematodos y cestodos. Es un método útil en estudios preliminares para
establecer qué grupos de parásitos están presentes.

2. Principio

Los huevos son separados del material fecal y concentrados por un fluido de flotación
con una gravedad específica apropiada.

3. Equipamiento

• Dos vasos o recipientes de plástico


• Colador de té o estopilla de doble capa
• Probeta o recipiente graduado por volumen
• Tenedor, abate lenguas o varillas para revolver
• Tubo de ensayo
• Gradilla para tubos de ensayo
• Microscopio
• Portaobjetos y cubreobjetos
• Balanza
• Fluido de flotación (Anexo 1)

4. Procedimiento

• Pesar 3 g de heces y poner dentro del recipiente uno.


• Verter 50 ml de fluido de flotación dentro del recipiente uno.
• Revolver o mezclar las heces y el fluido de flotación cuidadosamente con un
abate lenguas o un tenedor.
• Verter la suspensión fecal, a través de un colador de té o doble capa de estopilla,
dentro del recipiente dos.
• Verter la suspensión fecal del recipiente dos en el tubo de ensayo colocado en
una gradilla.
• El tubo de ensayo es llenado cuidadosamente hasta el tope con la suspensión
dejando un menisco convexo en el extremo superior del tubo.
• Colocar cuidadosamente un cubreobjetos en el extremo superior del tubo de
ensayo.
• Dejar reposar el tubo de ensayo durante 20 minutos.
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• Retirar cuidadosamente el cubreobjetos del tubo de ensayo junto con la gota


de fluido adherida a este.
• Colocar el cubre objetos sobre un portaobjetos limpio.
• Examinar usando un microscopio
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SEDIMENTACION FECAL

1. Propósito

La técnica de sedimentación es un método cualitativo para la detección de huevos de


trematodos en las heces.

2. Principio

La mayoría de los huevos de trematodos son demasiado grandes y pesados para flotar
de manera confiable en un fluido de flotación normalmente usado para huevos de
nematodos. Sin embargo, este tipo de huevos se hunden rápidamente hacia el fondo de
una suspensión heces/agua y esta es la base de la técnica de sedimentación fecal.

3. Equipamiento

• Dos vasos o recipientes de plástico


• Colador de té o estopilla de doble capa
• Probeta graduada
• Tenedor, abate lenguas o barra mezcladora
• Tubos de ensayo
• Gradilla para tubos de ensayo
• Solución de Azul de metileno al 1% o Solución de Verde de malaquita al 1%
• Portaobjetos y cubreobjetos
• Pipetas
• Balanza
• Microscopio

4. Procedimiento

• Pesar o medir aproximadamente 3 g de heces y colocar dentro del recipiente


uno.
• Agregar 40-50 ml de agua potable dentro del recipiente uno.
• Mezclar a fondo las heces y el agua
• Filtrar la suspensión con un colador o doble capa de estopilla en el recipiente
dos.
• Verter el material filtrado a un tubo de ensayo.
• Dejar sedimentar por 5 minutos.
• Remover muy cuidadosamente el sobrenadante con una pipeta.
• Resuspender el sedimento en 5 ml de agua.
• Dejar sedimentar por 5 minutos.
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• Desechar con mucho cuidado el sobrenadante.


• Colorear el sedimento añadiendo una gota de azul de metileno o verde de
malaquita.
• Los tintes colorean las partículas fecales de azul oscuro o verde vivo, los huevos
de trematodos no se colorean.
• Usando una pipeta, transferir una pequeña gota del sedimento teñido a un
portaobjetos.
• Cubrir la gota con un cubreobjetos.
• Examinar en un microscopio.
• Repetir hasta que todo el sedimento ha sido examinado.
• Alternativamente, verter el total del sedimento en una caja de petri y examinar
metódicamente en un estereoscopio.
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ANEXO 1

1. Solución sobresaturada de sal

Gravedad específica: 1.18 - 1.20


Solución de propósito general.

Cloruro de sodio: 400 gramos


Agua: 1000 ml

Revolver cuidadosamente antes de usar.


Puede deformar los huevos.

2. Solución sobresaturada de sal/azúcar

Gravedad específica: 1.28


Solución de propósito general.

Cloruro de sodio: 400 gramos


Agua: 1000 ml
Azúcar: 500 gramos

Disolver la sal en agua para hacer una solución saturada.


Agregar el azúcar a la solución salina saturada.
Revolver hasta que el azúcar se disuelva.

3. Solución sobresaturada de azúcar

Solución de azúcar saturada


Gravedad específica: 1.27

Esta solución debe ser utilizada cuando se requiere conservar los huevos para su
cultivo dado que tiene poco efecto sobre su viabilidad.

Azúcar (sucrosa): 454 gramos


Agua: 355 ml

Agregar azúcar al agua hasta que quede saturada.

Revolver bien la solución antes de usarse.


Un indicio de saturación se da por la presencia de cristales de azúcar en el fondo del
recipiente después de revolver por 15 minutos.
Para prevenir el crecimiento de hongos se debe adicionar aproximadamente 2 ml de
formaldehído al 37%.

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