PRÁCTICA # 3

GERMINACIÓN DE PLNTA MADRE Y CRECIMIENTO CONTROLADO

OBJETIVO
El objetivo de esta práctica es desarrollar la germinación y crecimiento controlado
manteniendo las condiciones idóneas de crecimiento de la planta para su posterior
trabajo in vitro.

HIPOTESIS
El crecimiento de la planta madre depende de las condiciones medioambientales
generadas en el laboratorio.

INTRODUCCIÓN

La germinación de las semillas tiene lugar cuando se dan determinadas

condiciones. En general, es necesario:
• Que la semilla sea viable, es decir, que el embrión esté vivo y sea capaz de
germinar.
• Que la semilla no esté en estado de latencia.
• Que se den las condiciones favorables, como son: la disponibilidad de un
sustrato con pH, textura, estructura y humedad apropiada, suficiente
capacidad de oxígeno que permita la respiración aerobia y una temperatura
adecuada para que puedan desarrollarse todos los procesos metabólicos
necesarios para el desarrollo de la plántula. (Infoagro)

Estado fisiológico de la planta donante

Es de gran influencia en la respuesta de los tejidos en cultivo, reportándose

diferencias en los requerimientos nutricionales y hormonales cuando los tejidos
provienen de plantas con diferente edad fisiológica (Villalobos y Thorpe, 1991).
Generalmente, se utilizan plantas en estado de crecimiento activo: vigoroso y
sano.

Precisamente para uniformar el estado fisiológico de las plantas donantes, o sea

de los explantes, es que se incluyen en esta etapa una serie de pretratamientos:
- La selección y crecimiento de la planta madre bajo condiciones higiénicas
reduce notablemente los contaminantes, principalmente fúngicos. La mayor
fuente de contaminación primaria en los cultivos in vitro provienen de la planta
madre. Si se logra establecer un explante axénico, la contaminación posterior
será debida a fallas en la técnica o procedimiento. Es por esta razón que siempre
es más recomendable diagnosticar y tratar las plantas donantes, donde es
mucho más fácil detectar los contaminantes.

- Crecimiento de las plantas en ambientes controlados: el impacto de la fase 0

no está limitado solamente al aspecto sanitario de los explantes sino también a
 la supervivencia de los mismos. Una práctica común para uniformar el estado
fisiológico de los explantes es cultivar las plantas donantes en ambientes
controlados (luz, temperatura y humedad relativa) con niveles óptimos para cada
especie en particular.

MATERIALES Y REACTIVOS

• 5 vasos de precipitado de 100 mL

• 5 papel filtro
• 3 Pipetas graduada 10 mL
• 1 Espatula
• 1 propipeta de 3 vias.
• 1 Piseta
• 1 Probeta de cristal 100 ML
• 1 Gotero
• 5 bolsas de polipropileno de ½ transparentes
• 1 atomizador con agua destilada
• 1 pinzas de metal
• 2 pinzas de disección simple.
• 5 bolsas ziploc mediana a grande
• Incubadora (Cámara bioclimática a 25◦C, con 12 h oscuridad y 8 h luz, con
ventiladores y una HR de 50 %)

Reactivos
• Semillas de rabano
• Semilla de pepino
• Semilla de zanahoria
• Lechuga
• Maiz
• ZnO o Fe2O3
• Solución de hipoclorito a 200 ppm

PROCEDIMIENTO
Primer parte
1. Poner las 10 semillas de un vegetal en una caja petri con una solución,
200 ppm lavar durannte 5 minutos manteniendo en un vaso de precipitado,
retirar y lavar con abundante agua destialda.
2. Poner las 5 semillas de un vegetal en una vaso de precipitado utilizando
como base un papel filtro, agregar 30 mL de una solución de Oxido de zinc y
 5 semillas en otro vaso de precipitado con oxido de hierro III a 200 ppm
durante 20 horas.
3. Repetir este procedimiento para las 5 especies de semillas.

Segunda Parte

4. En una capa de pape estraza, poner en el centro separado cada de 5 a 7 cm

aproximadamente una de otra semilla.
5. Poner una capa de de papel estraza cubriendo las semillas y comenzar a
enrollar como si fuera un taco, cuidadndo no se mievan las semillas.
6. Llevar a un bolsa con cierre hermético a un ambiete controlado.
7. Repetir este procedimiento para las 5 especies de semillas.
8. Mantener en humedad y condiciones durante los proximos 25 días, llevando
un registro de humeda, temperatura y crecimiento, desarrollo de organos de
la planta. Para la toma de crecimiento, con ayuda de una regla medir el
tamaño.

Cuestioanario
1. ¿Investiga el crecimiento de cada una de las semillas según su especie en el
transcurso del tiempo?
2. ¿Dibuja el crecimiento de una de las plantas día a día durante 5 días despues
de identificar germinación tu eliges que semila?

REFERENCIAS:
Garcia, J., Ruiz, N., Lira, L., Vera, I., Mendez, B. (2016) Técnicas para evaluar la
germinación, vigor y calidad de semillas sometidas a dosis de nanoparticulas.
Extraido de:
https://ciqa.repositorioinstitucional.mx/jspui/bitstream/1025/334/1/Técnicas%20Par
a%20Evaluar%20Germinación%2C%20Vigor%20y%20Calidad%20Fisiológica%20
de%20Semillas%20Sometidas%20a%20Dosis%20de%20Nanopart%C3%ADculas
.pdf

El proceso de la germinación de semillas. Conceptos y tipos de germinación.

(s. f.). https://www.infoagro.com/documentos/el_proceso_germinacion_semillas__c
onceptos_y_tipos_germinacion.asp