Evaluación integral del complejo

Iresine diffusa e Iresine herbstii

(Amaranthaceae)

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Carlos Alberto Agudelo Henao

Estudiante Programa de Doctorado en
Ciencias – Biología, Universidad del Valle
 Introducción
• Iresine diffusa: 5 morfotipos

• Iresine herbstti: 3 morfotipos

• Eliasson (1987) propone incluir Iresine herbstii en I. diffusa.

• Hay dos variedades descritas para I. diffusa.

• En Colombia hay 5 morfotipos no estudiados.

• Se ha encontrado fuerte variación de la especie en América.

• La taxonomía del grupo es incierta.

 OBJETIVO GENERAL

• Evaluar la variabilidad molecular,

anatómica y palinológica del complejo
Iresine diffusa H. & B. ex Willd. e Iresine
herbstii Hook. que crecen en Colombia,
con el fin de determinar si se trata de una
o varias especies.
 Hipótesis
• Ho: No hay variaciones intra e interespecífica
moleculares, anatómicas, ni palinológicas significativas
entre Iresine diffusa e Iresine herbstii, solo existen
variaciones plásticas sutiles, por lo cual sus similitudes
son elevadas y deben tratarse como una sola especie.

• H1: Al menos existen diferencias significativas

moleculares y/o anatómicas y/o palinológicas que
demuestran variación intra e interespecífica en Iresine
diffusa e Iresine herbstii que permite separarlas y
proponer alternativas sistemáticas para su manejo.
Morfotipos Iresine diffusa
H. & B. ex Willd.
 Morfotipos de
Iresine herbstti Hook

Ornamental
Cultivariedades
medicinal
 Justificación
• Hay un problema taxonómico por resolver

• Son especies usadas en la medicina tradicional y no es claro

cuál nombre debe ser aplicado en cada caso.

• La morfología tradicional no ha permitido resolver el

problema.

• Es una especie de amplia distribución.

• Se considera que mediante otras técnicas y métodos se

podría resolver el problema.

• Es fundamental precisar al biodiversidad vegetal

 Materiales y métodos
Trabajo de campo: Colección de muestras:

Molecular Anatómico Palinológico

AFLPs MOAR MOAR

Hojas jóvenes hojas y tallos flores masculinas

Sílica Gel 10:1 Fijar Glutaraldehido 0.2M Herbario ó vivo

ESTUDIO MOLECULAR

Obtención del ADN y su calidad

Extracción del DNA de cada morfotipo

Macerando 5 g hojas en nitrógeno

Almacenamiento del ADN obtenido

Congelador a -80 oC

Determinación de la calidad del ADN

intensidad de bandas y fluorometría

Método AFLP

Zabeau & Voss (1993).

Usaran 500 ng de DNA
 ESTUDIO ANATÓMICO
Posfijación Tinción
OsO4 Azul de Toluidina

Deshidratación Fijación
etanol 25-100% permanentemente

Aclaramiento Microscopio Óptico de

Etanol y Acetona Alta Resolución

Preimbibición resina Captura imágenes

Spurr : Acetona
cámara digital
Inclusión definitiva
resina Spurr Caracterización
morfométrica
Conformación bloques
Sistema de Análisis de
Cortes Ultramicrótomo Imágenes
 ESTUDIO PALINOLÓGICO

Obtención del polen:

ejemplares de herbario
material vivo.

Preparación de muestras:
tratamiento químico Erdtman
(1952)

Elaboración de placas
permanentes

Descripción micromorfológica: Toma de medidas:

nomenclatura de Erdtman 1000X , micrómetro de precisión Olympus
(1952) OMS4 (datos en µ).

Morfología general del grano de Granos a medir de cada morfotipo: 25

polen determinada:
ámbito y la simetría Toma de fotografías.
 ANALISIS DE DATOS Análisis bioinformático

Construcción matrices Genbank y EMBL:

Datos binarios Secuencias
Molecular, Anatomía y TROPICOS: Taxonómica
Polen

Análisis estadístico

ARLEQUIN
NTSYS Diferenc. poblacional
Ind. similitud Nei (1978) Raymond & Rousset
Comp. principales
(1995)

TFPGA
WIN-AMOVA Distancia genética PAUP
Análisis combinado
Análisis de varianza Agrupamientos UPGMA
de caracteres
molecular
heterocigosidad
 Resultados esperados
• Hallar nuevas fuentes de caracteres.

• Encontrar caracteres moleculares, anatómicos y

palinológicos que permitan diferenciar las dos
especies y sus morfotipos.

• Alcanzar una visión más integral del complejo de

especies.

• Proponer un nuevo manejo taxonómico para el

complejo.