Colegio de Estudios Científicos y

Tecnológicos del Estado de

Veracruz
Nombre de los integrantes:

• Sol Yamileth Melgarejo López.

• Arturo Manuel Castro.
• Elías Adriel Aguilar Manzanilla.
• Isaac Sosa Ortiz.
• .Jair Sánchez Quiñonez
• .Loreidy Gabriela Trujillo Duarte.
• Hanna Rossini Davalos
• Mar de los Ángeles Espinoza Ramirez
• Rubén Martínez castellanos
Preparación y esterilización de material de vidrio
• Lavar material con detergente líquido, enjuagar con
abundante agua de la llave y al final con agua destilada.

• Secar el material de vidrio de preferencia en horno, si no es

posible secar al aire.

• En las pipetas poner un filtro de algodón en la boquilla y

envolver con papel Kraft.

• Envolver las cajas de Petri y pipetas de acuerdo a las

indicaciones del profesor.

• Introducir los hisopos en un tubo y tapar con algodón.

• Identificar con nombre y marcar el volumen en el papel de

las pipetas.

• Envolver el equipo Millipore para esterilizar según las

instrucciones del profesor.

• Introducir el material a un horno previamente calentado a

180°C, esperar a que la temperatura se estabilice
nuevamente y a partir de este momento dejar 1 hora.

• De no ser posible emplear el horno, se puede esterilizar el

material de vidrio en autoclave
 Preparación de medios de cultivo.

• Los medios de cultivo se vacían en las cajas de Petri

(aproximadamente 25-30 mL) en zona aséptica cerca del
mechero o en campana de flujo laminar.

• Lavarse las manos y utilizar guantes para recoger la

muestra

• Es necesario, en los alimentos no envasados, tomar la

cantidad necesaria hasta alcanzar un mínimo de 200 gr o
200 ml.

• Aquellos previamente envasados habrá que comprobar la

cantidad incluida en el envase para comprobar que es
suficiente. En caso contrario, debe coger tantos envases
como muestra sean necesarios.

• Si los envases son muy grandes o difíciles de transportar

se abrirán utilizando utensilios estériles y se tomará la
muestra del producto de forma que sea lo más
representativa posible y lleve todos los ingredientes de
que se compone. Esta muestra se pasará a un recipiente
más pequeño.
• En los alimentos a granel se desechan las capas
superficiales del mismo. La muestra debe obtenerse del
centro del producto.
• Si el producto tiene salida por un conducto se desechan
las primeras porciones.

• Si es líquido se agita el envase y se pasa a recipientes

estériles.

Siembra del cereal

• Las etapas de la siembra del cereal son las siguientes:

• Elección de las semillas desde el punto de vista genético

(variedad) como agronómico (pureza, germinación). Las
semillas de cebada, avena, centeno y trigo pueden recibir
una desinfección previa. Es recomendable no confiar la
cosecha a una sola variedad, pero tampoco cultivar
demasiadas.

• La siembra se realiza entre octubre y noviembre para

cultivos de invierno que requieren mucha humedad;
mientras que, para el resto de cultivos, la época de
siembra es la primavera.
• Si la siembra es mecanizada, se emplea una sembradora,
que distribuye los granos en filas paralelas y no muy
separadas. La ventaja de la maquinaria consiste en que
las introduce a una profundidad regular predeterminada.
Son necesarios alrededor de dos quintales de semillas por
una hectárea.
•
• La profundidad de siembra del cereal oscila entre los 2 y
los 5 cm. El estándar es de 3-4 cm, que puede aumentarse
a 4-5 cm como máximo en el caso de suelos sueltos y
secos; o reducirse a 2-3 cm en suelos húmedos o
arcillosos. Introducir las semillas demasiado profundas es
un grave error, pues nacen plantas que luchan por
emerger con un crecimiento reducido y un desarrollo
limitado de hojas o raíces.

• El período óptimo de siembra es el que ofrece la máxima

garantía de que, a la llegada del frío invernal, las plántulas
del cereal de invierno han alcanzado, sin excederla, la
etapa de crecimiento de 3 hojas.

• La siembra por estría permite aislar las bacterias que dan

lugar a colonias separadas y posteriormente, transfiriendo
una sola colonia a un medio nuevo, se permite el
desarrollo de un cultivo puro bacteriano

• Encendemos la luz del microscopio (la encontrarás a un

lado). Posicionamos la muestra que pretendemos observar
y la fijamos con las pinzas que hay sobre la bandeja de
 colocación. La muestra debe colocarse en el centro de
manera que la luz pase a través de ella.

REALIZACIÓN DEL FROTIS

• Colocar una pequeña gota de agua en el centro de un

portaobjetos limpio. Es necesaria muy poca cantidad de
agua, por lo que se puede usar el asa de siembra, ya que
en el extremo curvo de su filamento queda retenida una
mínima gota de agua, que resulta suficiente.

• Flamear el asa de siembra, tomar, en condiciones

asépticas, una pequeña cantidad del cultivo bacteriano en
medio sólido y transferirlo a la gota de agua. Remover la
mezcla con el asa de siembra hasta formar una
suspensión homogénea que quede bastante extendida
para facilitar su secado.

•
• Si la muestra se toma de un cultivo en medio líquido, no es
necesario realizar los dos primeros pasos ya que basta
con colocar y extender una gota de la suspensión
bacteriana, que se toma con el asa de siembra,
directamente sobre el portaobjetos.

• Esperar hasta que el líquido se evapore o acelerar su

evaporación acercando el porta a la llama del mechero. En
 este caso hay que tener mucha precaución de no calentar
demasiado el porta pues las células pueden deformarse o
romperse.

¿Cómo se hace la tinción de Gram?

• El proceso es muy sencillo, y los pasos a seguir serían:

• Recoger la muestra de bacterias a estudio mediante un

isopo (bastón estéril de algodón).

• Extender dicha muestra sobre un portaobjetos y dejarla

secar.

• Fijar la muestra mediante un alcohol (metanol).

• Aplicar el tinte de violeta de genciana sobre el

portaobjetos y esperar un minuto.

• Enjuagar la muestra con agua y aplicar un fijador del

violeta de genciana (lugol). El lugol y el violeta de
genciana forman un complejo insoluble en agua capaz de
penetrar en la pared de las células bacterianas.

• Lavar de nuevo el portaobjetos con una mezcla de alcohol

y acetona durante unos segundos.
• Opcionalmente se puede añadir una tinción de safranina o
fucsina para distinguir las gram negativas que aparecerán
bajo el microscopio (en lugar de incoloras) con un tono
rosado o rojo. Lavar con agua.

• Ya se puede observar la muestra al microscopio donde se

visualizarán de color violeta las gram positivas y de color
rosa-rojizo las gram negativas.

• Observación microscópica para diagnóstico de

enfermedades. Se hará una observación comparativa entre
muestras sanas y patológicas. De este modo, el alumnado
se percatará de los signos de procesos patológicos a nivel
celular y tisular, con ejemplos concretos (tumores).

• La mayoría de las bacterias se presentan en una de estas

tres formas básicas: cocos, bacilos y espirilos.

• Se coloca un cubreobjetos (flameado) sobre el medio

inoculado con hongo. Se añaden 1-2 ml de agua glicerina
da estéril en el fondo de la placa para mantener la
humedad en cámara. Se cierra la placa de Petri y se lleva
a incubar a temperatura ambiente.

• El análisis bioquímico es un análisis de sangre que mide

los niveles de varias sustancias en la sangre (por ejemplo,
electrolitos). El análisis bioquímico informa a su médico
 sobre su estado de salud general, y ayuda a buscar ciertos
problemas y averiguar si un tratamiento para un problema
específico está funcionando.

• Algunos análisis bioquímicos detectan más sustancias en

la sangre que otros. La forma más completa de un análisis
bioquímico (llamado chem-20, SMA-20 o SMAC-20) detecta
20 cosas diferentes en la sangre. Otros tipos de análisis
bioquímicos (por ejemplo, SMA-6, SMA-7 o SMA-12)
detectan menos. El tipo de análisis bioquímico que le
hagan dependerá de la información que esté buscando su
médico.

• Se puede esterilizar por calor seco en estufas a más de

160 °C durante media hora, o por calor húmedo en
autoclaves a 120 °C durante 20 minutos y a presión
superior a la atmosférica.
• EVIDENCIAFOTOGRAFICA.
 CONCLUSION

Salió bien y gracias a este procedimiento

que fue largo pero valió la pena para poder
saber cómo se hace una caja de cultivo,
como se estiliza, como crecer y su
observación microbiológica.