Interpretación de la Guía Eurachem para Validación de Métodos Analíticos

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Parte 2 – Conceptos Generales de Validación
Docente: Lic. Sergio Gustavo Chesniuk
www.MetroQuimica.Net

Referencias relacionadas
* Guide to method validation for quantitative analysis in chemical testing laboratories,
INAB Guide PS15, 3 April 2012,
www.Iinab.ie.

¿Qué es validar un método?

Validar un método es básicamente el proceso para definir un requisito analítico, y la confirmación de que cuenta con
capacidades consistentes con las aplicaciones requeridas

Tabla 1 — Definiciones del concepto de “validación” en ISO 9000, ISO/TEC 17025 y VIM
Definición Referencia
Confirmación, a través de la aportación de evidencia objetiva. de que se han
ISO 9000 [9]a
cumplido los requisitos para un uso o aplicación especifico previsto
Confirmación, a través del examen y aportación de evidencias objetivas, de que
ISO/TEC 17025 [1]
se cumplen los requisitos particulares para un uso específico previsto
Verificación, donde los requisitos especificados son adecuados para un uso
VIM [7]b
previsto
a) ISO 9000 define “proceso de calificación” como “el proceso para demostrar la capacidad de cumplir los
requisitos especificados”
b) VIM define “verificación” como “aportación de evidencia objetiva de que un elemento dado satisface los
requisitos especificados”

Verificación
El laboratorio debe confirmar su capacidad para aplicar el método.

¿Qué es validar un método”?

Tabla 2 — Información general sobre las características de desempeño evaluadas habitualmente durante la validación del
método
Características de desempeño
Selectividad
Límite de detección (LOD) y límite de cuantificación (LOQ)
Intervalo de trabajo
Sensibilidad analítica
Veracidad
* Sesgo, recuperación
Precisión
* repetibilidad, precisión intermedia y reproducibilidad
Incertidumbre de medida a
Robustez
a) En sentido estricto, la incertidumbre de medida no es una característica del desempeño de un procedimiento de
medida particular pero si de los resultados obtenidos al usar dicho procedimiento.

¿Porque es necesario validar un método?

Valoración de bienes con fines comerciales;
Apoyo a la asistencia sanitaria;
Control de la calidad de agua potable, alimentos y forrajes;
Análisis de la composición elemental de una aleación para confirmar su idoneidad para su uso en la construcción de
vehículos de transporte;
Análisis forense de los fluidos corporales en las investigaciones criminales.
Etc.
Riesgo: Decisiones equivocadas

Debe validarse el desempeño de un método y estimar la incertidumbre del resultado, para un determinado nivel de
confianza.
La Incertidumbre se debe evaluar y citar de tal manera que sea ampliamente reconocida, internamente consistente y fácil de
Interpretar.
Un laboratorio debe, siempre que sea posible, ofrecer asesoramiento al cliente sobre la toma de muestras como parte de su
atención al cliente.
Adicionalmente la validación:
- Proporciona un conocimiento sólido y experiencia en los detalles prácticos para llevar a cabo el método, incluyendo el
conocimiento de las etapas criticas del proceso.
- Brinda al laboratorio y su personal una mayor confianza en sus propios resultados.
-
¿Por qué es necesario validar un método?
- El trabajo de validación esta precedido de una fase de desarrollo que incluye a diferentes miembros del personal y
que puede realizarse de varias formas.
- En el desarrollo puede implicar la adaptación de un método ya existente realizando cambios menores (o no tanto)
- No hay ninguna garantía de que el método vaya a funcionar adecuadamente durante la validación (o bajo condiciones
de rutina en un laboratorio particular).

¿Cuándo debe validarse un método?

Un método debe ser validado cuando es necesario demostrar que sus características de desempeño son adecuadas para el
uso previsto.

De acuerdo a la Norma ISO/IEC 17025 [5.4.5.2] el laboratorio debe validar:

- Métodos no normalizados
- Métodos diseñados/desarrollados por el laboratorio
- Métodos normalizados usados fuera de su ámbito de aplicación
- Ampliaciones o modificaciones de métodos normalizados.

¿Cuándo debe validarse un método?

La validación debe ser tan amplia como sea necesaria para cumplir con los requisitos en relación con el uso dado o la
aplicación.

La extensión de la validación dependerá

- De la aplicación
- De la naturaleza de los cambios realizados
- De las circunstancias en que el método se va a utilizar

Equivalencia de los resultados obtenidos por dos métodos

También debe validarse

¿Cuándo debe verificarse un método?

El laboratorio debe confirmar que puede operar adecuadamente los métodos normalizados antes de introducir los ensayos
o calibraciones (ISO/IEC 17025 [5.4.2].
ISO, ASTM, EPA, etc.
Es necesaria la verificación cuando hay cambios importantes, como el uso de un equipo nuevo (pero similar), traslado de
equipos, etc.
También los procedimientos comerciales previamente validados por los fabricantes

¿Cuándo debe verificarse un método?

Actualización del software de un equipo.
Cuando los resultados de control de calidad Indica que el desempeño del método cambia con el tiempo.

¿Cuándo debe verificarse un método?

1. El método de análisis se desarrolla
internamente. Esto incluye el uso de un
método de análisis normalizado en una
matriz que no está descrita en el método
2a El método de análisis está publicado en
la literatura científica, pero carece de
características de funcionamiento
importantes
2b El método de análisis está publicado en
la literatura científica y especifica
características de rendimiento importantes
3a El método de análisis está normalizado o
bien establecido, pero no se dispone de
datos de validación externa
Validación completamente interna: el laboratorio debe tener en cuenta
todas las características de funcionamiento (véase el apartado 6) y
realizar una validación adecuada de las mismas. En caso de omisión
de determinadas características de funcionamiento en el trabajo de
validación, el laboratorio deberá dar cuenta de dicha omisión.
Validación interna completa como se indica en el punto 1.
El laboratorio deberá verificar su capacidad para utilizar el método de
análisis con respecto a las características de funcionamiento
especificadas. El laboratorio deberá evaluar la necesidad de validar
cualquier característica de funcionamiento.
El laboratorio deberá evaluar la necesidad de validación de aquellas
características de funcionamiento que sean críticas para el método de
análisis. El laboratorio deberá documentar, como mínimo, su capacidad
para utilizar el método de análisis con una calidad que satisfaga las

3b El método de análisis está publicado por
una de las organizaciones de normalización,
por ejemplo, S.I., CEN, ADAC, NMKL, ISO,
etc. El método de análisis está validado
externamente
necesidades del cliente.
El laboratorio deberá verificar su capacidad para cumplir las
características de funcionamiento especificadas para el método de
análisis. Es razonable esperar que la selectividad y la robustez se
investiguen en relación con el proceso de normalización.

¿Cómo debe verificarse un método?

Una vez finalizado el desarrollo inicial del método, el laboratorio debe documentar en detalle el procedimiento de medición.
Ver Anexo A de la guía

Dos estrategias fundamentales

- El uso de resultados interlaboratorios.
- La validación del laboratorio individual.

El uso de resultados interlaboratorios.

Estudios “colaborativos” o “cooperativos”
• Familia de normas ISO 5725
• Gran robustez
• Informacion disponible: Precisión y, a veces, sesgo.
ISO, CEN, AOAC.

Solo necesita verificar los datos de desempeño publicados o establecer y confirmar sus propios valores de desempeño
del método.

¿Cómo debe validarse un método?

Á partir de datos individuales del laboratorio
Métodos que son de interés general o de laboratorios competidores.
Serán aceptables con fines regulatorios dependiendo de las directrices que cubre el área de medición afectada.

El laboratorio tiene que decidir cuáles son las características de desempeño que deben ser investigadas para validar el
método y, en algunos casos, el grado de detalle para una característica particular.
Pueden emitirse guías generales para la extensión de la validación

¿Cómo debe validarse un método?

Tabla 3. Extensión de la validación para cuatro tipos de aplicaciones analíticas. Ejemplo para el sector farmacéutico [13]. “x"
significa una característica de desempeño que normalmente se valida.
Tipo de aplicación analítica
Característica de Ensayo de Ensayo para Cuantificación
Ensayo de
desempeño cuantificación de límite de del componente
identificación
impurezas impurezas principal
Selectividad x x x x
Límite de detección x
Límite de cuantificación x
Intervalo de trabajo
x x
incluyendo linealidad
Veracidad (sesgo) x x
Precisión (repetibilidad y
x x
precisión intermedia)
Nota: La tabla se ha simplificado y adaptado a la estructura y terminología de la Guía.

Se puede empezar con una cuidadosa descripción analítica en el alcance del procedimiento documentado
La validación es siempre un equilibrio entre costos, riesgos y posibilidades técnicas (ISO 17025)

¿Cómo debe validarse un método?

Limitaciones
• Requisitos legales y de clientes,
• Experiencias y herramientas disponibles,
• Necesidad de compatibilidad metrológica con otros métodos similares en uso dentro o fuera del laboratorio

Una planificación cuidadosa puede minimizar el esfuerzo a realizar, ya que un conjunto de experimentos puede proporcionar
información sobre diferentes características del método.
Métodos de Rutina vs Métodos Ad Hoc
¿Cómo debe validarse un método?
Plan e Informe de Validación
Título
Planificación
Características de desempeño
Resumen

¿Cómo debe validarse un método?

Herramientas de la validación
Blancos (de reactivos, de muestra)
Muestras de rutina
Soluciones/material fortificado (analito, interferente)
Materiales pre-adicionados
Patrones de medida (MR / MRC)
Estadística
Requisitos de validación
Proceso de validación de métodos

¿Cómo debe validarse un método?

¿Cómo debe validarse un método?
Preguntas que pueden plantearse para formalizar un requisito analítico

Pregunta Característica de desempeño

¿Hay restricciones en los recursos y cómo se aplican - el personal, el tiempo, el -
dinero, los equipos y los reactivos, las instalaciones de laboratorio?
¿Se requiere muestreo y submuestreo (y se realiza por el laboratorio)? -
¿Hay limitaciones en el tamaño o disponibilidad de la muestra? -
¿Cuál es la naturaleza química, biológica y física de la matriz? -
¿El analito está disperso o localizado? -
Selectividad
¿Se requiere una respuesta cualitativa o cuantitativa?
LOD y LOQ
¿Cuáles son los analitos de interés presentes y los niveles probables (%, μg, g -1, Selectividad
etc.)? ¿Están presentes en más de una forma química (i.e. estados de oxidación, LOD y LOQ
estereoisómeros) y es necesario distinguir entre las diferentes formas? Intervalo de trabajo y linealidad
¿Qué magnitud requiere ser medida (“el mesurando”)? ¿Interesa medir la Recuperación
concentración “total” del analito presente o la “cantidad extraída” bajo condiciones
concretas?
Veracidad y recuperación
Repetibilidad, precisión
¿Qué veracidad y precisión se requieren? ¿Cuál es la incertidumbre objetivo y
intermedia, reproducibilidad
como debe expresarse?
Incertidumbre

¿Cuáles son las interferencias más probables del analito(s)? Selectividad

¿Se han establecido tolerancias para los parámetros críticos de desempeño del
Robustez
análisis (i.e. tiempo de extracción, temperatura de incubación)?
¿Los resultados necesitan ser comparados con los de otros laboratorios? Incertidumbre
¿Los resultados necesitan ser comparados con especificaciones externas? Incertidumbre

PREGUNTA 1
ISO 17025:2005 afirma: El laboratorio debe utilizar los métodos de ensayo o de calibración, excluidos los de muestreo, que
satisfagan las necesidades del cliente y que sean apropiados para los ensayos o las calibraciones que realiza.
Seleccione una:

Verdadero

Falso 
Retroalimentación
La respuesta correcta es 'Falso'
PREGUNTA 2
ISO 17025 permite el uso de métodos de ensayo de desarrollo propio.
Seleccione una:

Verdadero 

Falso
Retroalimentación
La respuesta correcta es 'Verdadero'
PREGUNTA 3
Según ISO 17025, no resulta necesario validar métodos de calibración.
Seleccione una:

Verdadero

Falso 
Retroalimentación
La respuesta correcta es 'Falso'
PREGUNTA 4
La validación debe incluir el procedimiento de muestreo siempre y cuando el laboratorio sea responsable de dicho proceso.
Seleccione una:

Verdadero

Falso 
 Retroalimentación
La respuesta correcta es 'Verdadero'
PREGUNTA 5
Las necesidades del cliente se encuentran en un segundo plano respecto de si el método de ensayo es adecuado para su
uso.
Seleccione una:

Verdadero

Falso 
Retroalimentación
La respuesta correcta es 'Falso'
PREGUNTA 6
La validación debe incluir una verificación de que los requisitos pueden satisfacerse utilizando el método,
Seleccione una:

Verdadero 

Falso
Retroalimentación
La respuesta correcta es 'Verdadero'
PREGUNTA 7
Una vez validado el método, ya no resulta necesario revisarlo periódicamente.
Seleccione una:

Verdadero

Falso 
Retroalimentación
La respuesta correcta es 'Falso'
PREGUNTA 8
La validación es siempre un equilibrio entre los costos, los riesgos y las posibilidades técnicas.
Seleccione una:

Verdadero 

Falso
Retroalimentación
La respuesta correcta es 'Verdadero'
PREGUNTA 9
Una evaluación periódica e independiente del desempeño técnico de un laboratorio puede referirse a un ejercicio de
comparación entre laboratorios.
Seleccione una:

Verdadero 

Falso
Retroalimentación
La respuesta correcta es 'Verdadero'
PREGUNTA 10
La Guía Eurachem sobre la que se basa el curso se centra en la validación externa de los métodos, realizada por un
conjunto de laboratorios.
Seleccione una:

Verdadero

Falso 
Retroalimentación
La respuesta correcta es 'Falso'
PREGUNTA 11
En el proceso de validación de métodos está implícito que el analista que realice los estudios es competente en el campo de
trabajo concreto, y cuenta con los conocimientos suficientes para poder tomar las decisiones que puedan ser necesarias al
avanzar el estudio.
Seleccione una:

Verdadero 
 Falso
Retroalimentación
La respuesta correcta es 'Verdadero'