Valentina Corredor Arias

Grupo B
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UNIVERSIDAD LIBRE SECCIONAL CALI MEDICINA

TERCER SEMESTRE BIOLOGIA MOLECULAR
INFORME N°2 ELECTROFORESIS – VISUALIZACIÓN DE ÁCIDOS
NUCLEICOS

I. Preguntas:
1. ¿Explique la función del tampón de carga de ADN?
El tampón de carga de ADN se utiliza principalmente para:
• Estos tampones de carga de ADN están compuestos por un colorante (Azul de
Bromofenol) y un agente de densidad (Xileno-Cianol) los cuales permiten aumentar
la densidad de la muestra de ADN y con el colorante hacer visible la muestra para así
poder reducir el proceso de carga
• Permite hacer un seguimiento en cuanto a su desplazamiento hacia el ánodo a una
velocidad previsible.
• no alterar las cargas del ADN en su mayor medida, permitiendo así mantener su pH
y conservar su conductividad.
2. ¿Cuál es la relación que existe entre voltaje y velocidad en la electroforesis?
La relación en la electroforesis consiste en una relación directamente proporcional puesto
que a mayor voltaje habrá mayor carga eléctrica hacia los polos, por lo que la atracción será
mayor y más rápida, es muy importante en la electroforesis ya que permite la movilización
de las moléculas de DNA de un polo a otro.
3. ¿Cuál sería el efecto de intercambiar los electrodos en la cámara de electroforesis?
En caso de poner los polos del lado contrario a lo establecido en la cámara de electroforesis,
no se vería movimiento, pues la muestra ya se encontraría hacia el borde de atracción,
provocando que la conductancia eléctrica se invirtiera, generando que las muestras de DNA
salgan del pocillo, por ende, también saldrá del gel.
4. Describa, de manera corta, el fundamento de la separación del ADN en la
electroforesis en gel de agarosa.
La electroforesis es una técnica que permite la migración de una partícula cargada la cual es
sometida a un campo eléctrico. Con respecto a la separación del ADN, se tiene en cuenta que
es una molécula cargada negativamente gracias a su grupo fosfato, por tanto, el gel de agarosa
es el medio por el cual formara una “pared” porosa, por donde se va a desplazar las moléculas
de DNA, El gel de agarosa y la poliacrilamida son utilizadas para la fragmentación del DNA
(ácidos nucleicos).
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5. ¿Observó RNA en el gel? Justifique su respuesta.

No puesto que anteriormente se había realizado una extracción de DNA dando como
resultado una muestra que solo contenía DNA, también la preparación debió hacerse con
anterioridad sometiéndola a una temperatura especifica para conservar el ARN
6. ¿Cuál es la razón por la cual los ácidos nucleicos (ADN y ARN) viajan del polo
negativo hacia el positivo?
Los ácidos nucleicos son moléculas cargadas negativamente debido a la presencia del grupo
fosfato, ya que este tiene moléculas de oxígeno con electrones libres dando una carga
negativa neta. Añadiendo a lo anterior la ley de atracciones de las cargas, la cual consiste en
la atracción de las cargas opuestas, explicaran el porqué del ADN cargado negativamente se
mueve del polo negativo al positivo.
7. ¿Qué es y qué función cumple el marcador de peso molecular?
Los marcadores de peso molecular son fragmentos de DNA o ARN de los cuales se conoce
su tamaño (en pares de bases) y sirven de estándar o guía para hacer el análisis de las muestras
en la electroforesis.
8. ¿Qué es un Smear o Barrido de ADN y a qué se debe su aparición?
El Smear o barrido de ADN se da cuando en una electroforesis se pueden observar gran
cantidad de líneas una seguida de la otra, esto puede ser debido a la presencia de fragmentos
de oligonucleótidos de diferentes pesos moleculares. También puede ocurrir por una mala
preparación o mal almacenamiento del ADN. (a)
9. ¿Cuál es el fundamento químico que permite la visibilidad de ADN en LUV?
El ADN en su preparación es puesto en una solución con Bromuro de etidio (colorante),
este, es un compuesto que, al estar en contacto con el ADN, se intercala entre las bases y
permite visualizarlo. Como se sabe, la composición química del bromuro de etidio le da la
característica de fluorocromo que, al exponerse a luz ultravioleta, permite ver el ADN al que
sea visualizado.
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10.Incluir en el informe la foto del gel con los siguientes datos:

a.Código de cada muestra sembrada por línea, incluyendo elMPM.

• MP → marcadores de peso molecular
• Números en la parte superior de cada carril→ corresponde a el ADN extraído
b.Concepto sobre la calidad de cada muestra de ADN aislada: apto o noaptoi.Apto:
ADNrelajadoii.No apto: No hay ADN o estásuperenrrollado
Carril 1→ ADN apto: relajado
• Carril 2→ ADN apto: relajado
• Carril 3→ ADN apto: relajado
• Carril 4→ ADN apto: relajado
• Carril 5→ ADN NO apto: → en este carril se puede observar una mayor
iluminación al final de su recorrido lo que podría indicar que si pudiese
presentar un superenrollamiento
• Carril 6→ ADN NO apto: relajado→ en este carril se puede observar una mayor
iluminación al final de su recorrido lo que podría indicar que si pudiese
presentar un superenrollamiento
• Carril 7→ ADN apto: relajado
• Carril 8→ ADN apto: relajado
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Bibliografía
1. Carmen Alicia Padilla Peña, Jesús Diez Dapena, Emilia Martínez Galisteo, José

Antonio Bárcena Ruiz, Concepción García Alfonso. (s. f.). - electroforesis de ácidos

nucleicos en geles de agarosa. Aislamiento y caracterización electroforética de

DNA plasmídico. pdf. Recuperado 26 de septiembre de 2021, de

https://www.uco.es/dptos/bioquimicabiolmol/pdfs/17%20ELECTROFORESIS%20

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2. Módulo de Diagnóstico Molecular. (s. f.). pdf. Recuperado 26 de septiembre de

2021, de https://bdigital.zamorano.edu/bitstream/11036/4100/2/02.pdf

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septiembre de 2021, de https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-

expression-and-regulation/biotechnology/a/gel-electrophoresis

4. Vega S, Rector L, Norberto Manjarrez Álvarez G, General S, Velázquez J, Rector

M, et al. UNIVERSIDAD AUTÓNOMA METROPOLITANA UNIDADIZTAPALAPA
[Internet]; Available from: http://publicacionescbs.izt.uam.mx/DOCS/biomolec.pdf
5. Salazar Montes, A., Sandoval Rodríguez, A. and Armendáriz Borunda, J., n.d.
Biología molecular. Fundamentos y aplicaciones en las ciencias de la salud. 1st ed.
México: McGRAW-HILL INTERAMERICANA EDITORES, S.A. de C. V, pp.111.