INGENIERIA GENETICA

INGENIERIA GENETICA

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INGENIERIA GENÉTICA

Es una parte de la biotecnología que se basa en la

manipulación genética de organismos con un
propósito predeterminado aprovechable porel
hombre.
La ingeniería genética, también llamada biogenética, es
la tecnología del control y transferencia de ALDJNde un
organismo a otro, lo que posibilita la creación de nuevas
especies, la corrección de defectos genéticos y la
fabricación de numerosos compuestos.
 Ingeniería genética
se puede definir como la formación '/n wíiro de nuevas
combinaciones de material genético, por medio de la inserción
de un ADM de interés en un vehículo genético (wector), de
modo que tras su introducción en un organismo huésped, el
ADN hibrido (recombinante) se pueda multiplicar, propagar, y
eventualmente expresarse.

Lo que se pretende mediante la ingeniería

genética es lograr ciertos fines tanto en la
ciencia pur a como en la aplicada
(producción microbiana de
productos, plantas y animales
transgénicos, nuevos diagnósticos) .-
 TÉCNICAS DE LA INGENIERÍA GENÉTICA

” ADN recombinante

” La Gel-electroforesis:

” Vectores.

” Técnica de la PCR

” Biochips
Non,
 ADN recombinante
ADN recombinante

Esta técnica
Esta técnica permite
permite aislar
aislar un
un gen
gen de
de un
un organismo,
organismo,
para su
para su posterior
posterior manipulación
manipulación e e inserción
inserción enen otro
otro
diferente. De
diferente. De esta
esta manera
manera podemos
podemos hacer
hacer que
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un
organismo animal,
organismo animal, vegetal,
vegetal, bacteria,
bacteria, hongo,
hongo, oo un
un virus,
virus,
produzcan una
produzcan una proteína
proteína que
que le
le sea
sea totalmente
totalmente extraña
extraña
 ADN recombinante

El ADN recombinante es aquel que tiene fragmentos de distinta

procedencia.

De forma natural existen ADN recombinantes, cuando los

wirus insertan su ADN en el ADN de la célula huésped.

se pensó hacer lo mismo de manera artificial en el

laboratorio utilizando enzimas de restricción.
 TECNICA DEL >RECOMBINAMNTE

Una wez conocida el fragmento de ADM y su secuencia, la proteina de

interes inmunologico, se aisla el fragremo de ADM (1), y se inserta en un
plasmido (2) Este plasmido se introduce en un wector de expresión (E
cof, Baculovwirus) (3) Algunos aceptarán «el gen y producirán el
recombinante (4) Otros, la mayoría, no (5)
 VECTOR
VECTOR

Cuando se
Cuando se pretende
pretende que
que las “factorías” biotecnológicas
las “factorías” biotecnológicas (o(o una
una célula)
célula)
produzca un
produzca un material
material específico,
específico, debe
debe dársele
dársele la
la orden
orden específica,
específica, esto
esto
es proveerle
es proveerle dede los
los genes
genes necesarios.
necesarios. Para
Para ello
ello se
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debe agregar
agregar aa su
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ADN natural
ADN natural unun complemento
complemento génico
génico (previamente
(previamente determinado
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transportador.
 ADN del virus Vector de
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de restricción
Ejemplo de
Ejemplo de preparación
preparación de
de un
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Estos vectores
Estos vectores permiten
permiten obtener
obtener múltiples
múltiples copias
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de un
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trozo específico
específico de
de
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ADN, que proporciona
lo que proporciona una
una gran
gran cantidad
cantidad de
de material
material fiable
fiable con
con el
el que
que
trabajar. El
trabajar. El proceso
proceso de
de transformación
transformación de
de una
una porción
porción de
de ADN
ADN enen un
un vector
vector se
se
denomina
denomina clonación.
clonación.
 PCR
Polymerase Chain Reaction
«Es la amplificación de DNA ín vitro por medio de la
polimerización en cadena de DNA utilizando un termociclador.

*El propósito del PCR es hacer muchas copias de un fragmento

de DNA.

«Se realiza la amplificación de un segmento especifico de DNA,

teniendo poco material disponible.
Polimerasa Chain Reaction: Reacción en Cadena dela
Polimerasa

* Fue diseñada por el Dr. Kary

Mullis en 1987.

*« Ganó el premio Nóbel de

Química en 1993 por su
invento.

- Utilizo el PCR para

amplificación del gen de fP-
hemoglobina humana, y el
diagnostico prenatal de
anemia falciforme.
 Termociclador

La PCR se realiza en
un “Thermo Cycler”
Termociclador.

Es una máquina que

calienta y enfría la
reacción en periodos
cortos de tiempo.
 El proceso de “PCR” incluye 3 pasos básicos que
se repiten 25 veces o más:
* 1, Desnaturalización: Consiste en separar la doble hebra de DNA y
convertirla en hebra sencilla.
Típicamente se usa una temperatura de 95"C - 97"C, por 15 a 40 segundos
—el tiempo depende del tamaño del genoma-

OO
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AAAAAA G

Ya Y
2. Apareamiento o “anneling”:
* Los cebadores “primers” previamente diseñados,
reaccionan con la hebra sencilla de DNA y se pegan en
lugares especificos por complementariedad de bases.
Para esto, se baja la temperatura -ej: 55"C por 30
segundos-. La temperatura y el tiempo puedevariar
entre cebadores según sea el caso.
3. Polimerización o Extensión.

Una Polimerasa de DNA extiende los “primers”, en el espacio

comprendido entre ambos “primers”, y coloca dinucleotidos
trifosfatados (dNTP*s) de 5'a 3" leyendo el DNA de 35”. De
estas forma sintetiza la secuencia complementaria de las
hebras de DNA molde

Se efectúa a 70"C por 14 minutos (puede variar según sea

necesario)

|> 2 mMolcU'n6
a|
Los pasos 1, 2 y 3se repiten cuantas veces sea necesario.
En el PCR hay una amplificación exponencial
a

—
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 PCR
PCR
REACCION EN
REACCION EN CADENA
CADENA DE
DE POLIMERASA
POLIMERASA
Es una
Es una técnica
técnica de
de biología
biología molecular
molecular que
que se
se utiliza
utiliza para
para amplificar
amplificar in
in vitro
vitro una
una secuencia
secuencia
especifica de
especifica de ADN,
ADN, mediante
medianteciclos repetitivos de
ciclos repetitivos de síntesis
síntesis usando
usando cebadores
cebadores o o ““ primers”
primers”
específicos Y
específicos Y ADN
ADN polimerasa.
polimerasa.

Consiste en
Consiste en multiplicar
multiplicar un
un determinado
determinado fragmento
fragmento de
de ADN
ADN millones
millones de
de veces
veces para
para poder
poder
tener una
tener una cantidad
cantidad suficiente
suficiente para
para estudiarlo.
estudiarlo.

Aplicaciones de
Aplicaciones de PCR:
PCR:

-- Secuenciación
Secuenciación
-- Estudios evolutivos
Estudios evolutivos
-- Huellas dactilares
Huellas dactilares del
del ADN
ADN
-- Paternidad
Paternidad
-- Diagnostico
Diagnostico
 APETCACIONES. DE-TEA
INGENTERIA GENETICA

rquepermiten hacermodificaciones -
muy específicasdel genoma quevalela
pena analizar con detalle, debidoa sus
importantes aplicaciones presentes y
futuras.
 INGENIERIA GENETICA
EN LOS ANIMALES
La manipulación genética de los
animales persigue multiples objetivos:
aumentar el rendimiento del ganado,
producir animales con enfermedades
humanas para la investigación,
elaborar fármacos, etc.
Se está investigando la creación de
nuevas razas de animales mediante
tecnicas de manipulación genética.
Los primeros pasos se han dado
obteniendo animales clónicos, como la
oveja Dolly (1997). Estas nuevas
razas pueden ser más resistentes y
rentables.
 INGENIERIA GENETICA
INGENIERIA GENETICA EN
EN VEGATALES
VEGATALES

“2 La modificación genética de los

y tejidos
vegetales para mejorar
propiedades
Bacteria cuestiones cientificas
polémicas a día de hoy. Desde
que hace más de 8.000 años los
Extracción y
agricultores centroamericanos
aislamiento de $e mejorasen las plantas de judias,
algodón y calabaza, los rasgos de
plantas y animales
Clonación y diseño continuado alterando mediante el
de genes TEAM EmaCIón ; cruce. No fue hasta que los
ps científicos desvelaron
definitivamente la naturaleza de
los genes en la década de los 40,
cuando quedaría claro que esto
cambia de forma aleatoria el ADN
de las células.
Echa un vistazo a la ropa que llevas. El algodón de.

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ia LA

algodón que difieren de sus ancestros naturales por

haber sufrido un intenso programa de mejora,
consistente en la aplicación metódica de postulados
genéticos estándares. Lo mismo podría decirse de
tu comida más reciente: el arroz, el trigo, el pollo, la
ternera, el cerdo y el resto de los principales
organismos que sirven de alimento a los seres
humanos en este planeta han sido especialmente
seleccionados por mejoradotes de plantas y
animales.
 VENTAJAS
VENTAJAS
-Gracias a la Ingeniería genética, los clentíficos pueden
hacer clertas
combinaciones entre genes de diferentes especles, para
así solucionar problemas y mejorar el rendimiento
económico-comercial de las explotaciones.

- Se pueden buscar curas a enfermedades genéticas para

que las nuevas generaciones nazcan mas sanas

ENT l tomate por ejemplo se le ponen genes antisentido (en

VENTAJAS ido inverso a un gen concreto) para así retrasar al
proceso de reblandecimiento.

- Gracias a esto, la ciencia ha conseguido que se cultiven

plantas con mayor tolerancia a la sequía o protegidos
frente a virus.

< En algunos cultivos, se han puesto genes de bacterias

para que desarrollen proteínas insecticidas y reducir el
empleo de insecticidas.

- También se pueden insertar genes humanos responsables

de la producción de Insulina en cólulas bacterianas para
que obtener insulina de gran calidad a bajo coste. Estas
alla as ll ss as ls a ss ml El ll ss AAA
 INCONVENIENTES
INCONVENIENTES

- Uno de estos peligros es el hecho de que detrás

de los proyectos de manipulación genética están
las compañías multinacionales muy preocupadas
por el interés económico.

- También pueden “contaminar” otras plantas

no transgénicas.

- Pueden llegar a ser cancerígenas en el caso

de ser consumidos por sujetos proclives o en un
estado inmunológico deficiente. No obstante esto
es una hipótesis pero que muchos médicos que
están en contra de los alimentos transgénicos lo
afirman.

- Puede producir alergias, algo que

preocupa mucho a los productores de estos
alimentos. Puede ser debida al material genético
transferido, a la formación inesperada de
un alérgeno o a la falta de información sobre la
proteina que codifica el gen insertado
Los avances en ingeniería genética
permitirán incorporar vacunas «a
los alimentos transgénicos en
cinco años
Plantas transgénicas
Transgénesis= introducción de ADN extraño en un genoma, de modo que se mantenga estable
de forma hereditaria y afecte a todas las células en los organismos multicelulares.

Agrobacterium fumefaciens es patógena de plartas. Produce tumores

Agrobacterium

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A
A

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rg inds
crecimiernto. Se
a
las zonas de la
les ión
 LA TERAPIA GÉNICA
Noe ple Me lo e INEAMEA e Mo
esta función, con el fin de corregir una alteración genética O
enfermedad adquirida.

La terapia génica se divide en dos categorías:

pS Alteración de células germinales
+ Terapia somatica celular
 LA TERAPIA GÉNICA
Dentro de la terapia génica tenemos:

Fabricación de péptidos de interés sanitario

OS o e ios
Diagnóstico y tratamiento de enfermedades
aiii
Fabricación de vacunas transgénicas
Fabricación de antibióticos
 LA TERAPIA GÉNICA
Xenotrasplantes
Trasplantes de tejidos y órganos de animales a humanos,
aunque estos procedimientos aun están en fase de
experimentación.
Diagnóstico y tratamiento de enfermedades
e AEE
Se realiza a través de sondas de ADN y anticuerpos
monoclonados. O otra tecnica de diagnóstico de
enfermedades genéticas que son las técnicas de bandeo
cromosómico
Fabricación de vacunas transgénicas
Nuevas vacunas atenuadas
La actual vacuna de la hepatitis B, es una vacuna.
ilelo AA lA Ela no lr Moller
ALIMENTADA
 LA TERAPIA GÉNICA

zz Fabricación de antibióticos
La Ingeniería genética para producir antibióticos
modificados, alterando las enzimas que los fabrican.
- Obtención de anticuerpos monoclonales.
Utilizados en la obtención del interferón .
Se usan en las enfermedades infecciosas