Actividad Enzimática

Practica 9

UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO División De Ciencias Naturales Y Exactas. Departamento de Química. Laboratorio De Fisicoquímica en Biología y Farmacia. QU 30605 RESPONSABLE: Martha Lilia Ramírez Ramírez EQUIPO 1 INTEGRANTES DE EQUIPO:  Bautista García Diana Jessica.  Juárez Pérez Gabriela de Jesús.  Ugalde Estrella Georgina.

La actividad de las enzimas puede ser afectada por otras moléculas. Casi todos los procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas. las cuales se convierten en moléculas diferentes denominadas productos. Como todos los catalizadores.4 No todos los catalizadores bioquímicos son proteínas. 2. transcurra a mayor velocidad que sin la presencia de la enzima. INTRODUCCION Las enzimas son moléculas de naturaleza proteica que catalizan reacciones químicas. Observar la actividad de la enzima catalasa. gran cantidad de enzimas requieren de cofactores para su actividad. A las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimáticas. el equilibrio de la reacción. pero consiguen acelerar el proceso incluso millones de veces. ni alteran su equilibrio químico. En estas reacciones. Sin embargo. el conjunto (set) de enzimas sintetizadas en una célula determina el tipo de metabolismo que tendrá cada célula. Las enzimas catalizan alrededor de 4. A su vez. es decir. las enzimas actúan sobre unas moléculas denominadas sustratos. pues algunas moléculas de ARN son capaces de catalizar reacciones (como la subunidad 16S de los ribosomas en la que reside la actividadpeptidil transferasa). sea cinéticamente favorable. las enzimas difieren de otros catalizadores por ser más específicas. las enzimas funcionan disminuyendo la energía de activación (ΔG‡) de una reacción. con un catalizador no proteico. Muchas drogas o fármacos son moléculas inhibidoras. Examinar los factores que afectan la actividad enzimática. También cabe nombrar unas moléculas sintéticas denominadas enzimas artificiales capaces de catalizar reacciones químicas como las enzimas clásicas. Asimismo. Las enzimas no alteran el balance energético de las reacciones en que intervienen. . o de un catalizador en general. Los inhibidores enzimáticos son moléculas que disminuyen o impiden la actividad de las enzimas. por lo tanto. siempre que sean termodinámicamente posibles: Una enzima hace que una reacción química que es energéticamente posible pero que transcurre a una velocidad muy baja. de forma que se acelera sustancialmente la tasa de reacción. esta síntesis depende de la regulación de la expresión génica.000 reacciones bioquímicas distintas. alcanza el equilibrio mucho más deprisa que la correspondiente reacción no catalizada. Al igual que ocurre con otros catalizadores. las enzimas no son consumidas por las reacciones que catalizan. ni modifican. Una reacción que se produce bajo el control de una enzima. 3. Comparar la actividad de la catalasa de tejidos de organismos vivos. 9 ACTIVIDAD ENZIMATICA OBJETIVOS 1. mientras que los activadores son moléculas que incrementan dicha actividad. Debido a que las enzimas son extremadamente selectivas con sus sustratos y su velocidad crece sólo con algunas reacciones.PRACTICA No.

. Comparación de la actividad de la catalasa y el dióxido de manganeso 1. Usa el agitador y un poco de arena fina para triturar la papa. la actividad es afectada por la temperatura. por ejemplo. Tubo 1 2 3 4 Agregar (1) 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% Agregar (2) Un poco de arena fina Un poco de MnO2 Una porción de papa cruda Una porción de hígado Velocidad 0 3 2 4 PARTE B. destinción de jeans o producción de biocombustibles. son ampliamente utilizadas en diversos procesos industriales. 3.1 M al segundo y 1 mL de NaOH 0.Igualmente. el pH. 2 = moderada. Agrega 1 mL de agua destilada al primer tubo.1 M DESARROLLO EXPERIMENTAL En los siguientes experimentos mide la velocidad de reacción de acuerdo a la siguiente escala: 0 = no hay reacción. Coloca una pequeña cantidad de papa fresca en 3 tubos de ensaye. MATERIAL REQUERIDO 8 tubos de ensaye de 13 x 100 mm 1 agitador de vidrio 2 pipetas graduadas de 5 mL 1 vaso de precipitados de 150 mL 1 gradilla metálica 1 parrilla de calentamiento con agitación REACTIVOS Peróxido de hidrógeno al 3 % Acido clorhídrico 0. y otros factores físico-químicos. Además. 4 = muy rápida.1 M al tercer tubo. como son la fabricación de alimentos. Efecto del pH sobre la actividad enzimática 1. Adiciona a cada tubo 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 % y registra los resultados al cabo de 5 minutos. 1 mL de HCl 0.1 M Cianuro de potasio 0. Observaciones y resultados. Coloca en 4 tubos de ensaye 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 %. Registra la velocidad de reacción en cada tubo y compara los resultados obtenidos. 2. 2. 1 = lenta. Algunas enzimas son usadas comercialmente. Registra el pH de cada tubo. en la síntesis de antibióticos y productos domésticos de limpieza.1 M Hidróxido de sodio 0. la concentración de la propia enzima y del sustrato. Agrega a cada tubo las siguientes sustancias: 3. 3 = rápida. PARTE A.

PARTE D. Tubo C/papa en B.Observaciones y resultados. 1 ml HCl 0. 2. Repite lo anterior pero a temperatura ambiente.M 5 min.1M 1 ml NaOH 0. Agregar Papa triturada Papa triturada Observaciones Se observa reacción con mayor rapidez y más efervescencia. ambiente Agregar 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% Observaciones La reacción se observo mas rápida. Efecto de un inhibidor 1. Compara las velocidades de reacción. 4. Agregar una pequeña cantidad de papa triturada a cada tubo.1M no se observaron cambios. Si se observa reacción con efervescencia. 2.1 M. Efecto de la temperatura 1. Observaciones: Cuando se agrego el KCN 0. Añade 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 %. Mezcla bien el contenido del tubo. 3. al agregar el ml de H2O2 al 3% no se observo reacción ni cambio alguno.1M pH (1) 5 1 12 Agregar (2) 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% pH (2) 5 1 11 PARTE C. Coloca una pequeña cantidad de papa en un tubo de ensaye y tritura con arena. durante 5 minutos. Observa y registra los resultados. Coloca uno de los tubos en un baño de agua a 37°C y el otro tubo en un baño de agua helada. Añade 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 % al tubo y registra los resultados. Tubo c/papa 1 2 3 Agregar (1) 1 ml H2O d.M a 37°C 5 min. agrega 3 gotas de KCN 0. Coloca una pequeña cantidad de papa en un tubo de ensaye y tritura con arena. Coloca en dos tubos de ensaye 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 %. Pon el tubo en un baño de agua hirviendo durante 5 minutos. C/1 ml de H2O2 al 3% en B. La reacción fue mínima de cero. . C/papa a Temp.H a ≈0°C 5 min. Tubo C/1 ml de H2O2 al 3% en B. Observaciones y resultados.

5 2 1.  Efecto del pH sobre la actividad enzimática . y óxidos metálicos. La luz del día también favorece la descomposición del peróxido de hidrógeno.5 1 0. elabora un gráfico de barras. el pH y del inhibidor sobre la velocidad de reacción de la enzima. entre otras: metales de transición. numerosas sustancias actúan como catalizadores de su descomposición. ¿Puede el peróxido de hidrógeno ser descompuesto por otros catalizadores diferentes de los que se encuentran en los tejidos vivos? Explica. Describe el efecto del tamaño de partícula.5 4 3.Anotación de los resultados del experimento y discusión 1. álcalis.5 Velocidad 3 2. Basado en tus anotaciones sobre la velocidad de las reacciones de los experimentos anteriores. Elabora una tabla con los resultados obtenidos y 2. 4.5 0 1 c/arena 2 c/MnO2 Velocidad 0 3 2 4 Actividad Enzimatica Serie 1 3 c/papa cruda Tubo 4 c/hígado 3. Tubo 1 c/arena 2 c/MnO2 3 c/papa cruda 4 c/hígado 4. de la temperatura. por lo que debe conservarse en envases opacos. A pesar de que el peróxido de hidrógeno es relativamente estable a temperatura ambiente.

Este es el llamado pH óptimo. la velocidad de reacción se duplica. los seres vivos han desarrollado sistemas más o menos complejos para mantener estable el pH intracelular: Los amortiguadores fisiológicos. el aumento de velocidad de la reacción debido a la temperatura es contrarrestado por la pérdida de actividad catalítica debida a la desnaturalización térmica.) en las cadenas laterales de sus aminoácidos. se empiezan a desnaturalizar por el calor. La temperatura representa uno de los tipos de energía presente en la reacción. tiol -SH. La mayoría de los enzimas son muy sensibles a los cambios de pH. Así. Desviaciones de pocas décimas por encima o por debajo del pH óptimo pueden afectar drásticamente su actividad. de sus cargas eléctricas. La temperatura a la cual la actividad catalítica es máxima se llama temperatura óptima. habrá un pH en el cual la conformación será la más adecuada para la actividad catalítica . negativa o neutra. y la actividad enzimática decrece rápidamente hasta anularse. donde logramos ver que en un tejido vivo la actividad enzimática de la catalasa es muy rápida. El sentido del flujo de energía entre los miembros de la reacción. menor superficie de contacto para la misma cantidad de materia. los aumentos de temperatura aceleran las reacciones químicas: por cada 10ºC de incremento. Conclusiones Se cumplió el objetivo de la practica al comparar la actividad de la enzima catalasa en diferentes muestras observando su velocidad de reacción. A mayor temperatura. determina si esta es exotérmica o endotérmica. A mayor tamaño de partícula. Sin embargo. mayor velocidad de reacción. al ser proteínas.Los enzimas poseen grupos químicos ionizables (carboxilos -COOH. en parte. la pepsina gástrica tiene un pH óptimo de 2. mayor velocidad de reacción. Se demostró que el pH influye en la actividad enzimática de las proteínas así mismo se comprobó que el factor temperatura es de gran .  Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática En general. Como la conformación de las proteínas depende. impidiendo su unión al sustrato (inhibidor no competitivo). amino -NH2. Las reacciones catalizadas por enzimas siguen esta ley general. La superficie de contacto determina el número de átomos y moléculas disponibles para la reacción.  Efecto de los inhibidores sobre la actividad enzimática Ciertas moléculas pueden inhibir la acción catalítica de un enzima: son los inhibidores. Según el pH del medio. Como ligeros cambios del pH pueden provocar la desnaturalización de la proteína. Estos inhibidores bien pueden ocupar temporalmente el centro activo por semejanza estructural con el sustrato original (inhibidor competitivo) o bien alteran la conformación espacial del enzima. etc. la ureasa lo tiene a pH 7 y la arginasa lo tiene a pH 10. a partir de cierta temperatura.  Efecto del tamaño de partícula: Superficie de contacto: A mayor superficie de contacto. imidazol. estos grupos pueden tener carga eléctrica positiva. Por encima de esta temperatura.

En la prueba del efecto de inhibidor se corroboró que al adicionar una especie química con esta función si se evita que la enzima tenga actividad pues después de agregar el inhibidor y realizar la prueba ya no se observo reacción como en los casos que no tenían inhibidor.org/wiki/Enzima www. Bibliografia: http://es.scribd.influencia en la actividad enzimática ya que se observo mayor velocidad de actividad a temperaturas altas que en temperatura ambiente o bajas.uag.wikipedia.com/doc/19002681/actividad-enzimatica genesis.mx/edmedia/material/quimicaII/enzimas.cfm .

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