LABORATORIO ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

AUTORES:

ANGELICA MARIA PINZON PUERTA

ESTEBIN PATERNINA VELAZQUES

DOCENTE:

MARTA CELINA VERGARA MARTINEZ

UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA CR 6 NO. 77-305

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTÉCNICA

“ACUICULTURA PRIMER SEMESTRE G2”

MONTERÍA- CÓRDOBA

2020
 INTRODUCCION

En este informe encontraremos desde el concepto básico de las enzimas

hasta como experimentar con ellas. Teniendo en cuenta lo dicho

anteriormente es necesario recalcar que el concepto básico será necesario

para proceder a todo lo que es la experimentación con estas enzimas. Cada

uno de los experimentos será realizado de manera que de por finalidad unos

buenos resultados o más bien los resultados que se desean.

 OBJETIVOS GENERALES

° Reconocer: El efecto actividad enzimática, para reconocer su

importancia en el proceso de sus distintas aplicaciones.

° Determinar: Los resultados que se dan y así llegar a grandes

conclusiones y mucha experimentación con los materiales y todo tipo de

hipótesis que presente el resultado.

° Aplicar: Todos los conocimientos obtenidos mediante la

experimentación y obtención de resultados.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

° Expandir: El conocimiento y la práctica sobre lo que son las enzimas y

sus múltiples maneras de aplicarlas y experimentar con ellas.

° Plantear: Nuestras observaciones y análisis científico que se logra

obtener ´por estos experimentos.

 FUNDAMENTO TEORICO

Las enzimas son moléculas orgánicas que actúan como catalizadores de

reacciones químicas, es decir, aceleran la velocidad de reacción.

Comúnmente son de naturaleza proteica, pero también de ARN. Las enzimas

modifican la velocidad de reacción, sin afectar el equilibrio de la misma, ya

que una enzima hace que una reacción química transcurra a mayor

velocidad, siempre y cuando sea energéticamente posible. En estas

reacciones, las enzimas actúan sobre unas moléculas denominadas sustratos,

las cuales se convierten en moléculas diferentes denominadas productos.

Casi todos los procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran a

unas tasas significativas. A las reacciones mediadas por enzimas se las

denomina reacciones enzimáticas.

Debido a que las enzimas son extremadamente selectivas con sus

sustratos y su velocidad crece solo con algunas reacciones, el conjunto (set)

de enzimas presentes en una célula determina el tipo de metabolismo que

tiene esa célula. A su vez, esta presencia depende de la regulación de la

expresión génica correspondiente a la enzima.

Como todos los catalizadores, las enzimas funcionan disminuyendo la

energía de activación (ΔG‡) de una reacción, de forma que la presencia de la

enzima acelera sustancialmente la tasa de reacción. Las enzimas no alteran el

balance energético de las reacciones en que intervienen, ni modifican, por lo

tanto, el equilibrio de la reacción, pero consiguen acelerar el proceso incluso

en escalas de millones de veces. Una reacción que se produce bajo el control

de una enzima, o de un catalizador en general, alcanza el equilibrio mucho

más deprisa que la correspondiente reacción no catalizada.

Al igual que ocurre con otros catalizadores, las enzimas no son

consumidas en las reacciones que catalizan, ni alteran su equilibrio químico.

Sin embargo, las enzimas difieren de otros catalizadores por ser más

específicas. La gran diversidad de enzimas existentes catalizan alrededor de

4000 reacciones bioquímicas distintas. No todos los catalizadores

bioquímicos son proteínas, pues algunas moléculas de ARN son capaces de

catalizar reacciones (como la subunidad 16S de los ribosomas en la que

reside la actividad peptidil transferasa).También cabe nombrar unas

moléculas sintéticas denominadas enzimas artificiales capaces de catalizar

reacciones químicas como las enzimas clásicas.

La actividad de las enzimas puede ser afectada por otras moléculas. Los

inhibidores enzimáticos son moléculas que disminuyen o impiden la

actividad de las enzimas, mientras que los activadores son moléculas que

incrementan dicha actividad. Asimismo, gran cantidad de enzimas requieren

de cofactores para su actividad. Muchas drogas o fármacos son moléculas

inhibidoras. Igualmente, la actividad es afectada por la temperatura, el pH, la

concentración de la propia enzima y del sustrato, y otros factores físico-

químicos.
 Muchas enzimas son usadas comercialmente, por ejemplo, en la síntesis

de antibióticos o de productos domésticos de limpieza. Además, son

ampliamente utilizadas en diversos procesos industriales, como son la

fabricación de alimentos, distinción de vaqueros o producción de

biocombustibles.
 PROCEDIMIENTOS

1. Presencia de catalasa en tejidos animales y vegetales: la catalasa es una

enzima que actúa sobre el peróxido de hidrógeno (H2O2 agua oxigenada)

descomponiéndolo en H2 O y O2, con desprendimiento de energía en forma

de calor. Esta enzima está presente en todos los tejidos animales y vegetales.

En esta práctica realizaremos una desnaturalización mediante una elevación

de la temperatura.

MATERIALES:

Cuatro frascos de vidrio

Zanahoria, hígado

Peróxido de hidrógeno (agua oxigenada)

PROCEDIMIENTO

Presencia de catalasa en tejidos animales y vegetales

• Toma la zanahoria y corta dos trocitos aproximadamente iguales.

• Toma el hígado y prepara dos trozos del mismo tamaño.

• Introduce cada muestra en un frasco de vidrio.

• Vierte unos 5cc de agua corriente en cada uno de los cuatro frascos de

vidrio.

• De los cuatro frascos que tienes, toma uno que contenga zanahoria y

otro con hígado. Hierve durante 6-8 minutos. Pasado este tiempo retira el

agua.

• Echa peróxido de hidrógeno en los cuatro tubos.

 • Observa los resultados y anota en la tabla siguiente si la reacción es

positiva (+) o negativa (-):

Reacción con
H2O2
Hígado Hervido Negativo (-)
Hígado sin hervir Positivo (+)
Zanahoria hervida Negativo (-)
Zanahoria sin Positivo (+)
hervir
MEZCLA FINAL

¿Qué tejidos presentan desprendimiento de oxígeno?

Los tejidos que presentan desprendimiento de oxigeno son los del hígado

sin hervir y la zanahoria sin hervir, se presenta una reacción de burbujas en

ellas.

¿Cuál de los tejidos presenta mayor actividad?

El del hígado sin hervir, muestra una mayor reacciona al momento de

almacenar Peróxido de Hidrogeno.

¿Por qué la reacción es negativa cuando cocemos las muestras?

Porque al momento de colocar a hervir las muestras, esta pierde el

oxígeno que se encuentra en ella y el agua, ya que el desprendimiento del

oxígeno dependerá de la mayor cantidad que se encuentre de este en la

muestra.
 Frecuentemente utilizamos agua oxigenada como antiséptico y se observa

que al aplicarla a una herida se produce un burbujeo, ¿qué está ocurriendo?

¿Por qué se utiliza el agua oxigenada como antiséptico?

Porque al momento de aplicar el agua oxigenada destruye las bacterias

que se encuentren en la herida, ya que las bacterias no pueden vivir con el

oxígeno, estas son anaerobias. Principalmente se utiliza como antiséptico por

su inmediata efectividad de limpieza y desifectación.

2. Presencia de polifenol oxidasa de manzana

MATERIALES:

Pastilla de vitamina c (Redoxón)

Manzana

PROCEDIMIENTO

1. Moler una pastilla de vitamina C hasta que quede un polvo fino -

Cortar una manzana

Por la mitad.

2. Colocar en una mitad de la manzana el polvo de la vitamina C,

procurando que quede

Bien esparcido.

3. Dejar ambas mitades de manzana a temperatura ambiente durante 60

minutos y

Observar los cambios de coloración.

 En este caso ya se puede ver la diferencia entre ambas partes.

¿Cómo evidencia que se produjo una reacción enzimática?

Por la reacción que produce en la Manzana que se le echa la vitamina C,

en este caso se podría reconocer como el sustrato causando un efecto en la

manzana.

¿A qué se debe la presencia del color marrón en la manzana que no tiene

vitamina C?

Por la exposición y relación que toma con el oxígeno, llevándola como

aun proceso de oxidación en la Manzana que no tiene vitamina C.

¿Qué papel desempeña la vitamina C sobre la manzana expuesta al

oxígeno?
 La vitamina C cumple un papel como de refrigerante, mantiene la

manzana a en buen estado después de estar expuesta al aire del ambiente.

3. EL PODER DE LA AMILASA (ENZIMA DE LA SALIVA)

MATERIALES:

Olla, cuchara

Dos frascos de vidrio

Solución yodada

PROCEDIMIENTO:

PASO UNO: En un recipiente (una olla), agregue un vaso de agua y

póngala a hervir a fuego bajo, cuando esté caliente agregue de a poco una

cucharadita de maizena revuelva sobre el fuego cinco minutos y retire del

fuego. Deje enfriar la mezcla

PASO DOS: Rotule dos frascos de vidrio: uno con el nombre de “saliva”

y el otro que diga “nada”

PASO TRES: al frasco que dice saliva agregue: saliva, dos cucharadas de

solución de almidón (paso uno) y una gota de solución de yodo

 PASO CUATRO: al frasco que dice nada agregue: dos cucharadas de

solución de almidón y una gota de solución de yodo

Con un palillo mezcle las dos preparaciones, espere unos minutos

Paso uno Paso dos y

tres
 Ambas reacciones después de agregar el yodo.

¿Qué paso?

Ambas muestras después de estar mescladas, toman una forma de

coloración con el yodo, pero de forma muy particular, como si el yodo se

separar del agua del almidón.

¿Qué observaste en el frasco que tiene saliva?

Por otra parte en el frasco que contenía saliva se vio menos mesclada con

el yodo, este poco a poco fue desapareciendo.

4. ENZIMAS DE PIÑA (PROTEÍNAS)

Los seres humanos, al igual que los animales, sobreviven

descomponiendo las sustancias alimenticias en sus componentes más

simples y luego absorbiendo los nutrientes. Después de comer, el tejido que

reviste el estómago segrega ácidos y enzimas que descomponen las

proteínas, los hidratos de carbono y las grasas. En este procedimiento podrás

observar el efecto de la piña natural sobre la gelatina.

MATERIAL NECESARIO

gelatina sin sabor, recipientes de cristal de tamaño mediano y rodaja de

piña

Procedimiento

1. Prepare la gelatina sin sabor y luego viértela en los dos recipientes de

vidrio a partes iguales. Déjalos reposar durante toda la noche para que cuaje

la gelatina.

2. Corta una rebanada pequeña de piña natural y colócala sobre la gelatina

sólida de uno de los recipientes de vidrio.

3. Deja reposar los recipientes de vidrios durante toda la noche y luego

compara el que contiene la piña y el que sólo contiene gelatina. Anota las

observaciones y responde:

¿Qué paso con la gelatina que tiene la piña?, ¿Por qué se producen los

cambios en la gelatina?, ¿Qué enzimas se encuentran en la piña?

 ¿Qué paso con la gelatina que tiene la piña?

R// La gelatina es proteína y además es soluble en agua que cuando cuaja

se crea una masa semisólida como especie de un gel, cuando se pone en

contacto con la piña esta se vuelve a su estado líquido, mientras que la que

no estuvo en contacto con la piña quedo en el mismo estado.

¿Por qué se producen los cambios en la gelatina?

 R// Porque la piña tiene muchas proteasas y cuando estas se ven en

contacto con la gelatina, lo que hace es que la proteasa corta esas cadenas de

proteínas haciendo que se vuelvan a su estado líquido.

¿Qué enzimas se encuentran en la piña?

R// Bromelina que es una enzima con acción preolitica para una mejor

asimilación de los aminoácidos que la componen. La bromelina deshace las

proteínas de igual manera que la pepsina, enzima que forma parte del jugo

gástrico.

5. ENZIMAS EN DETERGENTES PARA LA ROPA

INTRODUCCIÓN

Las proteasas son enzimas que aceleran la degradación de proteínas.

Muchos fabricantes de detergentes para lavadoras de ropa las agregan a las

formulaciones para remover manchas derivadas de proteínas como huevo,

sangre, etc. Muchas de estas proteasas son derivadas de cepas bacterianas de

Bacillus sp. Las proteasas

 Bacterianas son extremadamente estables a pH alcalinos, largos períodos

de almacenamiento y temperaturas variables. Estas bacterias también han

sido modificadas por ingeniería genética para aumentar la capacidad de las

proteasas que ellas producen, ante la presencia de blanqueadores que de otro

modo podrían afectarlas. La gelatina está compuesta por cadenas proteicas

que son fácilmente degradadas en sus aminoácidos componentes. Se prepara

del colágeno, una proteína presente en tendones y piel de animales.

Mediante esta experiencia se propone comprobar la acción de sustancias

biológicas introducidas en los detergentes sobre los sustratos específicos.

MATERIALES

• Frasco de vidrio de 250 ml.

• Dos frascos de vidrio de 100 ml.

• 1 sobre de gelatina con azúcar

• Marcadores

• Detergentes para lavarropas

• Agua

PROCEDIMIENTO:

1. Preparar la gelatina: por cada 50 ml de agua, usar 18 g de gelatina.

2. Llenar dos frascos de vidrio con 10 ml de la solución de gelatina cada

uno (frasco 1 y frasco 2) y colocarlos en nevera hasta que solidifique.

3. Sacar los frascos de la nevera. La gelatina debe estar sólida.

 4. Marcar sobre el vidrio de cada frasco con el marcador a la altura de la

gelatina sólida.

5. Preparar una jarra con la solución de detergente (10ml de detergente en

90ml agua = 10%).

6. En el frasco 1 agregar 30 gotas de la solución enzimática (paso 5) sobre

la gelatina sólida.

7. En el frasco 2 agregar 30 gotas de agua sobre la gelatina sólida.

8. Dejar reposar durante la noche y chequear ambos frascos a las 24

horas. Marcar la

Posición de la gelatina sólida.

9. Chequear nuevamente a las 48 horas, y marcar la altura de la gelatina

sólida.

Qué tipo de enzimas tendría el detergente.

¿Qué cambio se pudo registrar en la altura de la gelatina sólida?

¿Qué podría suceder si al agregar el detergente se dejara la gelatina en la

nevera?
 ¿Qué cambio se puede registrar en la altura de la gelatina solida?

R// La altura disminuyo porque la proteína de la misma gelatina al estar

en contacto con las enzimas del detergente se degradan.

¿Qué podría suceder si al agregar el detergente se dejara la gelatina en la

nevera?´

R// Las enzimas del detergente no actuarían, ´porque estarían en una

temperatura muy fría lo cual no les permite actuar por ende no tendría el

mismo efecto en la altura de la gelatina.

 CONCLUSION

Las enzimas cumplen una gran relevancia en nuestro cuerpo, se

entrelazan y se pliegan una o más cadenas polipeptídicas, que aportan un

pequeño grupo de aminoácidos para formar el sitio activo, afectando así

nuestro cuerpo, específicamente el pH y también en otro tipo de reacciones

enzimáticas como es el cambio de temperatura, concentraciones de sustrato

etc.

Podemos concluir que las enzimas se encuentran en muchas cosas que

diariamente usamos e incluso consumimos, tener conocimiento de lo que

puede ser beneficioso para nuestro cuerpo o poder experimentar mediante

cosas que usualmente consumimos o usamos todos los días nos abren paso a

nuestros pequeños, caseros y exitosos experimentos. De este informe

logramos aprender, aplicar, experimentar y reconocer todo lo relacionado

con las enzimas por ende se cumple el objetico estipulado.

 BIBLIOGFRAFIAS

°https://es.wikipedia.org/wiki/Enzima

°https://www.ecured.cu/Proteasa#:~:text=Piña%3A%20La%20piña%20es

%20una,inflamación%2C%20informa%20World%27s%20Healthiest

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°Helmenstine, Anne Marie. The Science Behind Why Pineapple Ruins

Gelatin. ThoughtCo 2018. https://thoughtco.com/why-does-pineapple-ruin-

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