Universidad Nacional Autónoma de Chota

Facultad de Ciencias Agrarias

Ingeniería Forestal y Ambiental
Bioquímica Ambiental - Laboratorio
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PRÁCTICA N° 04
IDENTIFICACIÓN CUALITATIVA DE LÍPIDOS
I. INTRODUCCIÓN
Los lípidos (aceites fijos, grasas y ceras) son ésteres de ácidos grasos de cadena larga y
alcoholes o derivados íntimamente relacionados con ellos. La diferencia principal entre estas
sustancias radica en el tipo de alcohol, así tenemos que en los aceites fijos y las grasas, el
glicerol se combina con los ácidos grasos, mientras que en las ceras, el alcohol tiene un peso
molecular alto, como por ejemplo el alcohol cetílico.
Las grasas y aceites fijos se obtienen a partir de vegetales (aceites), o de animales (grasa de
cerdo, sebos), en los que constituyen sustancias de reserva altamente energética. Los aceites
fijos y las grasas son productos importantes que se utilizan en la industria alimentaria.
Una vez extraídos los aceites a partir de un vegetal, es necesario realizar algún tipo de ensayo
para asegurarse que efectivamente se lograron extraer aceites, para eso se emplean diferentes
pruebas entre ellas las reacciones cromáticas, las mismas que se basan en la coloración
obtenida luego que el aceite reaccione con ácidos fuertes.
El análisis químico de las grasas, es necesario; ya que sabiendo los resultados de estas pruebas,
se pueden establecer las propiedades que tendrá el lípido en estudio. En el análisis de rutina las
determinaciones de los índices de yodo, saponificación, acidez, ésteres; son suficientes para
confirmar la identidad y asegurar un uso interno inofensivo de la mayoría de grasas y aceites.
II. OBJETIVOS.
Interpretar las reacciones de coloración de una sustancia grasa a analizar.
Verificar la pureza y calidad de los lípidos mediante la determinación química.
Interpretar los resultados obtenidos de las constantes químicas de los aceites.
Resolver problemas sobre índice de acidez, ésteres, yodo.
III. MATERIALES Y REACTIVOS.
Materiales
 Tubos de ensayo y gradilla
 Vasos de precipitación
 Agitadores de vidrio
 Papel de filtro
 Cápsula de porcelana
 Balanza analítica

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 Cocina eléctrica
 Extractor soxhlet
 Rejilla de asbesto
 Matraces erlenmeyer
 Arena lavada
 Buretas
 Pipetas de 1, 5 y 10 mL
 Bombillas
 1 matraz con tapa
 Refrigerante a reflujo
 Agitador magnético
Reactivos
 Ácidos sulfúrico q.p.
 Acido nítrico q.p.
 Hidróxido de potasio o,1N.
 Sol., alcohólica de hidróxido de potasio 0,5 N.
 Ácido clorhídrico 0,5 N
 Mezcla cloro-yodo (soluciones alcohólicas de bicloruro de mercurio y yodo en partes
iguales (6%), mezcladas 48 horas antes de la determinación).
 Sol., alcohólica de fenolftaleína 1%
 Alcohol: éter (1:1)
 Cloroformo 200 mL
 Sol., de yoduro de potasio 10%
 Sol., de tiosulfato de sodio 0,1N
 Sol., Indicador de engrudo de almidón 1%.
Material que debe traer el estudiante
 20 g de semilla que pueda contener grasas
 Diferentes tipos de aceites: ricino, oliva, almendra, coco, cocina
 Thiner

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IV. PROCEDIMIENTO.
4.1. Extracción de lípidos
 Pesar con exactitud 10 g de sustancia triturada
 Colocar en una cápsula de porcelana y mezclar con c.s de arena lavada y purificada.
 Mezclar hasta aspecto homogéneo y verter en un cartucho de papel de filtro previamente
preparado.
 Arreglar el cartucho convenientemente, colocarlo en el extractor soxhlet y extraer la
sustancia grasa empleando cloroformo (thiner) como disolvente.
 Pesar el residuo obtenido y determinar el porcentaje de sustancia grasa en la muestra
empleada.
4.2. Reacciones cromáticas de identificación:
Reacción de Heydenreich.
 Colocar 5 mL de ácido sulfúrico o HCl q.p., en un tubo de ensayo
 Dejar caer I – II gotas de aceite a analizar
 En la zona de contacto se observará:
o Con aceites secantes. Coloración castaña oscura y formación de película
densa.
o Con aceites semisecantes. Coloración amarilla o castaña clara.
o Con aceites no secantes. No se observará color alguno, excepto con
aceite de oliva el mismo que presenta ligera coloración verdosa.
Reacción de Eauchecorne.
 Colocar en un tubo de ensayo 2 mL de aceite a investigar y 1 mL de ácido
nítrico 2 x 1 (2 mL de ácido nítrico q.p. más 1 mL de agua destilada)
 Agitar durante algunos minutos
 Llevar a baño maria durante 20 minutos.
 Transcurrido este tiempo se observará
o Con aceites secantes. Coloración rojo castaño.
o Con aceites semisecantes. Coloración anaranjada.
o Con aceites no secantes. No se observará color alguno.

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Reacción de Sudan III. Tinción. Los lípidos se colorean selectivamente de

rojo – anaranjado con el colorante Sudán III.
Disponer en una gradilla 1 tubo de ensayo colocando 2 ml de aceite añadir a 4 –
5 gotas de solución alcohólica de Sudán III, agitar y dejar reposar. Observar los
resultados.
Reacción de saponificación
Colocar en un tubo de ensayo 2 ml de aceite y 2 ml de NaOH al 20%
Agitar enérgicamente y colocar el tubo al baño maría de 20 a 30 minutos.
Pasado este tiempo, se pueden observar en el tubo 3 fases: una inferior clara que
contiene la solución de sosa sobrante junto con la glicerina formada, otra intermedia
semisólida que es el jabón formado y una superior de aceite inalterado.
Solubilidad
Agregar 2 ml de aceite en dos tubos de ensayo
Añadir a uno de ellos 2 ml de agua y al otro 2 ml de éter u otro disolvente orgánico.
Agitar fuertemente ambos tubos y dejar reposar
Observar los resultados

Investigar:
1. Métodos con su respectivo procedimiento para identificar lípidos en plantas y
muestras de suelos

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