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AÑOS LABRANDO GUÍA DE LABORATORIO DE BIOLOGÍA

EL CAMINO A LA PAGINA: _1_ DE _2_
EXCELENCIA GRADO: 9° AÑO: 2022
DOCENTE: AURA RENTERÍA BLANCO.

PRÁCTICA DE LABORATORIO DE BIOLOGÍA:

EXTRACCIÓN DE ADN VEGETAL
OBJETIVOS:
 Aplicar una técnica sencilla para obtener ADN de células vegetales a partir de materiales
cotidianos.
 Comprender el proceso necesario para la extracción del ADN en laboratorio.

FUNDAMENTACIÓN:
A lo largo del tiempo se han diseñado distintos protocolos con la finalidad de obtener una
cantidad y calidad de ADN adecuados, así como garantizar la eliminación de inhibidores
potenciales que dificulten el tratamiento posterior de la molécula. Los métodos tradicionales,
desarrollados en los años 50, utilizan solventes orgánicos para separar a las proteínas del ADN y,
una vez suspendido en la fase acuosa, aislarlo por precipitación con etanol. Estos métodos
requieren preparar soluciones y la extracción puede tomar desde unas horas hasta varios días
por los numerosos pasos que deben realizarse. En general, los protocolos tradicionales
consisten de cinco etapas principales: homogeneización del tejido, lisis celular, separación de
proteínas y lípidos, precipitación y redisolución del ADN.

MATERIALES:
- Muestra biológica (triturado de tomate o banano maduro)
- Agua con gas o mineral
- Detergente líquido lavavajillas
- Sal común
- Bicarbonato sódico
- Alcohol al 96 % frío
- Hielo
- Colador
- Tubo de ensayo

PROCEDIMIENTO:
1. Preparar la denominada “disolución de lisis” mezclando medio vaso de soda fría, una
cucharadita rasa de sal, tres cucharaditas rasas de bicarbonato sódico y dos cucharaditas de
detergente lavavajillas. Mantener en hielo hasta su utilización.
2. Mezclar un volumen del vegetal batido con dos volúmenes de la disolución de lisis.
3. Agitar vigorosamente durante unos dos minutos y dejar reposar en frío hasta que
desaparezca más de la mitad de la espuma.
4. Filtrar la mezcla por un colador para retener los restos tisulares y obtener el denominado
“caldo molecular”, en el que se encuentran los restos celulares de pequeño tamaño y las
biomoléculas como el ADN.
5. En un tubo de ensayo, añadir un volumen de caldo molecular y dos volúmenes de alcohol frío,
dejando resbalar lentamente este por la cara interna del recipiente para evitar que se mezclen.
6. Observar cómo se forman unos filamentos blancos y salinos (en los que se encuentra el ADN)
en la interfase agua-alcohol.

EVALUACIÓN DE LA PRÁCTICA:
1. Describe lo observado en el paso 6.
2. ¿Cuál es la función del detergente lavavajillas en el procedimiento de extracción de ADN?
3. ¿Por qué el proceso debe realizarse en frío?
4. ¿En qué campos de las ciencias sería útil la extracción de ADN y por qué?
5. Explica cómo está conformada estructuralmente la cadena de ADN.