ACTIVIDAD MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS

A. Morfología macroscópica de las colonias

COLONIAS ROJAS EN AGAR SS

COMPOSICIÓN DEL AGAR

 Peptona pancreática de carne

 Extracto de carne
 Sales biliares
 Citrato sódico
 Tiosulfato sódico
 Citrato férrico amoniacal
 Lactosa
 Rojo neutro
 Verde brillante
 Agar-agar

Este medio es utilizado para realizar el aislamiento de bacterias enteropatógenas de los géneros
salmonella y shigella, los análisis son realizados en muestras de heces diarreicas, agua
contaminada y alimentos, ya que en el diseño experimental, y después de incubar la muestra en el
agar ss. Con los parámetros necesarios de temperatura y tiempo para el desarrollo de los
microorganismos se encontraron los siguientes resultados:

ya que este medio es de tonalidad ámbar y como se puede observar en la imagen

hay formación de colonias rosadas o rojizas y esta coloración se presenta debido a
la fermentación de la lactosa presente en el medio, sin embargo cabe destacar que
microorganismos como la salmonella o la shigella no son capaces de fermentar
este carbohidrato por lo tanto podemos decir que en el medio hay presencia de
colonias de escherichia coli ya que esta si fermenta la lactosa produciendo la
coloración observada en el medio
COLONIAS TRANSLUCIDAS CON EL CENTRO NEGRO (OJO DE PEZ) EN AGAR SS

Como se mencionó anteriormente este agar es un medio

selectivo el cual permite diferenciar diferente tipos de
enterobacterias los cuales se pueden identificar debido a las
características que presentan después de la incubación en el
agar, la formación de colonias translucidas en la periferia con
centro negro en el agar ss nos indica la presencia de salmonella
debido a la formación de sulfuro de hidrogeno lo que le da la
tonalidad negra a las colonias formadas.

COLONIAS NEGRAS LUSTROSAS EN AGAR BISMUTO SULFITO

COMPOSICIÓN DEL AGAR

 Peptona
 Extracto de carne
 Glucosa como fuente de energía

Este medio es utilizado para la identificación de

enterobacterias sin embargo este es selectivo para
salmonella entérica subgrupo entérica serotipo tiphy,
adicionalmente contiene compuestos que inhiben el
crecimiento de bacterias Gram positivos, la tonalidad del
medio originalmente es de un tono verde manzana, la
tonalidad original del medio puede cambiar a un negro
lustroso debido a la capacidad del microorganismo de
producir sulfuro de hidrogeno el cual reacciona
produciendo una sal haloidea sulfuro ferroso
COLONIAS TONALIDAD FUCSIA CREMOSAS EN AGAR EMB

COMPOSICIÓN DEL AGAR

 Peptona
 Lactosa
 Sacarosa
 Fosfato dipotásico
 Eosina
 Azul de metileno
 agar

el agar eosina azul de metileno favorece el crecimiento de bacterias Gram negativas e inhiben las
bacterias Gram positivas, los componentes del agar eosina y azul de metileno tienen la
característica de formar precipitados los cuales se pueden observar por cambios en la coloración
del medio, aquellos microorganismos que fermentan la lactosa presente en el agar acidifican el
medio lo que produce una coloración oscura verde brillante y aquellos que son fermentan muy
poco la lactosa producen colonias de color purpura klebsiella, enterobacter y serratia y aquellos
microorganismos que obtienen su fuente de alimento a partir de la proteína en este caso la
peptona producen colonias transparentes como lo son: salmonella y shigella.

B. DESCRIBIR LA TECNICA DE COLORACIÓN DE REFERENCIA Y SU INTERPRETACIÓN

MICROSCOPICA

Hans Christian Gram fue un bacteriólogo danés quien invento el método de tinción el cual fue
nombrado en su honor, esta tinción es realizada en todos los tipos de bacterias y se efectua
con cristal violeta o violeta de genciana y posteriormente se realiza una decoloración del
microorganismo con alcohol acetona, esta decoloración se presenta en los microorganismos
Gram negativos, mientras que los Gram positivos no presentan cambios en la coloración.

Con el uso de un colorante de contraste como lo es la fucsina o safranina se pueden visualizar

las bacterias Gram negativas de color rojo o rosa y las Gram positivas de color azul-violáceo, la
diferencia entre ambos tipos de bacterias, radica en la pared celular de las mismas ya que en
las bacterias Gram positivas existe una capa gruesa de peptidoglucano, a diferencia de las
Gram negativas donde esta capa es muy delgada y adicionalmente está compuesta por
lipopolisacárido el cual genera endotoxinas responsables del papel patogénico de algunos de
estos microorganismos.

El cristal violeta tiene afinidad con el peptidoglucano de la pared bacteriana, el uso de lugol
actúa como mordiente e impide la salida del cristal violeta por la formación de un complejo
cristal violeta-yodo que satura los espacios del peptidoglicano de la pared bacteriana. En
seguida se coloca una mezcla de alcohol-acetona, la cual deshidrata la pared bacteriana y
cierra los poros de la misma, también destruye la membrana externa de las bacterias Gram
negativas debido a que esta es soluble a la acción de solventes orgánicos, como la mezcla de
alcohol-acetona. Las bacterias Gram positivas al contener una gran cantidad de
peptidoglicano, retienen con mayor fuerza este complejo.

BIBLIOGRAFÍA

 Investigación en discapacidad “las tinciones básicas en el laboratorio de

microbiología” Luis Esaú López-Jácome, Melissa Hernández-Durán, Claudia Adriana
Colín-Castro, Silvestre Ortega-Peña, Guillermo Cerón-González, Rafael Franco-
Cendejas (2014)