“ESTABLECIMIENTO DE CULTIVOS IN VITRO A PARTIR DE SEMILLAS O DE MATERIAL DE CAMPO

PRÁCTICA DE GERMINACIÓN Y DORMICIÓN DE SEMILLAS”

S O DE MATERIAL DE CAMPO

Este tipo de cultivo in vitro es un tipo de cultivo de plantas o explantes en recipientes con un medio
nutritivo en condiciones asépticas, se debe llegar a tener la obtención de plantas fuera de virus,
micropropagación de plantas a gran escala, rescate de embriones, etc.

Para poder realizar un buen cultivo in vitro tenemos que desinfectar muy bien el material, una
esterilización correcta del material no permitirá el crecimiento de hongos, etc, los cuales perjudican
nuestras muestras. Nuestros materiales serán semillas de tomate y brotes de plantas de pimiento.
Colocaremos nuestras semillas en una malla y la cerraremos con una liga luego la desinfectamos con
NaClO al 30% utilizando un legía de 40 g de cloro activo por litro, en esta solución introducimos las
semillas por 10 min moviendo cada 3min. Preparamos 3 botes estériles con agua destilada para poder
enjuagar las semillas cada 5min en cada bote, luego sacamos las semillas y la colocamos en una placa
petri con ayuda de las pinzas. Finalmente dejamos la placa petri en la cámara de cultivo.

En el material de campo descartamos las hojas más grandes y procedemos el mismo procedimiento de las
semillas de tomate, pero le añadimos unas gotitas de detergente. Luego de 10min colocamos el material
en una solución más fuerte de legía a un 40% y luego la enjuagamos con agua destilada. Eliminamos la
parte basal, con la pinza nos ayudamos a introducir los brotes en los tubos de ensayo con medio de
cultivo.

El tipo de desinfectante, la concentración y el tiempo en el que el material está en contacto con el

producto tiene que determinarse con el fin de obtener una correcta desinfección sin dañar el producto.

PRÁCTICA DE GERMINACIÓN Y DORMICIÓN DE SEMILLAS

Muchas semillas son viables pero a veces se encuentran en un estado de dormición. Para que estas
semillas puedan dejar su estado de dormición se practica la técnica de escarificación dependiendo las
cubiertas seminales.

Técnica de escarificación mediante corte de alicate:

 Escarificamos 25 semillas de altramuz con alicates cortando en la zona opuesta de la radícula y usamos
otras 25 semillas sin escarificar.
 Luego usamos 2 placas Petri. Una será usada para las semillas escarificadas y otra placa petri para las
no escarificadas.
 Colocamos un papel filtro humedecido con agua destilada en cada placa petri y colocamos las semillas
escarificadas y no escarificadas en sus respectivas placas.
 Luego introducimos las placas petri a la cámara de incubación a 25°C. Luego de las 24h retiramos las
placas y observamos si absorbieron agua y las volvemos a la incubadora.
 Luego de 3 días sacamos las placas petri y se observa que en las semillas escarificadas se obtuvo una
germinación del 80% mientras que las no escarificadas obtuvieron una germinación del 20%.