DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE GLUCOSA EN SUERO A TRAVÉS DE

ESPECTROFOTOMETRÍA
Pablo Emilio Cruz
Johan Alexander Nagles
Daniela Ayala Carvajal

Objetivos
● Cuantificar por espectrofotometría visible la glucosa en suero bovino o en una
muestra patrón o muestra problema
● Identificar para la muestra problema la evidencia de estado hipoglicemico ó
diabetico.

Resultados

absorbancia 500.0 nm concentración

0,032 142,2 mg/dc

0,652 99,84 mg/dc

Error de absorbancia: ±0,005 fotometría

Longitud de onda: ±0,5 nm.
<0.00025 at 0.0 A; <0.001 A at 0.0 A <0.00050 at 1.0 A. ruido en la medición de la
absorbancia.

El espectrofotómetro es un artefacto que se basa en la cantidad de luz que absorbe una

solución llamado absorbancia, se depositan las muestras en unas celdas translúcidas y se
hace incidir luz visible sobre estas, donde comparan la medición de las muestras con una
muestra en blanco, generalmente funcionan de 190 nm a 1100 nm siendo el límite de
detección que posee.

reacciones de identificación de compuesto

● glucosa

+ O2+glucosa oxidasa → +H2O2

+2H2O+ + → quinoneimina+ 4H2O

● triglicéridos
triglicéridos + lipasa→ ácido grasos+glicerol+H2O
glicerol+atp→glicerol 1-fosfato+ADP+O2→DAP+H2O2

2H2O+ + → quinoneimina+4H2O

La coloración se debe en el caso de los triglicéridos a la reacción que sufren los triglicéridos
con la oxidasa en glicerol donde al producir peróxido va a generar con la 4 aminoantipirina y
el fenol una coloración rojiza que proviene de la quinoneimina que se absorbe a 520 nm
aproximadamente, en este caso se absorbe a 500 nm y se puede observar una coloración
rojiza que depende de la cantidad de patrón que se haya aplicado a la solución en el tubo
de ensayo.
en la glucosa sucede algo similar sin embargo al reaccionar con la glucosa oxidasa se va a
oxidar y va a formar ácido glucónico que va a ponerse a reaccionar con la peroxidasa y el
peróxido que se forma después de la reacción se forma un compuesto de quinoneimina que
indica la presencia o de glucosa excesiva en suero o de triglicéridos que reaccionan con
estos compuestos formando un compuesto rojizo.

conclusiones
● se logró identificar la reacción de los triglicéridos y glucosa en una muestra
problema y una muestra que se tenía en tubos de ensayo.
● Al calentar o incubar se pudo identificar que la temperatura es fundamental para
permitir la identificación de estos compuesto y que gran parte de estas reacciones
son termo dependientes de forma que en el cuerpo actúan permitiendo identificar
estos productos.
● Se determino como los procesos de identificación de triglicéridos e hipoglucemia se
basan en una coloración que generan los compuestos que reaccionan determinando
el papel de las enzimas en el proceso de degradación e identificación del
compuesto.

tomado de:
● http://www.xerion.com.co/assets/trigliceridos-idg.pdf
● https://tools.thermofisher.com/content/sfs/brochures/BR51776E-0113M-GENESYS-
10S-Brochure-L.pdf
● Análisis químico cuantitativo, daniel harris, editorial reverté , pp 400-409, México DF.