UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES U.D.C.A.

TALLER No. 2
ANÁLISIS INSTRUMENTAL
TALLER EJERCICIOS LEY DE BEER ESPECTROFOTOMETRÍA GENERALIDADES

1. Un vidrio transparente absorbe las radiaciones entre 500 y 520nm de qué color se ve al iluminarse con luz blanca

2. De qué color es:

a) La solución que transmite fuertemente 420nm

b) El filtro para analizar la absorción de la solución anterior
c) La solución que absorbe fuertemente las radiaciones entre 4700 y 4800 amgstron

3. Convertir en absorbancia las siguientes transmitancías 0,42%; 50,0% ; 36,8% ; 0,80% ; 10,0%

4. Convertir en transmitancías las siguientes absorbancias: 0,434; 0,760; 0,100 ; 0,400 ; 0,000

5. Una solución presenta una absorbancia de 0,520, qué dilución hay que hacerle a esta solución para que la absorbancia sea 0,130 en la
misma celda

6. Qué dilución hay que hacerle a una solución que presenta una transmitancia de 10,0% para que su transmitancía cambie a 79,4%

7. Determine el rango de concentraciones de una sustancia M con absortividad molar 3500M-1cm-1, para que las absorbancias estén entre
0,100 y 1,000 al leerlas en una celda de 1,0cm

8. Una solución de un colorante 0,5mM, presenta una transmitancía de 40% en una celda de 1,0cm. Qué diluciones hay que hacer de un
patrón 2,0mM para obtener absorbancias de 0,100 y 0,900 en la misma celda y a la misma longitud de onda

9. Una solución de KMnO4 a 7,5x10-3 moles/L tiene una absorbancia de 0,658 cuando se mide en una celda de 1,5cm a 525nm.

a) Calcule la absortividad molar de KMnO4.

b) Calcule la absortividad en esta longitud de onda, cuando la concentración se expresa en ppm de KMnO 4.
c) Calcule el % de transmitancía de la solución anterior en 525nm, si la medición se ha hecho en una celda de 1cm

10. Una muestra particular coloreada que se sabe que sigue la ley de Beer, muestra un 80% transmitancía cuando se mide en una celda de
1cm de longitud

a) Calcule el porcentaje de transmitancía para un solución de doble concentración, usando la misma celda
b) Cuál debe ser la longitud de la celda, para obtener la misma transmitancía (80%) para una solución que tenga el doble de
concentración original
c) Calcule el % de transmitancía de la solución original cuando ésta esté contenida en una celda de 0,5cm de longitud
d) Si la concentración original fue de 0,5 mg/L. Cuál es el factor de absortividad a

11. El contenido de hierro en una muestra de agua de pozo, fue determinado, tratando una muestra de 25,0mL con HNO 3 y un exceso de
KSCN. Esta solución se diluyó a 50mL donde se midió su absorbancia. Se trató en forma idéntica una porción de 5mL de una solución de
Fe+3 de concentración de 7,3x10-4 mg/L. Se observó igual absorbancia en las dos soluciones, cuando la trayectoria de luz a través del
estandar fue 1,98cm y para la muestra fue 2,62cm.
Calcule cuántos mg/L de Fe+3 tiene la muestra de agua

12. Se desea analizar el contenido de Cr en una roca se muele la muestra, se tamiza y se pesan 0,5g para el análisis. A través de un
tratamiento adecuado, el material se descompone; el Cr se convierte en Na2CrO4. La solución fildtrada se adiciona 2mL de difenil
carbazida al 0,25% (reactivo que da coloración rojo violeta con el cromo VI) y se afora a 50mL con H 2SO4 0,2N.
Adicionalmente se dispone de una solución que contiene 15mg de K2Cr2O7 por litro. Un alícuota de 5mL de la solución de referencia se
trata con 2mL de la solución de difenil carbazida y se diluye a 50mL con H 2SO4 0,2N.
Las absorbancias de las dos soluciones finales se determinan en el espectrofotómetro

Astd= 0,354 Aproblema=0,272

Calcular el Cr, expresado como % de Cr2O3 en la roca.

13. Se puede hacer en el acero la determinación simultánea de Ti y V, cad uno en un complejo de peróxido.
Se disolvieron muestras de 1,000g de acero, se desarrollo el color y se diluyó exactamente a 50mL, obteniéndose las siguientes lecturas de
absorbancia.

A400 A460
Muestra 1 0,172 0,116
Muestra 2 0,366 0,430

Sobre condiciones similares, la presencia de 1mg de Ti dio una absorbancia de 0,269 a 400nm y 0,134 a 460nm
Con el mismo tratamiento, 1mg de V dio una absorbancia de 0,057 a 400nm y 0,091 a 460nm.
Calcular el % de Ti y V en el acero.

14. Se ha demostrado que la cafeína C8H9O2N4.H2O (peso formula 212,1) tiene una absorbancia promedio A=0,510 para una
concentración de 30,4mg/100mL a 272nm
Una mezcla de 2,536g de una determinada marca de café soluble se mezcló con agua hasta un volumen de 500mL y se transfirió una
alícuota de 5,0mL a un matraz que contenía 5,0mL de H2SO4 0,1N. Esto fue sometido al tratamiento de clarificación prescrito y se aforó a
50mL.
Una parte de esta solución tratada mostró una absorbancia de 0,415 a 272nm
a) Calcular la absortividad molar
b) Calcular el número de gramos de cafeína por libra de café soluble

15. Se disolvió un ácido una muestra de alambre de Nichrome con un peso de 0,500g y por medio de un tratamiento adecuado, el cromo
de la muestra se convirtió en ion dicromato. En este forma se llevó a un volumen de 250mL. Luego 5mL se transfirieron a una cubeta para
el examen fotométrico.
Se tomó luego 1,000g de K2Cr2O7 puro, se disolvió en agua acidificada y se llevó a un volumen de 250mL (Sol A).
10mL de A diluidos con 10mL de agua dieron la solución B
10mL de A diluidos con 100mL con agua dieron la solución C
De cada una de estas soluciones se tomaron 5mL para el análisis fotométrico.
Se tomaron los siguientes resultados

Muestra Absorbancia
A 0,895
B 0,450
C 0,090
Desconocida 0,140

Calcular el porcentaje de Cr en el alambre de Nichrome

16. Se desea determinar el volumen de un tanque de forma irregular. Para ello , se llena el recipiente con H2O y se le añade 50kg de
CuSO4.5H2O. Se mezcla bien todo el sistema (Sol. A)
Se toma una muestra de la solución A (Sol. A) para analizarle el contenido de Cu por el método espectrofotométrico.
Luego 2mL de la solución A se llevan a un volumen de 200mL, dando la solución B (Sol. B). De la solución B, se toman 5mL y se
diluyen a 50mL obteniéndose la solución C (Sol. C), que se lee en el equipo espectrofotométrico.
Simultáneamente, se preparan una serie de patrones a partir de una solución de 500ppm de Cu (Sol. D)
0,2mL de la solución D se lleva a 100mL (Sol. E)
0,6mL de la solución D se lleva a 100mL (Sol. F)
1,0 mL de la solución D se lleva a 100mL (Sol. G)

Las lecturas obtenidas en el espectrofotómetro son las siguientes:

Muestra Absorbancia
Solución E 0,070
Solución F 0,220
Solución G 0,370
Solución C 0,250

A partir de los datos anteriores, calcular el volumen del tanque

17. Se desea determinar por espectrofotometría el % de Cu en una moneda. Se pesan 0,142g de la moneda, se disuelve en ácidos y se
diluye a 500mL (Solución A).
Un (1mL) de la solución A se diluye a 100mL (Solución B).
La solución B se determina en el equipo espectrofotométrico, obteniendose una lectura de 0,048 de absorbancia a 324,8nm.
Simultáneamente se preparan una serie de patrones de Cu a partir de 0,393g de CuSO4.5H2O diluyendo esta sal a 1 litro (Solución C).
De la solución C se preparan los siguientes patrones, obteniéndose las siguientes absorbanciancias:

Solución Absorbancia
0,5mL de C diluidos a 50mL 0,041
1,5mL de C diluidos a 50mL 0,127
2,0mL de C diluidos a 50mL 0,167
Solución B 0,048

A partir de estos datos calcular el % de Cu en la moneda

18. Se desea calcular el % de P2O5 en un fertilizante por el método de espectrofotometría visible.

Se pesan 0,2g del fertilizante, se extrae el fósforo en medio ácido, se filtra y se lleva aun volumen de 100mL (Solución A)
Se toman 3mL de la solución A, se adicionan 10mL de reactivo Molibdato-Vabadati de amonio y se completa a 50mL (Solución B) dando
un complejo amarillo que se puede leer a 450nm.
Paralelamente se preparan una serie de estándares por el cual se pesan 0,44g de KH 2PO4 y se disolvieron en 1000mL (Solución C)
De la solución C se preparan una serie de patrones de la siguiente forma, midiéndose posteriormente su absorbancia

Solución Absorbancia
0,5mL de C + 10mL de reactivos y afore a 50mL 0,041
5,0mL de C + 10mL de reactivos y afore a 50mL 0,330
10,0mL de C + 10mL de reactivos y afore a 50mL 0,640
Muestra solución B 0,400

Calcular el % P2O5 en el fertilizante

19. Se desea determinar la concentración de sulfatos en una muestra de agua. Para ello, se toman 10mL de agua de un río, se añaden
10mL de agua desionizada, 1mL de solución acondicionadora y 1nK de BaCl2 en gelatina al 0,3%. Se mide en el espectrofotómetro,
observando una absorbancia de 0,300.
Simultáneamente se preparan una serie de patrones de la siguiente forma, y se miden en el espectrofotómetro:
0,740g de Na2SO4 se disuelven en 500mL de agua (Solución A)

Solución Absorbancia
0,22mL de solución A + reactivos aforada a 25mL 0,120
0,66mL de solución A + reactivos aforada a 25mL 0,321
0,88mL de solución A + reactivos aforada a 25mL 0,461
Problema 0,302

Determinar la concentración de sulfatos en la muestra de agua

20. Si una solución de 0,0100M muestra un porcentaje de transmitancia de 45,0% a una longitud de onda, ¿Cual seria el porcentaje de
transmitancia para una solución de 0,0200 M de la misma sustancia a la misma longitud de onda?

21. A partir de una solución stock o estándar de 1000ppm de X se preparan diluciones 1:24, 2:23, 3:22, 4:21 y 5:20. 2mL de cada una se
tratan con 3mL de un reactivo específico para X y se obtienen soluciones coloreadas que al leerlas a la max producen las transmitancías en
porcentajes 82,2 ; 67,6 ; 56,1 ; 45,7 ; 37,6 respectivamente. Determine: a) Absortividad de X a partir de la curva de calibración. b) El
factor para convertir absorbancia a concentración en % (Las lecturas se hicieron en una celda de 1,0cm)

22. Se prepara una solución stock o estándar pesando 200mg de M y disolviendo a 550mL a partir de esta se elaboran por dilución los
patrones indicados en la tabla. Igual volumen de cada patrón se mezcla con igual volumen de reactivo o-toluidina y se leen a su max.

Dil 1/20 2/20 3/20 4/20 5/20 6/20 8/20 10/20 14/20 16/20 18/20 20/20
%T 96,0 80,0 73,0 54,5 45,0 38,0 30,0 25,0 12,0 9,0 8,0 8,0

a) Compruebe si el sistema M reactivo, cumple la ley de Beer

b) En que rango de concentraciones
c) Que rango de concentraciones posee el menor error fotométrico
d) Determine k para la ecuación A=kC
23. La determinación de la concentración de salicilatos en sueros se lleva a cabo por espectrofotometría U.V ya que el máximo de
absorción de este anión se encuentra en 300nm.
Un patrón de salicilato de 100% se diluyo 1/10 y se leyó a 300nm con buffer pH 10. Obteniéndose una absorbancia de 0,425. Una muestra
de suero luego de un tratamiento especial que indicaba una dilución 1/5 presentó una absorbancia de 0,320; si el blanco presenta una
absorbancia de 0,020, ¿Cuál es el contenido de salicilatos en el suero?

24. Una técnica fotométrica para Y tiene un rango óptimo de concentración de 5 a 20 ppm de Y cuando se mezclan 0,2mL de la muestra y
3,8mL de reactivo. Si la absortividad del complejo coloreado Y es 3X10-3 cm-1(ppm)-1. a) Cuanto se debe tomar de suero y de reactivo
para llevarlo al rango óptimo, si se espera que él tenga una concentración de 400 ppm. b) Cómo se procedería a tratar el suero si se desea
que al mezclarse con el reactivo la lectura de T sea de 38% en una celda de 1cm a la lambda de máxima absorción del complejo coloreado
de Y.

25. Amoniaco puede ser determinado espectroscopicamente por la reacción con fenol en presencia del ión hipoclorito.

OH OCl-
2 + NH3 O N O

Fenol Amoniaco (azul) (máx = 625nm)

(incoloro) (incoloro)

Una muestra de 4,37mg de proteína se le realizo una digestión química para convertir su nitrógeno a amoniaco y después diluirla a
100,0mL con agua. Posteriormente 10,0mL de esta solución fueron adicionados en un balón volumétrico de 50,0mL y tratados con 5,0mL
de solución de fenol más 2mL de solución de hipoclorito de sodio, llevando a volumen con agua. La absorbancia medida a 625nm en una
celda de 1,00cm después de 30 minutos fue la presentada en la tabla. Adicionalmente y como referencia fue preparada una solución de un
estándar de 0,0100g de NH4Cl (M=53,49g/mol) disuelto en 1,00L de agua. Posteriormente 10,0mL de esta solución de estándar fueron
colocados en un balón volumétrico de 50,0mL y analizados de la misma manera que la muestra. La solución blanco fue preparada usando
agua destilada en lugar de la muestra.

Tipo de solución Absorbancia a 625 nm

Blanco 0,140
Estándar 0,308
Muestra 0,592

a) Calcule la absortividad molar del producto azul.

b) Calcule el porcentaje en peso de nitrógeno en la proteína

26. Un analista químico del curso de análisis instrumental pretende analizar simultáneamente Cobalto y Manganeso de un acero por el
método espectrofotométrico visible; con este fin y para poder comparar, prepara un estándar mezcla de la siguiente manera:
1. Pesa 0,0503g (±0,0001g) de Cloruro de Cobalto Hexahidratado a un balón de 100,00mL(±0,08mL) y se lleva a volumen con
Acido clorhídrico 0,1M
2. Pesa 0,0221g (±0,0001g) de Permanganato de potasio a un balón de 100,00 (±0,08mL) y se lleva a volumen con Acido
clorhídrico 0,1M
3. De las dos soluciones anteriores se toma alícuotas de 2,00mL(±0,01mL) de la solución de cobalto y 5,00 mL(±0,02mL) de la
solución de Manganeso y se transfieren a un balón de 20,00mL mL(±0,05mL) llevando a volumen con acido clorhídrico 0,1M
De estas tres soluciones se tomo curva espectral en el rango de 400 a 600nm obteniéndose los siguientes resultados.

Curva espectral empleada para fines

académicos, sus resultados no
corresponden con las respuestas
experimentales para estos analitos
 λ Cobalto Manganeso

400 0,021 >1,000

450 0,033 0,022

500 0,048 0,016

550 0,012 0,018

600 0,001 0,002

La muestra de acero fue preparada con limaduras, de las cuales se peso 0,201g (±0,0001g) y a las cuales se les realizo un
tratamiento acido para disolverla y llevar a volumen de 100,00mL(±0,08mL) con acido clorhídrico 0,1M.

Esta última solución de la muestra fue leída al espectrofotómetro realizando una curva de calibración entre 400 y 600nm,
obteniéndose los siguientes resultados.

λ Ultima sln de
la mta

400 0,982

450 0,047

500 0,058

550 0,038

600 0,010

El factor de corrección entre la celda de muestra y la de blanco es de 0,991

• De los datos de las curvas espectrales indique cuales son las longitudes de análisis.
• Corregir los datos absorbancia seleccionados con el factor de corrección de celda.
• Indique el % de Cobalto y Manganeso en la muestra de acero con la incertidumbre para este resultado (no se considera el
efecto por la sensibilidad del equipo espectrofotométrico, es decir no se tiene en cuenta la incertidumbre que genera la
medida de absorbancia –considerar la absorbancia sin incertidumbre-)

CoCl2.6H2O PM:147,8g/mol; Co PA:58,9g/mol; KMnO4 PM: 159,6g/mol; Mn PA: 54,9g/mol