Avances recientes en biosensores basados en

la inhibición enzimática (2006-2014)

Nombres:
Giselle Barrios
Hanner Cantillo
María José Fábregas
 Inhibidores y biosensores

Los inhibidores enzimáticos,

como drogas y contaminantes,
están relacionado con la salud
humana y ambiental.

Los biosensores enzimáticos

son enzimas en contacto con
transductores y se basan en
la cuantificación del inhibidor.
 Avances en los biosensores

El primer biosensor enzimático se

diseño con colinesterasa por Guilbault
en 1962

Algunos de los avances más

recientes son:
• Nuevos enfoques para calcular
parámetros cinéticos
• Uso de nano materiales.
• Evaluación de los rendimientos
del biosensor en inhibición
reversible e irreversible.
 Diagnostico de inhibición

Existen dos tipos de inhibiciones, la

irreversible enlaces covalentes entre
en inhibidor y el sitio activo de la
enzima. La reversibles la enzima
puede recuperar su actividad
normal

  Para cuantificar la inhibición, se usa el

término "grado de inhibición”.
Además, el es la concentración de
inhibidor que causa el 50% de inhibición
y la constante de inhibición que mide
la afinidad de la enzima al inhibidor.
Método grafico para el diagnóstico del tipo
de inhibición

  [𝐼 ]
y=
¿¿
  [𝐼]
[ 𝐼 50 ]
𝑦=
[𝐼 ]
+1
[ 𝐼 50 ]

  Y versus , d comprende
valores de , se obtiene la
curva de hipérbolas
permitiendo estimar
fácilmente .
Biosensores basados ​en la inmovilización
enzimática directa en el dispositivo
transductor

La inmovilización de la enzima aumenta la

estabilidad del biosensor y reduce el
tiempo de análisis.

 
La inmovilización de la enzima se
acompaña de la modificación de
parámetros cinéticos como
Protocolo de medición empleado para la
inhibición reversible e irreversible
Se mide la actividad enzimática en
 
ausencia y en presencia de inhibidor.
El biosensor se lava con una Evaluación de la actividad enzimática
solución tampón, si la enzima
restaura la actividad inicial, entonces
la inhibición es reversible, de lo
contrario, la inhibición es
irreversible.
Cómo mejorar el rendimiento analítico en
caso de inhibición reversible o irreversible

• Tiempo de análisis
Se requieren tiempos de análisis largos
para los sensores de inhibición
irreversibles, se recomienda el uso de
sensores serigrafiados y para los
sensores de inhibición reversibles
combinarlos con el análisis de inyección
de flujo

El grosor de la membrana
enzimática también puede
desempeñar un papel en el tiempo
de análisis.
Cómo mejorar el rendimiento analítico en
caso de inhibición reversible

• Selectividad

Para eliminar la interferencia

electroquímica de otras especies, se
recomienda utilizar el método de
intercambio medio, en los biosensores de
inhibición irreversible

Para mejorar la selectividad de los

biosensores se puede utilizar una
matriz de electrodos enzimáticos en
combinación con el uso de métodos
quimiométricos