"Año del Bicentenario 

del Perú: 200 años de Independencia"

TALLER N°1

A: MSc. Blgo. MARÍN SÁNCHEZ, Obert

Docente Responsable de la Asignatura Biotecnología
Ambiental
 
De: HUAYRA SOTO, Jhonatan Abel
LIZARRAGA VELASQUEZ, Martin Sebastian
RAMOS VALERO, Heyzen
UCHARIMA ROMERO, Haydee Yohanna

Asunto: Proteínas Recombinantes

 VENTAJAS DE PRODUCCIÓN DE PROTEÍNA
HERRAMIENTAS DE LA BIOTECNOLOGÍA
RECOMBINANTE
• Determinación de la estructura de doble
• Permite obtener proteínas humanas, o de hélice del ADN (James Watson y Francis
cualquier origen, en organismos fácilmente Crick, 1962).
cultivables. • La información genética es traducida a
• Se obtienen grandes cantidades del producto, de proteínas
una forma más fácil y sobre todo reproducible. • A comienzo de los años 70.
• Se obtienen productos libres de patógenos y • Endonucleasas de restricción, ADN ligasas,
otros riesgos potenciales. ADN polimerasa.
• Pueden producirse proteínas que no existen en la • Tecnología del ADN recombinante.
naturaleza. PROTEÍNAS
RECOMBINANTES
¿CÓMO SE OBTIENE UNA ¿QUÉ ES?
PROTEÍNA RECOMBINANTE?
¿PARA QUÉ SIRVEN? • También llamadas proteínas
• Introduciendo genes quiméricas o proteínas
heterólogos en un heterólogas
hospedero. Áreas básicas Áreas aplicadas • son aquellas producidas en
• La expresión del gen sistemas heterólogos mediante
• Salud: Insulina humana
heterólogo depende de los • Biología, tecnología de ADN recombinante.
sistemas de transcripción y recombinante • Proteínas producidas
cristalografía • Biotecnología anticuerpos
traducción del hospedero. • Biofísica, artificialmente a partir de genes
• El hospedero reconoce la recombinante clonado
bioquímica • Agricultura, resistencia a
información y sintetiza la • Microbiología, etc. • Introducción en un organismo
Proteína Recombinante. plagas y herbicidas. (procariota/eucariota)
Figura 1: Esquema de un proceso de producción de una
proteína recombinante
 EXPRESIÓN DE PROTEÍNAS
RECOMBINANTES

GENOTIPO AMBIENTE FENOTIPO

Gen Organismo Proteína

Construir un gen Seleccionar el Evaluar la
que exprese la organismo producción de la
proteína de adecuado para la proteína de
interés expresión del gen interés
 PLÁSMIDO – MAQUINARIA IN VITRO

EXPRESIÓN DE Sistemas muy sencillo, en la expresión de proteínas no hay

necesidad de utilizar ningún organismo.
Ventaja
PROTEÍNAS Los tiempos de ejecución son
relativamente cortos, lo cual
Desventaja
Trabaja con pequeñas cantidades
RECOMBINANTES permite producir muchas
proteínas diferentes
de proteína
simultáneamente
Plásmido Maquinaria in vitro
PLÁSMIDO - BACTERIAS
Plásmido Bacterias
La expresión de proteínas recombinantes en bacterias comprende el
Plásmido Levaduras sistema más simple y económico, tanto en escala de laboratorio
Virus Células de insecto como industrial.

Virus Células de mamíferos Ventaja Desventaja

*Permite la producción de *No ofrece modificaciones
grandes cantidades de proteína postraduccionales
en un periodo corto de tiempo *Acumulación de las proteínas
*Los protocolos de en cuerpos de inclusión 
transformación son sencillos  *Contaminación por proteasas
*Requiere condiciones de cultivo de la célula huésped 
simples  *Acumulación de endotoxinas
*Rápido crecimiento  
*Bajo coste 
 PLÁSMIDO - LEVADURAS VIRUS – CÉLULAS DE INSECTO
La expresión de proteínas recombinantes en levaduras comprende el Los baculovirus son virus que infectan principalmente lepidópteros,
sistema eucariota más simple y económico, tanto en escala de himenópteros y dípteros en su estadio larval. El virus presenta dos fenotipos a
lo largo de su ciclo de multiplicación multiplicación: Viriones Viriones
laboratorio como industrial.
Brotantes Brotantes y Viriones Viriones Ocluidos Ocluidos.
Ventaja Desventaja Desventaja
Ventaja
*Sistema de expresión eucariota *Hiperglicosilación de las *Proceso de *El proceso de clonación del gen de interés en el
bien definido y económico.  proteínas vector de baculovirus requiere mucho tiempo 
purificación
*Permite la expresión tanto de *Glicosilación diferente a las *El proceso de escalado requiere grandes
sencillo.
proteínas secretadas como células de mamífero  volúmenes de virus 
*Crecimiento
intracelulares  *Medio de cultivo costoso
relativamente
*Alto rendimiento *La glicosilación es diferente a la que se consigue
rápido
*Bajo tiempo de expresión 
Libre de en sistemas de mamífero (aunque más similar
*Requiere medios de cultivo que la que producen las levaduras)
endotoxinas.
simples

VIRUS – CÉLULAS DE MAMÍFEROS

Existen numerosos ejemplos de virus de mamíferos modificados para el desarrollo de sistemas de expresión de proteínas. Entre ellos se
pue den mencionar a Vaccinia y al Herpes virus. Estos patógenos han sido modificados para que no afecten la salud humana.
Ventaja Desventaja
*Ofrece todas las modificaciones postraduccionales  *Alto coste debido a que las células crecen muy despacio
*Correcto plegamiento de la proteína  • el medio de cultivo es caro y requiere suministro constante
*Libre de endotoxinas de CO2
•reactivos de transfección costosos
•Rendimiento relativamente bajo
•Mayor tiempo de producción