VALIDACIN DE

PROCEDIMIENTOS DE
ENSAYO

CONTENIDO

Validacin y Verificacin.

Documentacin
validacin.

de

la

Taller de validacin y
evaluacin
de
los
resultados.

VALIDACIN
USP
Es el proceso por el cual se establece, por medio
de estudios de laboratorio, que las caractersticas
de desempeo de un procedimiento cumplen con
los requisitos para la aplicacin analtica prevista.

ICH
El objetivo de la validacin de un procedimiento
analtico es demostrar que es apropiado para el
uso previsto.

VALIDACIN
WHO Technical Report Series, No. 937, Annex 4
Accin de demostrar y documentar que cualquier proceso,
procedimiento o mtodo, efectiva y consistentemente
conduce a los resultados esperados.

ISO/IEC 17025 5.4.5.1

La validacin es la confirmacin, a travs del exmen y
el aporte de evidencias objetivas, de que se cumplen
los requisitos particulares para un uso especifico previsto.

MTODO
Descripcin genrica de la secuencia lgica de operaciones
utilizadas en una medicin.

PROCEDIMIENTO
Descripcin detallada de una medicin, conforme a uno o mas
principios de medida y an mtodo dado, basado en un modelo de
medida y que incluye los clculos para obtener los resultados de
medida.

POR QU VALIDAR?

ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD
OPTIMIZACIN DEL
PROCEDIMIENTO / PROCESOS
REDUCCIN DE COSTO
REGULACIONES GUBERNAMENTALES

WHO Technical Report Series, No. 957, 2010

44th Report Annex 1

WHO Technical Report Series, No. 957

44th Report Annex 1

Aplica a Laboratorios de control de

calidad de productos farmacuticos.

WHO Technical Report Series, No. 957

44th Report Annex 1

Se
considera
que
los
mtodos
farmacopeicos
(monografas)
estn
validados para el uso previsto.
Sin
embargo, el laboratorio debe confirmar
para un producto farmacutico que se
analiza por primera vez, que no hay
interferencia a partir de los excipientes
presentes

WHO Technical Report Series, No. 957

44th Report Annex 1
Siempre que los criterios de aptitud del
sistema se cumplan, el mtodo o
procedimiento se considera adecuado
para el propsito previsto.
No
requieren
verificacin
los
procedimientos farmacopeicos bsicos.

VERIFICACIN

Aporte de evidencia objetiva de que

un elemento satisface los requisitos
especificados.
VIM 3RA ed. 2008

VERIFICACIN
La verificacin consiste en la
evaluacin de las caractersticas
de
desempeo
analtico
seleccionadas, como las que se
describen
en
el
captulo
<1225>, para generar datos
relevantes y adecuados, en vez
de
repetir
el
proceso
de
validacin
USP <1226> Verificacin de Procedimientos Farmacopeicos

VERIFICACIN
En los EE.UU., se estableci en el punto 21
CFR 211.194(a)(2) de las BPM que:
Se verificar la aptitud de todos los mtodos
de prueba usados bajo condiciones de uso
reales
La verificacin consiste en la evaluacin de
alguna de las caractersticas de desempeo
analtico.
USP <1226> Verificacin de Procedimientos Farmacopeicos

VERIFICACIN
Aplica a frmacos, productos terminados y
excipientes.
Se
aplica
a
titulaciones
volumtricas,
procedimientos
cromatogrficos,
espectroscpicos.
No incluye la verificacin de procedimientos
microbiolgicos.
USP <1226> Verificacin de Procedimientos Farmacopeicos

VERIFICACIN DE PRODUCTOS
TERMINADOS
CATEGORA II
MTODO

CATEGORA I

CATEGORA III

CATEGORA IV

Anlisis
Cuantitativo

Pruebas de
Lmite

P,E,L

P,E,LDC

E,LDD

Espectrofotometra

P,L

P,LDC

E,LDD

Volumetra

P,L

---

---

---

TLC

---

E,LDC

E,LDD

---

Electroforesis

---

E,LDC

E,LDD

---

HPLC/GC

P=Precisin; E=Especificidad; L=Linealidad; LDD=Lmite de deteccin; LDC=Lmite de

cuantificacin.

CUNDO VALIDAR?

PROCEDIMIENTO
ESTANDARIZADO

ROBUSTEZ
Es una medida de la capacidad de un
procedimiento
analtico
de
permanecer
inalterado por variaciones pequeas pero
deliberadas del procedimiento y proporciona una
indicacin de su confiabilidad durante las
condiciones normales de uso.
El plan de experimentacin se basa en diseos
factoriales cuya caracterstica mas destacable
es que los valores de todos los factores se van
moviendo simultneamente.

PRE-REQUISITOS DE UNA
VALIDACIN
Estructura organizativa y sistema de
documentacin
Personal
Equipamiento
Materiales e insumos
Instalaciones
Gestin Recursos financieros

PRE-REQUISITOS DE UNA
VALIDACIN

ESTRUCTURA ORGANIZATIVA Y SISTEMA

DE DOCUMENTACIN

PRE-REQUISITOS DE UNA
VALIDACIN
PERSONAL

Educacin

De acuerdo a la
identificacin del puesto

Formacin

Capacitacin terica
Capacitacin prctica

Evaluacin

Conocimiento
Desempeo

PRE-REQUISITOS DE UNA
VALIDACIN
EQUIPO
Calificacin

C. Diseo
C. Instalacin
C. Operacin
C. Desempeo

Mantenimiento

Predictivo
Preventivo
Correctivo

Calibracin

DEFINICIONES
CALIFICACIN DE DISEO (DQ):
Verificacin documentada que demuestra que
diseo de instalaciones, sistemas y/o equipos
apropiado para el propsito establecido basado
el cumplimiento de las especificaciones
requerimiento del usuario.

el
es
en
de

CALIFICACIN
DE
INSTALACIN
(IQ):
Verificacin documentada de que el equipo o
sistemas, como instalados o modificados, cumplen
con el diseo aprobado, las recomendaciones del
fabricante y/o los requerimientos del usuario.

DEFINICIONES
CALIFICACIN
OPERACIONAL
(OQ):
Verificacin documentada de que las instalaciones,
sistemas y/o equipos funcionan en forma adecuada
de acuerdo a los parmetros de operacin con base
en el diseo.
CALIFICACIN
DE
DESEMPEO
(DQ):
Verificacin documentada de que las instalaciones,
sistemas y equipos, se desempean en forma
adecuada de acuerdo a los parmetros especficos
del proceso en el que sern utilizados.

PRE-REQUISITOS DE UNA
VALIDACIN
MATERIALES E INSUMOS

PRE-REQUISITOS DE UNA
VALIDACIN
INSTALACIONES

PRE-REQUISITOS DE UNA
VALIDACIN
GESTIN RECURSOS FINANCIEROS

DATOS REQUERIDOS PARA LA

VALIDACIN - USP
CATEGORA II
CARACTERSTICAS DE DESEMPEO
ANALTICO

CATEGORA I

CATEGORA III

CATEGORA IV

Anlisis
Cuantitativos

Pruebas de
Lmite

Exactitud

SI

SI

NO

Precisin

SI

SI

NO

SI

NO

Especificidad

SI

SI

SI

SI

Lmite de Deteccin

NO

NO

SI

NO

Lmite de Cuantificacin

NO

SI

NO

NO

Linealidad

SI

SI

NO

NO

Intervalo

SI

SI

NO

(*) Pueden requerirse, dependiendo de la naturaleza de la prueba especfica.

CARACTERSTICAS
DE
LOS
PROCEDIMIENTOS ANALTICOS -OMS
TIPO DE PROCEDIMIENTO
ANALTICO

IDENTIFICACIN

ANLISIS DE IMPUREZAS

Ensayos
Cuantitativos

Caractersticas

Ensayos de
Lmite

VALORACIN

Disolucin (solo
medicin)
Contenido /
potencia

Exactitud

()

(+)

()

(+)

Repetibilidad

()

(+)

()

(+)

Precisin intermediaa

()

(+)

()

(+)

Especificidad

(+)

(+)

(+)

(+)

Lmite de deteccin

()

()b

(+)

()

Lmite de cuantificacin

()

(+)

()

()

Linealidad

()

(+)

()

(+)

Intervalo

()

(+)

()

(+)

Precisin

La precisin intermedia no es necesaria en casos donde se ha realizado un estudio de reproducibilidad.

Puede necesitarse en algunos casos.

ESPECIFICIDAD/SELECTIVIDAD
Capacidad de un procedimiento analtico para
evaluar de manera inequvoca el analito en
presencia de aquellos componentes
previsibles,
tales como impurezas, productos de degradacin y
componentes de la matriz.

ESPECIFICIDAD/SELECTIVIDAD
PROCEDIMIENTO:
1.

2.

En forma indirecta a travs del ensayo de exactitud.

LINEALIDAD
Es la capacidad del procedimiento para
proporcionar resultados que son directamente
proporcionales a la concentracin del analito en
la muestra dentro del rango establecido.

LINEALIDAD
Ley de Lambert - Beer
La cantidad de radiacin absorbida es
directamente proporcional entre la absorbancia
de una muestra y su concentracin.
Limitaciones a la Ley de Lambert - Beer
Cuando la concentracin del analito es pequea.
Cuando la concentracin de analito es elevada
Cuando existen impurezas en la muestra
Cuando se produce una interaccin qumica de la
muestra con otras sustancias o reactivos.

LINEALIDAD
Mtodos instrumentales
Espectroscopa Ultravioleta
Espectroscopa Visible
Espectroscopa Infrarrojo
Espectroscopa de
fluorescencia
Espectroscopa de Absorcin
atmica.
Cromatogrficos (HPLC)

LINEALIDAD
PROCEDIMIENTO:
ICH recomienda establecer la linealidad
utilizando mnimo cinco concentraciones.
Rango de Evaluacin

Criterio de
aceptacin

Valoracin

80,0 % 120,0%

r 0,999

Impurezas

50,0 % - 120,0 %

r 0,98

Uniformidad
de contenido

70,0 % - 130,0 %
o

r 0,999

Disolucin

Q 20 %

LINEALIDAD
Validez del modelo de Regresin Lineal:
1. El coeficiente de correlacin y determinacin.
2. El anlisis de varianza de la regresin debe ser
significativo.
3. Los residuales deben presentar aleatoriedad y normalidad.

INTERVALO

EXACTITUD
La exactitud de un procedimiento analtico es la
proximidad entre los resultados de la prueba
obtenidos mediante ese procedimiento y el valor
verdadero 1.

Valor verdadero

Valor medido

0,995 kg

1 kg

Proximidad entre el valor medido y el verdadero

del mensurando2.
1: USP ;

2: VIM

EXACTITUD
PROCEDIMIENTO:
ICH recomienda que se evale la exactitud
utilizando un mnimo de nueve determinaciones
sobre un mnimo de tres niveles de
concentracin,
cubriendo
el
intervalo
especificado.

EXACTITUD
PROCEDIMIENTO:
Placebo + Cantidades conocidas de
analito
dentro
del
intervalo
del
procedimiento.
Producto farmacutico
conocidas de analito.

Cantidades

Comparando
los
resultados
del
procedimiento con otro procedimiento de
ensayo bien caracterizado.
Aplicando un procedimiento
muestra de pureza conocida.

una

EXACTITUD
TRATAMIENTO DE RESULTADOS:
Calculado como porcentaje de recuperacin (R) :
x
% R *100

CF CM
%R
* 100
CA

X Valor Promedio
Valor verdadero

CF = CM+CA

CF Concentracin de analito en la muestra fortificada

CM Concentracin de analito en la muestra sin fortificar
CAConcentracin de analito aadida

EXACTITUD
TRATAMIENTO DE RESULTADOS:
En el caso que se use el mtodo de adicin
de Estndar, el porcentaje de recuperacin se
calcula con el valor interpolado en la ecuacin
de la recta de calibracin.

EXACTITUD
CRITERIO DE ACEPTACIN
Industria farmacutica

Segn AOAC, 1993; Huber,1999

PRECISIN
La precisin de un procedimiento analtico es el
grado de concordancia entre los resultados de
las pruebas individuales cuando se aplica el
procedimiento
repetidamente
a
mltiples
muestreos de una muestra homognea 1.
Muestra 1

99,2 %
91,2 %

X 99,2

Muestra 2 98,9 %
1: USP

99,0 %

Muestra 3

PRECISIN
Proximidad entre las indicaciones o los valores
medidos obtenidos en mediciones repetidas de
un mismo objeto, o de objetos similares, bajo
condiciones especificadas2.
Expresin:

x
n

s
2: VIM

i 1

n 1

s
RSD% *100
x

PRECISIN
INTERMEDIA

REPETIBILIDAD

REPRODUCIBILIDAD

PRECISIN

PRECISIN
PROCEDIMIENTO:
ICH recomienda que se evale la
repetibilidad utilizando un mnimo de
nueve determinaciones que cubran el
intervalo
especificado
para
el
procedimiento.
Alternativa 1

Alternativa 2

03 concentraciones y
03
determinaciones
repetidas
de
cada
concentracin.

06 determinaciones al
100
%
de
la
concentracin
de
prueba.

PRECISIN
CRITERIO DE ACEPTACIN

1:Hortwitz W. Evaluation of Analytical Method used for Regulation of

Food and Drugs Anal. Chem.

LMITE DE DETECCIN
/CUANTIFICACIN

LD = S/R 3

LC = S/R 10

APTITUD DEL SISTEMA

Los parmetros de prueba de la aptitud del
sistema
deben
establecerse
para
un
procedimiento especfico. Referencia Aptitud
del sistema, captulo <621> USP

APTITUD DEL SISTEMA

APTITUD DEL SISTEMA

APTITUD DEL SISTEMA

TIPOS DE VALIDACIN
VALIDACIN PROSPECTIVA

VALIDACIN RETROSPECTIVA

VALIDACIN CONCURRENTE

REVALIDACIN
Es la repeticin total o parcial de la
validacin de un procedimiento o proceso,
para asegurarse de que es capaz de alcanzar
los resultados previstos. Se aplica por
cambios y por Aseguramiento de la calidad.
Cambio de uno de los componentes crticos de la
formulacin o cambios en los procesos.
Cambio o reemplazo de una pieza crtica en un
sistema o equipo.
Cambio de instalaciones.
Cambio en el tamao del lote de fabricacin.
Unidades producidas fuera de especificaciones en
lotes consecutivos.

REVALIDACIN
Procedimiento:

Un cambio importante en el procedimiento.

Cambio en la composicin del producto.
Cambio en la sntesis del ingrediente
Farmacutico.

CICLO DE VIDA- VALIDACIN

DOCUMENTACIN DE LA VALIDACIN

DOCUMENTACIN DE LA VALIDACIN
Protocolo de
Validacin
Objetivo y alcance.
Responsables.
Datos de la muestra.
Caractersticas de
estudio.
Equipos e Insumos.
Procedimientos
analticos.
Criterios de aceptacin.

Informe o Reporte
de validacin
Referencia al o los
protocolos.
Datos de la muestra.
Resultados
de
cada
parmetro con todos los
datos primarios.
Datos
trazables
de
equipos, materiales e
insumos utilizados.
Referencia
a
la
cualificacin de equipos.
Conclusiones
y
recomendaciones, firmas

DOCUMENTACIN DE LA VALIDACIN
CERTIFICADO DE VALIDACIN
Documento formal de aprobacin que emite el
laboratorio, donde consolida los resultados y
criterios de aceptacin de cada caracterstica
evaluada en el procedimiento o proceso.