Ud6. Detección de autoanticuerpos.

Inmunología.
UD 6. Detección de autoanticuerpos.

INMUNOPATOLOGÍAS
La inmunovigilancia llevada a cabo por el sistema inmunitario implica:
● Protección contra agentes externos.
● Protección contra agentes propios cuando estos son alterados por el envejecimiento o
trasformados por procesos neoplásicos.

Implica la existencia de un sistema de control y regulación que permita discriminar y aceptar a lo

“propio y sano” y al mismo tiempo reconocer y atacar a lo “extraño”: Es lo que se conoce como
tolerancia inmunológica.

Cuando la tolerancia falla nos encontramos frente a la aparición de enfermedades inmunológicas que
se pueden clasificar en dos grandes grupos:
● Reacciones por hipersensibilidad a agentes externos, en donde el SI reconoce como
potencialmente dañino a un elemento no necesariamente peligroso para el organismo: base de
la patogenia de las enfermedades alérgicas.
● Reacciones de hipersensibilidad contra el propio organismo situación que da origen a las
llamadas enfermedades por autoinmunidad. Estas últimas pueden ser órgano específicas o
sistémicas dependiendo del tipo y ubicación del antigéno involucrado.

Una enfermedad autoinmune es aquella en la que el sistema inmunitario ataca estructuras del propio
organismo al identificarlas como extrañas.
Estos antígenos “Propios” pasan a ser inmunógenos.

La autoinmunidad se caracteriza por el desarrollo de respuestas inmunológicas anormales frente a uno

o varios autoantígenos, con la producción de anticuerpos o de linfocitos T autorreactivos.

La enfermedad autoinmune se produce cuando existe lesión tisular y alteración funcional de la

homeostasis fisiológica, debido a respuestas autoinmunes persistentes.

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FACTORES QUE INFLUYEN EN LAS ENFERMEDADES AUTOINMUNES
1.- Factor edad.
Los niveles de autoanticuerpos son más elevados en las edades avanzadas de la vida, aunque no tienen
por que ir acompañadas de enfermedad autoinmune.
2.- Factor sexo.
Las enfermedades autoinmunes se desarrollan más en mujeres que en hombres. Así, por ejemplo, el
lupus eritematoso sistémico afecta entre 10 y 20 veces más a las mujeres que a los hombres.
3- Factores hormonales.
Existe una relación entre el nivel de estrógenos y la presencia e intensidad de procesos autoinmunes.
4.- Factores genéticos.
Los antígenos del complejo mayor de histocompatibilidad (HLA).
El complejo mayor de histocompatibilidad, es un grupo de genes cuyos productos (las proteínas que
codifican) están implicados en la presentación de antígenos a los linfocitos T y en la diferenciación de
lo propio y lo ajeno en el sistema inmunitario.
Existe una asociación clara entre la presencia de ciertos antígenos HLA y el riesgo relativo (RR) de
padecer procesos autoinmunes.

● El riesgo relativo (RR) se puede calcular dividiendo la proporción del número de pacientes
con y sin antígeno entre la proporción de ese antígeno
en controles normales.
○ El RR se refiere a la probabilidad de que una
persona manifieste una enfermedad particular
si está presente un antígeno HLA específico:
○ Cuanto mayor es el RR más significativa es la asociación. Desde un punto de vista
diagnóstico mientras más alto es el RR, más útil puede ser el
tipaje HLA para establecer el diagnóstico.

● Asociación HLA: Enfermedad y riesgo relativo aproximado.

○ La asociación más fuerte se encuentra en la espondilitis
anquilosante; personas portadoras del alelo B27 presentan 90-
100% más riesgo de padecer la enfermedad que los que carecen
del antígeno.
○ El antígeno DR3 es un marcador frecuentemente asociado a
enfermedades autoinmunes.

5.- Factores ambientales.

● Medicamentos (ejemplo procainamida o fármacos betabloqueantes). Ej:
LIF (lupus inducido por fármacos), la más conocida.
● Agentes infecciosos:
○ Algunas infecciones son capaces de alterar profundamente el
sistema inmunitario mediante unas sustancias denominadas superantígenos, que
provocan la estimulación de muchos clones reprimidos.
○ Por lesión tisular prolongada en el tiempo.
○ Por reactividad cruzada de antígenos infecciosos con antígenos propios (mimetismo
molecular).
○ Ej: Fiebre reumática (anticuerpos dirigidos frente al strectococo β-hemolítico
reaccionan contra estructuras corporales produciendo carditis, artritis y corea).

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● Otros factores ambientales:
○ Exposicion a disolventes orgánicos.
○ Exposición a metales.
○ Radiación UV.

6.- Alteraciones intrínsecas del sistema inmunológico.

En diversas enfermedades autoinmunes se ha demostrado un defecto de la
función supresora de las células T reguladoras de la inmunidad, así como
defectos intrínsecos de la activación de los linfocitos T y B.
● Fallo en el mecanismo de apoptosis: Muerte programada de una
célula, sin que tenga que ver un proceso inflamatorio (necrosis).
Proceso complejo en el que participan los fagocitos.
○ Cu ando el mecanismo de apoptosis es demasiado lento y no
funciona bien, las vesículas apoptóticas, con restos celulares
son “visibles” a nuestro sistema inmunitario:
○ A éste le da tiempo para descubrir el material nuclear
degradado existente en las vesículas y crear una respuesta
autoinmune cruzada que actúa también contra el material
nuclear normal.

7.- Características especiales de ciertas moléculas.

● Ciertas moléculas (mielina, espermatozoides) no existen cuando se produce el proceso de
tolerancia inmunológica. Cualquier circunstancia que permita que estas sustancias se pongan
en contacto con el aparato inmunológico propiciará el desarrollo de la enfermedad
autoinmune.
● Existen normalmente barreras entre el aparato inmunológico y algunos antígenos; no siendo
posible el reconocimiento aún cuando el antígeno aparezca durante la vida fetal. La ruptura de
esas barreras conduciría entonces a la autoinmunidad (Ej: Tiroglobulina..)

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CARACTERÍSTICAS DE LAS ENFERMEDADES AUTOINMUNES.
Las enfermedades autoinmunes presentan varias características comunes que las definen y que son
manifestaciones de los mecanismos inmunológicos que las están provocando.

1. En primer lugar, las enfermedades autoinmunes son específicas.

● En cada enfermedad autoinmune el fracaso de la tolerancia se produce contra determinado/s
antígeno/s característico/s.
● La distribución órgano específica o ubicua de los autoantígenos determina la extensión órgano
específica o sistémica de la enfermedad.

2. Las enfermedades autoinmunes son crónicas. Esto es debido a la persistencia

en el tiempo de:
● El antígeno.
● Las células T y B de memoria específicas frente a esos antígenos.
● Los mecanismos de amplificación inflamatorios que son realmente los mecanismos causantes
de la patología.
Además, el curso de las patologías autoinmunes presenta recidivas:
Períodos en los que la intensidad de los procesos que causan daño tisular disminuye y otros en los que
aumenta. Esta evolución recidivante con brotes de actividad, ocurre incluso en ausencia de
tratamiento:
Demuestra que existen mecanismos fisiológicos que intenta regular la actividad de estos procesos
autoinmunes.

3. En tercer lugar, las enfermedades autoinmunes suelen ser progresivas.

● Esto se debe a que una respuesta iniciada contra un antígeno propio que daña los tejidos
puede dar lugar a la liberación y alteración de otros antígenos tisulares, a la activación de
linfocitos específicos frente a esos otros antígenos y a la exacerbación de la enfermedad.
● Este fenómeno se llama propagación del epítopo y explica por qué una vez que se ha
desarrollado una enfermedad autoinmune puede prolongarse y perpetuarse.

MECANISMOS DE LESIÓN DE ENFERMEDADES AUTOINMUNES.

Parece ser que la sola presencia de autoanticuerpos no es suficiente para explicar las lesiones
autoinmunes. Los mecanismos patogénicos responsables de la lesión serán distintos en las diferentes
enfermedades autoinmunes:
● Mecanismos mediados por los linfocitos T autorreactivos.
● Presencia de inmunocomplejos.
● Presencia de linfocitos B.
● Mecanismos de amplificación inflamatorios del sistema inmune innato. Las características
clínicas de la enfermedad y el daño dependen de estos mecanismos patogénicos que pueden
ser incluso distintos en la misma enfermedad autoinmune.

ASOCIACIÓN ANTICUERPOS Y PATOLOGÍA.

Para asociar una patología a la presencia de unos determinados autoanticuerpos patogénicos han de
cumplirse una serie de condiciones:
a. Los niveles de autoAc y la actividad de la enfermedad deben correlacionarse.
b. La eliminación de autoAc mejora la enfermedad.
c. En el tejido dañado deben detectarse AutoAc junto a un posible Ag.

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d. En sistemas experimentales “in vitro” esos autoAc o inmunocomplejos deben causar lesiones
similares.
e. Se deben producir lesiones análogas si se inmuniza una animal de experimentación con
anticuerpos o inmunocomplejos similares.

CLASIFICACIÓN ENFERMEDADES AUTOINMUNITARIAS.

1. Órganoespecíficas:
La respuesta patológica se centra en células de un determinado órgano: Se generan anticuerpos frente
a estructuras celulares o frente a un producto de secreción celular (ej:hormonas).
Ej: Diabetes insulinodependiente, Ac frente a los islotes de Langerhans.

2. Sistémicas (no específica de órgano):

Los autoAc se dirigen frente a estructuras o componentes comunes a muchos tejidos distribuidos por
nuestro organismo: Componentes nucleares, proteínas mitocondriales, componentes del músculo.

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A. ENFERMEDADES AUTOINMUNES ORGANOESPECÍFICAS. La respuesta patológica

se centra en células determinadas de un órgano.
● Tiroiditis de Hashimoto. Enfermedad de Graves.
● Diabetes mellitus insulinodependiente (DMID).
● Enfermedad de Addison.
● Cirrosis biliar primaria. Hepatitis autoinmune.
● Enfermedad celíaca.
● Fiebres reumáticas.
● Vitíligo
● Esclerosis múltiple.
● Enfermedad inflamatoria intestinal. Gastritis atrófica.

➢ Tiroiditis de Hashimoto. Reacción patológica contra la glándula tiroides. Provoca

inflamación (bocio) con pérdida de función. Mayor frecuencia en mujeres de mediana edad.
Detección mediante niveles anormales de TSH, y presencia de anticuerpos antiperoxidasa
(anti-TPO) y anti tiroglobulina (anti-TG).
➢ Enfermedad de Graves. Trastorno autoinmunitario que puede causar hipertiroidismo, o
tiroides hiperreactiva: Se producen más hormonas tiroideas de las que el cuerpo necesita.
Como resultado, se aceleran muchas de las funciones del organismo. Se presentan niveles
altos de la inmunoglobulina estimulante del tiroides (TSI).
➢ Diabetes mellitus insulinodependiente (DMID). Enfermedad autoinmune en la que las
células B de los islotes de Langerhans del páncreas son destruidas selectivamente y dejan de
sintetizar insulina.

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○ Se miden autoAc frete al citoplasma y membrana basal de las células del islote y
también anticuerpos antiinsulina.
➢ Enfermedad de Addison. Insuficiencia de la corteza suprarrenal. Gran gravedad, puede ser
mortal. Se detectan autoAc contra las células corticales suprarrenales.
➢ Cirrosis biliar primaria. Hepatopatía crónica: Destrucción lenta y progresiva de los
conductos biliares intrahepáticos. Más frecuente en mujeres. Aparecen niveles altos de
anticuerpos antimitocondriales (AMA).
➢ Hepatitis autoinmune. Enfermedad poco frecuente. Evoluciona a insuficiencia hepática,
cirrosis y muerte. Se presenta como hepatitis aguda, a veces fulminante. Pueden aparecer
diferentes anticuerpos (músculo liso, antinucleares, antimicrosomales de hígado...).
➢ Enfermedad celíaca. Alteración del intestino delgado: Da lugar a malabsorción, atrofia de las
vellosidades intestinales. Proceso inmunológico inducido por presencia de gluten. Asociado a
haplotipos HLA. Se miden anticuerpos antitransglutaminasa, antigliadina y antiendomisio.
➢ Fiebres reumáticas. Tras una infección faríngea estreptocócica se liberan componentes del
germen parecidos a los tejidos humanos, iniciándose el proceso autoinmune con afectación de
corazón, sistema nervioso y articulaciones.
○ Presenta niveles elevados de antiestreptolisina (ASLO).
➢ Vitíligo. Despigmentación de la piel por destrucción de melanocitos. Aparecen manchas
blancas en la piel. Puede resolverse espontáneamente. Se pueden detectar anticuerpos
anti-tirosinasa (interviene en síntesis de melanina).
➢ Esclerosis múltiple. La hipótesis más aceptada postula que es el resultado de una
determinada predisposición genética y de un factor ambiental no conocido que provocarían
que células T autorreactivas que, tras un periodo de latencia –10 a 20 años según algunos
autores– serían activadas por un factor sistémico o local.
○ Esto originaría una reacción autoinmune que desencadenaría un proceso inflamatorio
y desmielinización. No está clara la naturaleza de este factor aunque se considera que
estarían implicadas enfermedades virales y autoinmunes.
○ Se miden niveles de IgG en LCR (aparecerá elevada). También se pueden detectar
bandas oligoclonales de Ig en L.
➢ Gastritis atrófica. Trastorno que destruye las células parietales del cuerpo del estómago por
medio de los linfocitos T, y reduce significativamente la producción de ácido clorhídrico,
pepsinógeno I y factor intrínseco por parte de las células parietales.
○ Se detectan anticuerpos contra células parietales y/o factor intrínseco.
○ Al no funcionar el factor intrínseco (o no haberlo) se produce anemia perniciosa por
déficit de vitamina B12.
➢ Enfermedad inflamatoria intestinal. Inflamación recurrente de segmentos intestinales. Se
clasifica en colitis ulcerosa (afecta al colon) y enfermedad de Crohn (región íleocecal).
Todavía no se sabe si es una enfermedad autoinmunitaria, inmunodeficiencia o infección
frente a agente no identificado.
○ En la colitis ulcerosa se detectan anticuerpos anti citoplasma de neutrófilos (ANCA).

B. ENFERMEDADES AUTOINMUNES SISTÉMICAS. Enfermedades del tejido conectivo.

Son de naturaleza inflamatoria y autoinmune, tienden a la cronicidad, y al compromiso de muchos
parénquimas, órganos y tejidos, dejando en ellos daño estructural y funcional variable.
Debido a esto, amenazan la vida, o disminuyen la expectativa y calidad de vida. El diagnóstico y
tratamiento precoz de estas entidades, permite cambiar su curso y muchas veces lograr remisión. Las
más frecuentes:

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Artritis Reumatoidea (AR), Lupus Eritematoso Sistémico (LES), Síndrome de Sjögren (SS),
Espondilitis anquilosante, esclerosis sistémica, polimiositis, dermatomiositis.

➢ Lupus erimatoso sistémico. Enfermedad inflamatoria crónica de naturaleza autoinmune y de

etiología desconocida, caracterizada por afectación de múltiples órganos y sistemas y por la
presencia de anticuerpos antinucleares (ANA) positivos, en concreto el dsDNA (pueden
aparecer otros).
○ También anticoagulantes lúpicos y anticardiolipinas.
➢ Enfermedad mixta del tejido conectivo. Enfermedad inflamatoria compleja y diversa que
presenta sintomatología variable y común a diferentes enfermedades del tejido conectivo.

AUTOANTICUERPOS MÁS COMUNES.

1.- Factor reumatoide o reumatoideo (FR):
Se encuentra 70% de las artritis reumatoides y otras enfermedades del tejido conectivo. Su presencia
no es diagnóstico,ni su ausencia descarta enfermedad.

2.-Anticuerpos antipéptido cíclico citrulinado (anti CCP). Diagnóstico de artritis reumatoide.

3.- Anticuerpos antifosfolípidos (AAF).

Aparecen en el Síndrome antifosfolipídico (SAF):(mayor riesgo de padecer fenómenos trombóticos
arteriales y venosos). Hay de dos tipos:
● Anticuerpos anticardiolipinas (AAC): Las cardiolipinas se encuentran, entre otros lugares
celulares, en la membrana de las plaquetas.
● Anticuerpo lúpico (AL). Interfiere con las reacciones de coagulación
fosfolípido-dependientes, tiempo de tromboplastina parcial activada (TTPA), el cual valora la
vía intrínseca y también la común.

4.- Anticuerpos anticitoplasma del neutrofilo (ANCA).

Diagnóstico de diversas vasculitis.
Se detectan por inmunofluorescencia, existiendo dos patrones, el citoplasmático y el perinuclear.

5.- Anticuerpos contra orgánulos citoplasmáticas:

Anticuerpos antimitocondriales (AMA) específicos de la cirrosis biliar primaria (CBP)(95%).
Se detectan por IF

6.- ANTICUERPOS ANTINUCLEARES (ANA), contra

autoantígenos del núcleo.
También reconocen proteínas de citoplasma.
I. Anticuerpos anti-DNA: antiDNAds o nativo (específicos
LES), antiDNAss (monocatenario).
II. Anticuerpos anticentrómero (frecuentes en
esclerodermias).
III. Anticuerpos antihistonas; específicos LIF (lupus
inducido por fármacos).
IV. Anticuerpos frente a proteínas extraíbles del núcleo (anti ENA).
7.- Anticuerpos anti músculo liso AML o SMA (smooth muscle antibodies).
Principales marcadores de la Hepatitis autoinmune tipo I.

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8.- Anticuerpos antimicrosomales frente a hígado/riñón (anti-LKM).
Marcadores de la Hepatitis autoinmune tipo I. Son mucho menos frecuentes y se han descrito
principalmente en niños.

DETERMINACIÓN DE AUTOANTICUERPOS.
➢ Inmunoanálisis enzimático (ELISA) o quimioluminiscente (CLIA).
➢ Inmunoensayo lineal.
➢ Inmunofluorescencia indirecta (IFI)
➢ Aglutinación.

● INMUNO ANÁLISIS ENZIMÁTICO (ELISA): Se ha utilizado como prueba de cribado

para seleccionar aquellos sueros positivos que después se procesan mediante
Inmunofluorescencia Indirecta (IFI). En la actualidad y, dependiendo de la sensibilidad del
ELISA, puede llegar a ser prueba confirmatoria.
○ Método rápido, sencillo y sensible que permite detectar autoanticuerpos específicos
frente a distintos antígenos de manera objetiva y automatizada.
○ Otra diferencia importante es que en el ELISA el antígeno está identificado
perfectamente.

● INMUNOANÁLISIS POR QUIMIOLUMINISCENCIA (CLIA). Para la determinación de

ANA con CLIA:
○ Los ANA presentes en la muestra reaccionan con la fase sólida que presenta los
antígenos adecuados. El conjugado está formado por anticuerpos monoclonales de
ratón anti-IgG humanos unidos a un derivado del isoluminol.
○ Se produce una reacción de quimioluminiscencia, la cual genera una señal luminosa
que es medida en un fotomultiplicador en unidades relativas de luz (RLU), que
indican la concentración de ANA en muestras de suero.

● INMUNOENSAYO LINEAL (LIA):

Modificación del western blot, sin separación
antigénica previa.

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○ Tiras de nitrocelulosa, con un amplio perfil de antígenos nucleares y citosólicos
fijados formando líneas. Sirven para la detección cualitativa de autoanticuerpos tipo
IgG.
○ Durante el ensayo, se incuba la tira con el suero. Si hay autoanticuerpos en el suero,
se unirán y se visualizarán a través de anticuerpos secundarios específicos conjugados
con cromógeno.
○ Permiten detectar hasta 18 autoanticuerpos a la vez.

● LA INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA (IFI):

○ Técnica de fácil manejo y estandarización. La lectura e interpretación requieren de
amplia experiencia. La técnica se basa en que los anticuerpos que reconocen
estructuras antigénicas celulares nativas.
○ El anticuerpo o suero problema se aplica sobre el antígeno, se lava y luego se añade
un anti-anticuerpo fluoresceinado contra el anticuerpo presente. Este anticuerpo se ha
producido en conejo, cabra o cobaya, dirigido contra las fracciones constantes (Fc) de
las inmunoglobulinas IgG, IgA y/o IgM. Este anticuerpo antiinmunoglobulina
humano está conjugado a un fluoróforo (generalmente isotiocianato de fluoresceína,
FITC).
○ Finalmente se lava y se leen los resultados mediante observación en un microscopio
de fluorescencia.

● SUSTRATOS PARA REALIZACIÓN DE IFI:

○ La IFI se realiza sobre un portaobjetos donde está fijado un antígeno concreto (suelen
ser células o una fina capa de tejido específico).
○ Para detectar autoanticuerpos organoespecíficos: Cortes de tejidos específicos
(tiroides, esófago, estómago, glándulas suprarrenales...)
○ Para detectar autoanticuerpos NO organoespecíficos:
■ ANA: líneas celulares epiteliales humanas HEp-2.
■ Anticuerpos anti DNA nativo y anti dsDNA: Crithidia luciliae.
■ ANCAS: Neutrófilos fijados con etanol y formalina.
■ SMA, AMA, LKM: Triple tejido (hígado, riñón, estómago de rata).

● INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA PARA DETECCIÓN DE ANAs (anticuerpos

antinucleares).
○ Se utilizan células ricas en material nuclear: es frecuente el uso de células humanas
cultivadas (línea HEp-2), carcinoma escamoso esofágico. Tiene la ventaja de que son
células con un núcleo más grande y una mayor concentración de antígenos nucleares.
○ Las células HEp2 se utilizan como sustrato “Gold standard” para screening de ANA.
○ Dependiendo del valor que haya dado el suero en el ELISA, se hacen diluciones
seriadas (o no) del suero y se colocan las diluciones en diferentes pocillos.

○ Resultado: El título será la mayor dilución que presente fluorescencia.

○ Interpretación:
■ Negativos: Se considera que un suero es negativo para la presencia de ANA
si la tinción es igual o inferior a la del pocillo de control negativo, sin patrón
claramente discernible.

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■ Positivos: Se considera que un suero es positivo si el núcleo/citoplasma
muestra un patrón de tinción claramente visible en una mayoría de las células
que se encuentran en la interfase.
○ Para valorar los ANA hay que informar el título:
■ (-) <1/40: negativo.
■ (+) 1/40 - 1/80: positivo bajo.
■ (++) 1/160 - 1/320: positivo medio.
■ (+++) ≥1:640: elevado.
○ Sin embargo, para una mejor valoración se ha de considerar la edad y sexo del
paciente, además de las manifestaciones clínicas.
○ La prevalencia de ANA en la población general aumenta con la edad. Se sabe que el
18% de las personas mayores de 60 años puede presentar valores bajos sin que ello
tenga ninguna significación clínica. Además, los ANAs no son específicos de
enfermedad autoinmune sistémica:
■ Infecciones.
■ Linfomas.
○ Los resultados de los anticuerpos antinucleares tienen valor diagnóstico pero no
pronóstico nisirven de seguimiento en el tratamiento de la enfermedad.
○ Los títulos de los ANA no se correlacionan con la severidad de la enfermedad. Los
títulos medios y altos (≥1/160) sólo se correlacionan con formas sistémicas. Los ANA
no se negativizan ni fluctúan con el curso de la enfermedad.

● PATRONES DE INMUNOFLUORESCENCIA ASOCIADOS A ANAs.

○ Sugieren el tipo de anticuerpo presente en el suero.
○ Se conocen varios tipos de patrones. Existen 5 patrones básicos, 4 de ellos no son
específicos de patología; un 5o patrón sí que es específico.

○ El 5o patrón de IFI positivo sobre células HEp2 es el patrón centromérico:

○ Se visualiza un patrón de 40 a 60 puntos por núcleo. Además si la célula está
en mitosis se encuentran agregados en dos grupos (flecha).
○ Fuertemente asociado a esclerodermias.

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● INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA PARA DETECCIÓN DE anti

ADN. Anticuerpos dirigidos contra la molécula de ácido desoxirribonucleico (ADN).
Pueden dividirse en dos categorías:
○ Los que reaccionan con el ADN desnaturalizado (ssDNA): Se dirigen contra
nucleósidos y nucleótidos que quedan expuestos al separarse las dos cadenas
de ADN. Poco específicos.
○ Los que reaccionan con el ADN nativo de doble cadena (dsDNA), dirigidos
contra la estructura natural en doble hélice. Asociados a lupus.
○ Muy útiles en el seguimiento de los pacientes con LES ya que permite el
monitoreo de la respuesta de los pacientes a la terapia.
○ Para su detección se utiliza como sustrato un organismo flagelado, Crithidia
luciliae, que posee una mitocondria gigante modificada, el kinetoplasto, que
contiene ADN de doble cadena en una configuración circular.
○ Un resultado serológico positivo se manifiesta por una tinción fluorescente
anular del kinetoplasto.

● INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA PARA DETECCIÓN DE ENAs.

Son anticuerpos dirigidos contra proteínas nucleares no histonas que pueden extraerse
del núcleo con soluciones salinas de baja fuerza iónica; dentro de ellos están los
dirigidos contra proteínas asociadas al ADN (anti láminas nucleares, anti-scl- 70) y
proteínas asociadas al ARN (anti-Sm, anti-Rnp, anti-Ro/Sa, anti-La/Sb y anti-Jo1).
sólo tienen valor diagnóstico, no varían con la actividad de la enfermedad.
○ Se miden mediante Western blot ELISA o LIA.

● INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA PARA DETECCIÓN DE ANCAs

(anticuerpos anticitoplasma de neutrófilos). Se intenta detectar Autoanticuerpos, de
tipo IgG o IgM, dirigidos contra determinantes antigénicos presentes en los gránulos
primarios de los neutrófilos.
○ Técnica por IFI: El sustrato son neutrófilos fijados con etanol y formalina.
Dos patrones: citoplasmático y periférico.

● DETECCIÓN DE AUTOANTICUERPOS POR

AGLUTINACIÓN.
○ La determinación de factor reumatoide, en suero
humano ha sido la prueba serológica más utilizada
para confirmar el diagnóstico de artritis reumatoide.
○ El FR es un autoanticuerpo IgM que reconoce la
IgG. Al ser una IgM tiene un alto poder aglutinante,
y por ello se sigue detectando el FR mediante
aglutinación.
○ Técnica: Se usan hematíes o esferas de látex
sensibilizadas con IgG, que es el antígeno que
reconoce el factor reumatoide.

OTRAS MEDIDAS ANALÍTCAS EN EL DIAGNÓSTICO DE PATOLOGÍAS

AUTOINMUNITARIAS.

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● DETECCIÓN DE AUTOANTICUERPOS POR AGLUTINACIÓN. Además de
la determinación del autoanticuerpo es importante para diagnóstico de la enfermedad
autoinmune la determinación de :
○ I. VSG: Reactante de fase aguda.
○ II. Proteina C reactiva (PCR o CRP): Reactante de fase aguda.
○ III. LDH: Marcador de daño tisular.
○ IV. Fracciones de complemento (C3 y C4): (se ve activado por presencia de
inmunocomplejos.
○ V. Inmunoglobulinas (Búsqueda de Hiperglobulinemia policlonal).
○ VI. Presencia de crioaglutininas (autoanticuerpo activo por debajo de los
30oC, que aglutina a los hematíes).

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