Electroforesis de Proteinas

ELECTROFORESIS DE PROTEINAS
La electroforesis de protenas es una metodologa que permite separar las protenas presentes en
sangre (suero) o en orina. En esta tcnica se aplica una corriente elctrica para desplazar las
protenas sobre una capa fina de agar similar a un gel. La distancia que recorre cada tipo de
protena depende de su tamao, su forma, y su carga elctrica. Las protenas as separadas
pueden detectarse mediante un colorante que se fija y tie las distintas protenas y pone de
manifiesto un patrn de bandas caracterstico. Cada banda indica la presencia de una protena,
mientras que el tamao de la banda aporta una aproximacin de la cantidad de protena. Este
patrn de bandas se convierte posteriormente en un grfico, que muestra picos verticales all
donde existe mucha cantidad de una determinada protena, y unos picos ms pequeos o valles
donde existe menos. Un nuevo mtodo conocido como electroforesis capilar separa las protenas
hacindolas pasar a travs de una columna fina y larga, dibujando un grfico muy similar al que se
obtiene con la electroforesis en gel de agarosa.
Protenas especficas que sean de inters pueden identificarse fijndolas en el gel mediante el uso
de anticuerpos, procediendo despus a la tincin, previa eliminacin por lavado del resto de
protenas. Este procedimiento es conocido como inmunofijacin (IF). Anteriormente se haba
utilizado un mtodo ligeramente diferente, la inmunoelectroforesis, para identificar protenas
especficas. Sin embargo, esta ltima tcnica ha quedado ampliamente desplazada por la IF, dado
que la IF resulta ms fcil de realizar y de interpretar.
Con una electroforesis, las protenas sricas quedan separadas en cinco o seis bandas principales.
Estas fracciones son conocidas como albmina, alfa-1, alfa-2, beta, y gamma (la fraccin beta se
encuentra a veces dividida en beta-1 y beta-2). La albmina, producida en el hgado, se
corresponde con una nica banda y representa aproximadamente el 60% de las protenas sricas.
Con el trmino globulinas se est aludiendo al resto de protenas diferentes de la albmina. A
excepcin de las inmunoglobulinas y de algunas protenas del complemento, la mayor parte de
protenas son tambin de sntesis heptica. Una descripcin ms amplia de todos estos grupos de
protenas puede encontrarse en la tabla Grupos de Protenas. Las bandas que se visualizan en la
electroforesis de protenas definen unos patrones caractersticos. Alteraciones de estos patrones
se asocian a toda una serie de condiciones y enfermedades diferentes. Por ejemplo, en el mieloma
mltiple (un tipo de cncer de las clulas plasmticas sanguneas) el crecimiento y la divisin
descontrolados de las clulas plasmticas malignas conducen a la produccin de grandes
cantidades de un nico tipo de inmunoglobulina monoclonal. Los anticuerpos (inmunoglobulinas)
deben ser distintos entre ellos para asegurar as el reconocimiento de bacterias, virus y otras
sustancias extraas para el organismo. Cada vez que el organismo est expuesto por ejemplo a un
virus, una clula plasmtica se divide y da lugar a un grupo o clon de clulas plasmticas con
capacidad para producir anticuerpos dirigidos a eliminar el virus. Dado que el conjunto de
inmunoglobulinas de nuestro organismo es el resultado de los anticuerpos fabricados por gran
cantidad de distintos clones, se suele hablar de patrn policlonal. Cuando existe un cncer de
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clulas plasmticas, slo se produce un tipo de anticuerpo por estas clulas cancerosas, conocido
como protena monoclonal. Esta protena anmala puede visualizarse como una banda
caracterstica en el patrn electrofortico.
ALBUMINA: Su principal funcin es la estabilizacin del volumen sanguneo y la regulacin del

intercambio de fluidos vasculares. Es responsable del 75% de la presin osmtica, transporta
pigmentos, colorantes y drogas, contribuyendo a su excrecin solubilidad y difusin a los tejidos.
Casi todas las enfermedades muestran cierto grado de depresin de albmina. Valores
marcadamente bajos indican enfermedad heptica, renal o sistmica significativa.
ALFA 1 ANTITRIPSINA: Normalmente responsable por 70% de la fraccin Alfa-1 Inhibe a la
tripsina; cuando est deprimida, los pacientes sufren enfisema pulmonar y cirrosis juvenil
ALFA 1 GLICOPROTEINA ACIDA. Normalmente es responsable por menos del 30% de la
fraccin Alfa 1pero generalmente es responsable de la elevacin de esta fraccin. Se encuentra
elevada en enfermedades inflamatorias crnicas y degenerativas y muy elevadas en varias
enfermedades malignas.
ALFA MACROGLOBULINA ( 2 M): Responsable del 25% del valor de la fraccin alfa-2 elevada
en sndrome nefrtico, gastroenteropatas con prdida de protenas, cirrosis heptica y diabetes
mellitus.
HAPTOGLOBINA: Normalmente responsable por 25% del valor de alfa -2. La anormalidad
observada ms comnmente es una elevacin de su valor. Es una protena de fase aguda, y se
eleva inespecficamente en presencia de inflamacin, necrosis o destruccin tisular. Sin embargo
por evaluacin del grado de elevacin, cambios en otras fracciones e historia clnica, se pueden
inteligentemente considerar un diagnstico diferencial. Valores bajos se observan en anemias
hemolticas.
TRANSFERRINA: Normalmente un 60% de beta-1 importante en el transporte de hierro y en la
regulacin y control de su absorcin
BETA LIPOPROTEINA: Normalmente responsable por 60% de beta -2 Transporta la mayor parte
de lpidos sricos. Debido al bajo contenido proteico (25%), marcados cambios reflejan poca
alteracin en el valor de Beta- 2
IgA: Normalmente responsable del 12% del valor de gamma. Esta fraccin puede estimarse
observando el grado de depresin entre beta-2 y gamma. Sus componentes mejor conocidos son
antitoxina, aglutininas, antibacterianas, isoaglutininas y crioaglutininas. Se observa marcadamente
elevada en cirrosis heptica y moderadamente elevada en endocarditis bacteriana sub-aguda,
tiroiditis autoinmune, linfogranuloma venreo y varias enfermedades del colgeno.
IgG: Normalmente responsable del 85% del valor de gamma. Una buena forma de estimarla es
observando la altura del pico gamma. Un poco a la derecha del centro. Contiene anticuerpos
contra bacterias, virus y toxinas. Elevacin se observa en numerosas enfermedades sub-agudas
crnicas inflamatorias y proliferativas, incluyendo neumonas, tuberculosis, cistitis, pielitis,
colecistitis, endocarditis, procesos poli artrticos, enfermedades del colgeno, triquinosis,
mononucleosis infecciosa, psitacosis, tifus, sfilis y hepatitis viral. Estas elevaciones se observan en
todas las curvas y no deben confundirse con aquellas que se muestran en una sola zona estrecha
y que representa gamopatas monoclonales.
HEMOPEXINA, C3, IgM: Muchas otras protenas afectan la apariencia de la pendiente de los
picos, algunas de ellas son hemopexina, C3 eIgM, ests lo afectarn en los sitios indicados de la
figura.
Valores normales
Protena total: 6.4 a 8.3 g/dL

Albmina: 3.5 a 5.0 g/dL
Alfa-1 globulina: 0.1 a 0.3 g/dL
Alfa-2 globulina: 0.6 a 1.0 g/dL

Beta globulina: 0.7 a 1.2 g/dL
Gammaglobulina: 0.7 a 1.6 g/dL
Nota: g/dL= gramos por decilitro
El principal uso de este test es para la deteccin de estados fisiopatolgicos tales como
inflamacin, prdida de protenas, gamapatas monoclonales, que usualmente se encuentran
asociadas con neoplasmas hematopoyticos, especialmente el mieloma mltiple y la
macroglobulinemia de Waldenstrm. Esto tambin ocurre en otras condiciones malignas y
benignas.
Cualquier protena detectada deber ser identificada por una tcnica alternativa, tales como
inmunofijacin o inmunoelectroforsis.
Otras aplicaciones de la electroforsis en suero incluyen lo siguiente:
Evaluacin de protenas sricas, estado nutricional.

Estudio de enfermedades hepticas, incluyendo cirrosis y hepatitis crnica activa.
En las enfermedades del hgado la albmina se disminuye. La alfa2 puede estar baja. Las gama
son a menudo policlonales en muchos casos de cirrosis. La depresin normal entre el rea beta y
gama puede estar ausente en la cirrosis heptica; esto es llamado puente beta-gama y son
raramente encontrados juntos, an en pacientes quienes tienen una cirrosis heptica obvia.
Las gamapatas policlonales ocurren en un amplio rango de entidades las cuales tienen en comn
una estimulacin inmunolgica crnica (ejemplo: sarcoidosis, leishmanisis visceral y otras
entidades).
Las gama globulinas pueden estar elevadas aisladas. Las fracciones incluyen Ig.G, Ig.A, Ig.M, Ig.D
e Ig.E
El aumento policlonal difuso indica un proceso inmunolgico crnico tal como aquel encontrado en
las enfermedades del hgado (cirrosis, hepatitis crnica activa), enfermedades del colgeno (lupus,
artritis reumatoidea), enfermedades infecciosas (osteomielitis, bronquiectasis, leishmaniasis
visceral, lepra), otros estados inflamatorios (sarcoidosis), neoplasmas (algunos estados de la
enfermedad de Hodgkin), y leucemia mielomonoctica crnica. Muchas pequeas bandas
(oligoclonales) son observadas en pacientes con hepatitis, enfermedades del complejo inmune,
sndrome de inmunodeficiencia adquirida y linfoadenopata angioinmunoblstica.
Gamapata Monoclonal (Proteina M) los patrones pueden ser benignos, especialmente cuando son
pequeos y aumentan, pero las gamapatas monoclonales, relatan, especialmente en el mieloma,
amiloidosis primaria, macroglobulinemia de Waldenstrm y linfomas malignos ocasionales. Estos
picos son altos, oscuros, con forma de agujas.
Tambin pequeas gamapatas pueden encontrarse en enfermedades benignas, que pueden ser
tambin detectadas tempranamente o desarrollar enfermedades linfoproliferativas malignas.
Adems, tales gamapatas son consideradas como "gamapatas monoclonales de significado
indeterminado".
Todos los pacientes con gamapata monoclonal debern tener un seguimiento con determinacin
peridica de electroforsis de protenas para diferenciar el aumento de picos M.
El aumento de protenas M requiere adems evaluacin de aspirado de medula, estudios de rayos
X, electroforesis de protenas, estudios de inmunofijacin e inmunoelectroforticos.
Gamaglobulinas bajas: Tambin las gama globulinas pueden disminuir ligeramente con el aumento
de la edad, cualquier disminucin mayor del rango normal sin explicaciones por causas obvias de
prdida de protenas (tales como enfermedad renal conocida), adems se debe determinar
inmunofijacin en orina para detectar posibles cadenas libres monoclonales (protenas de Bence
Jones).
La hipogamaglobulinemia es tambin observada en muchos pacientes con desordenes
linfoproliferativos con clulas B tales como leucemia linfoctica crnica.
Estas pueden disminuirse terapia citotxica o inmunosupresora (utilizando esteroides por tiempo
prolongado, quimioterapia antineoplsica), enfermedades linfoproliferativas malignas, mieloma
mltiple y sndrome de inmunodeficiencia variable en adultos.
Si existe historia clnica familiar o en pacientes, de susceptibilidad a infeccin, la determinacin de
cuantitativa de Ig.G, Ig.A e Ig.M por inmunodifusin o por nefelometra pueden ser de gran ayuda.
Especial cuidado en los linfocitos en sangre perifrica, presencia o ausencia de
hepatoesplenomegalia y pacientes mayores de 40 aos, presencia o ausencia de cadenas livianas
en orina por inmunoelectroforsis o inmunofijacin pueden ser relevantes (enfermedad de cadenas
ligeras).
Alfa 2 aumentada: Incluye fracciones reactivas-inflamatorias y pueden estar aumentadas en
neoplasmas (carcinomas de clulas renales), infecciones agudas, fiebre reumtica, artritis,
sndromes nefrticos y otros estados inflamatorios. La macroglobulina alfa2 est aumentada en el
embarazo y con la diabetes mellitus. Nios sanos tienen niveles ms altos que los del adulto.
Alfa2 disminuida: Una de las fracciones ms importantes es la Haptoglobina y su depresin puede
indicar hemlisis. Adems pueden estar disminuidas cuando hay dao hepatocelular. Traumas y
transfusiones pueden causar tambin su disminucin.
Alfa 1 globulinas: estn aumentadas en enfermedades inflamatorias activas o neoplasias.
Alfa 1 bajas o: la alfa-1 antitripsina es responsable en un 90% de la actividad de la serina

antiproteasa en el suero.
Esta deficiencia es debida a una anormalidad gentica la cual deber ser investigada, porque
causa enfisema y cirrosis. Si el paciente tiene enfisema, con historia familiar de enfisema, o
enfermedad heptica desconocida, los ensayos de alfa-1 antitripsina y fenotipo son recomendados.
Albumina: es mejor determinarla por electroforesis que por mtodos qumicos. La electroforesis
permite diagnosticar entidades raras tales como analbuminemia y bisalbuminemia. La albmina
est aumentada en pacientes deshidratados y est disminuida en una amplia variedad de
enfermedades subagudas, subcrnicas y crnicas hepticas, renales y gastrointestinales, adems
en pacientes con desnutricin.
Albumina: es mejor determinarla por electroforesis que por mtodos qumicos. La electroforesis
permite diagnosticar entidades raras tales como analbuminemia y bisalbuminemia. La albmina
est aumentada en pacientes deshidratados y est disminuida en una amplia variedad de
enfermedades subagudas, subcrnicas y crnicas hepticas, renales y gastrointestinales, adems
en pacientes con desnutricin.
Disminucin total de las protenas con patrn normal esencial: puede indicar deficiencia en la dieta
o hemodilucin. *Protenas totales significativamente elevadas con patrn normal esencial: puede
ser debido a una deshidratacin secundaria.
Protenas totales y albmina significativamente baja, alfa2 aumentadas y gama disminuidas: es el
prototipo tpico de sndrome nefrtico.
Limitaciones:
La electroforesis de protenas en suero detecta algunas pero no todas las enfermedades del
hgado. La electroforesis de protenas y la inmunoelectroforsis o la inmunofijacin en orina o en
suero son utilizadas en estudios de pacientes con mieloma o macroglobulinemia de Waldenstrm.
Los estudios en orina pueden ser tiles an si la electroforesis de protenas en suero no es
notable.
Hay varias formas de interpretar adecuadamente los resultados de una electroforesis. Una de ellas
es por simple comparacin de los resultados del paciente con aquellas de patrones patolgicos
que muestren los cambios caractersticos de las 5 protenas sricas bsicas en enfermedades
especficas. Este mtodo ofrece gran ayuda al mdico, pero una mejor comprensin de las
protenas que forman cada fraccin as como su funcin fisiolgica aumenta mucho la utilidad de la
electroforesis.
Se ha establecido que cada una de las 5 fracciones esta compuesta de 1-3 protenas especficas.
Cmo un ejemplo, Alfa-2 est compuesta de 2 M y haptoglobina. Aumento o disminucin de la
pendiente delantera (+) de ella refleja variaciones en contenido de 2 M mientras que cuando se
altera el centro o la parte posterior (-) de esta curva, refleja variaciones en haptoglobina.
El grfico muestra la localizacin de algunas protenas, alteraciones de forma en estas zonas se
relacionan con cada una de ellas.
Para evaluar los resultados apropiadamente usted debe familiarizarse con estos patrones y
considerar el contenido en gm % que la grfica representa.
Resumen del Significado de los resultados

anormales
La disminucin de la protena total puede indicar:
Desnutricin
Sndrome nefrtico
Enteropata por prdida de protenas gastrointestinal
El aumento de las protenas alpha-1 globulina puede indicar:
Enfermedad inflamatoria crnica (por ejemplo artritis reumatoidea, LES)

Enfermedad inflamatoria aguda
Malignidad
La disminucin de las protenas alfa-1 globulinas puede indicar:
Deficiencia de alfa-1 antitripsina

El aumento de las protenas alfa-2 globulinas puede indicar:
Inflamacin aguda
Inflamacin crnica
La disminucin de las protenas alfa-2 globulinas puede indicar:
Hemlisis
El aumento de las protenas beta globulinas puede indicar:
Hiperlipoproteinemia (por ejemplo, hipercolesterolemia familiar)

Terapia de estrgenos
La disminucin de las protenas beta globulinas puede indicar:
Trastorno de coagulacin congnito

Coagulopata de consumo
Coagulacin intravascular diseminada
El aumento de las protenas gama globulinas puede indicar:
Mieloma mltiple
Enfermedad inflamatoria crnica (por ejemplo artritis reumatoidea, LES)
Hiperinmunizacin
Infeccin aguda
Macroglobulinemia de Waldenstrom
Enfermedad heptica crnica
PTAlb 1 2
PTAlb 1 2
-
+ +
- -
- -
- Linfoma y leucemia linfoctica
- Asma y otras alergias+ con

respuesta
pobre a terapias
Carcinomatsis
++Macroglobulinemia
+ -
+Mieloma
+Crioglobulinemia
+Mixedema
+ + Diabetes mellitas
- -
- Nefrosis (mxima elevacin de 2)
Fiebre reumtica
+Artritis reumatoidea
Glomerolunefritis
+Cirrosis
heptica
(puente entre )
- -
+Infeccin crnica
- -
Infeccin aguda
++Hepatitis Viral
+ -
+Miastenia
+ ++Sarcoidis
+Enfermedad de Hodgkin
- Hipogamaglobulina
+Leucemia mielocitica
+Lupus Eritrematoso
+ = Aumento
- = Descenso

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ELECTROFORESIS DE PROTEINAS

ALBUMINA: Su principal funcin es la estabilizacin del volumen sanguneo y la regulacin del

Protena total: 6.4 a 8.3 g/dL

Alfa-2 globulina: 0.6 a 1.0 g/dL

Evaluacin de protenas sricas, estado nutricional.

Alfa 1 bajas o: la alfa-1 antitripsina es responsable en un 90% de la actividad de la serina

Resumen del Significado de los resultados

Enfermedad inflamatoria crnica (por ejemplo artritis reumatoidea, LES)

Deficiencia de alfa-1 antitripsina

Hiperlipoproteinemia (por ejemplo, hipercolesterolemia familiar)

Trastorno de coagulacin congnito

- Linfoma y leucemia linfoctica

- Asma y otras alergias+ con

- Nefrosis (mxima elevacin de 2)

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