Actividad Enzimática

Practica 9

UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO División De Ciencias Naturales Y Exactas. Departamento de Química. Laboratorio De Fisicoquímica en Biología y Farmacia. QU 30605 RESPONSABLE: Martha Lilia Ramírez Ramírez EQUIPO 1 INTEGRANTES DE EQUIPO:  Bautista García Diana Jessica.  Juárez Pérez Gabriela de Jesús.  Ugalde Estrella Georgina.

pero consiguen acelerar el proceso incluso millones de veces. A las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimáticas. Examinar los factores que afectan la actividad enzimática. pues algunas moléculas de ARN son capaces de catalizar reacciones (como la subunidad 16S de los ribosomas en la que reside la actividadpeptidil transferasa). Las enzimas catalizan alrededor de 4. INTRODUCCION Las enzimas son moléculas de naturaleza proteica que catalizan reacciones químicas. las enzimas difieren de otros catalizadores por ser más específicas. las cuales se convierten en moléculas diferentes denominadas productos. es decir. las enzimas no son consumidas por las reacciones que catalizan. Comparar la actividad de la catalasa de tejidos de organismos vivos. Debido a que las enzimas son extremadamente selectivas con sus sustratos y su velocidad crece sólo con algunas reacciones. por lo tanto. La actividad de las enzimas puede ser afectada por otras moléculas. o de un catalizador en general. Asimismo.000 reacciones bioquímicas distintas. Una reacción que se produce bajo el control de una enzima. Observar la actividad de la enzima catalasa. . esta síntesis depende de la regulación de la expresión génica. las enzimas funcionan disminuyendo la energía de activación (ΔG‡) de una reacción.4 No todos los catalizadores bioquímicos son proteínas. alcanza el equilibrio mucho más deprisa que la correspondiente reacción no catalizada. ni alteran su equilibrio químico. A su vez. Casi todos los procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas. Sin embargo. con un catalizador no proteico. Como todos los catalizadores. sea cinéticamente favorable. transcurra a mayor velocidad que sin la presencia de la enzima. de forma que se acelera sustancialmente la tasa de reacción. mientras que los activadores son moléculas que incrementan dicha actividad. ni modifican. el equilibrio de la reacción. En estas reacciones.PRACTICA No. 3. Muchas drogas o fármacos son moléculas inhibidoras. Los inhibidores enzimáticos son moléculas que disminuyen o impiden la actividad de las enzimas. las enzimas actúan sobre unas moléculas denominadas sustratos. También cabe nombrar unas moléculas sintéticas denominadas enzimas artificiales capaces de catalizar reacciones químicas como las enzimas clásicas. 9 ACTIVIDAD ENZIMATICA OBJETIVOS 1. Las enzimas no alteran el balance energético de las reacciones en que intervienen. 2. Al igual que ocurre con otros catalizadores. gran cantidad de enzimas requieren de cofactores para su actividad. el conjunto (set) de enzimas sintetizadas en una célula determina el tipo de metabolismo que tendrá cada célula. siempre que sean termodinámicamente posibles: Una enzima hace que una reacción química que es energéticamente posible pero que transcurre a una velocidad muy baja.

Comparación de la actividad de la catalasa y el dióxido de manganeso 1. Agrega 1 mL de agua destilada al primer tubo. 1 = lenta. Además. PARTE A. MATERIAL REQUERIDO 8 tubos de ensaye de 13 x 100 mm 1 agitador de vidrio 2 pipetas graduadas de 5 mL 1 vaso de precipitados de 150 mL 1 gradilla metálica 1 parrilla de calentamiento con agitación REACTIVOS Peróxido de hidrógeno al 3 % Acido clorhídrico 0. 2. 3 = rápida. la concentración de la propia enzima y del sustrato. Coloca en 4 tubos de ensaye 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 %. Agrega a cada tubo las siguientes sustancias: 3. la actividad es afectada por la temperatura. Tubo 1 2 3 4 Agregar (1) 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% Agregar (2) Un poco de arena fina Un poco de MnO2 Una porción de papa cruda Una porción de hígado Velocidad 0 3 2 4 PARTE B. Coloca una pequeña cantidad de papa fresca en 3 tubos de ensaye. el pH. .1 M Cianuro de potasio 0. en la síntesis de antibióticos y productos domésticos de limpieza. Efecto del pH sobre la actividad enzimática 1. y otros factores físico-químicos.Igualmente. 1 mL de HCl 0. por ejemplo.1 M al tercer tubo. Algunas enzimas son usadas comercialmente. son ampliamente utilizadas en diversos procesos industriales. 2. 2 = moderada. destinción de jeans o producción de biocombustibles.1 M Hidróxido de sodio 0. Adiciona a cada tubo 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 % y registra los resultados al cabo de 5 minutos. Observaciones y resultados.1 M al segundo y 1 mL de NaOH 0. Registra la velocidad de reacción en cada tubo y compara los resultados obtenidos. como son la fabricación de alimentos. 4 = muy rápida. Registra el pH de cada tubo. 3. Usa el agitador y un poco de arena fina para triturar la papa.1 M DESARROLLO EXPERIMENTAL En los siguientes experimentos mide la velocidad de reacción de acuerdo a la siguiente escala: 0 = no hay reacción.

Si se observa reacción con efervescencia.H a ≈0°C 5 min.M 5 min. Pon el tubo en un baño de agua hirviendo durante 5 minutos. Añade 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 %. Agregar Papa triturada Papa triturada Observaciones Se observa reacción con mayor rapidez y más efervescencia. C/papa a Temp. Coloca uno de los tubos en un baño de agua a 37°C y el otro tubo en un baño de agua helada. Tubo C/1 ml de H2O2 al 3% en B. Efecto de la temperatura 1. ambiente Agregar 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% Observaciones La reacción se observo mas rápida. Tubo C/papa en B. 4. La reacción fue mínima de cero.1M no se observaron cambios. al agregar el ml de H2O2 al 3% no se observo reacción ni cambio alguno. . Efecto de un inhibidor 1. Observaciones: Cuando se agrego el KCN 0. 1 ml HCl 0. Observa y registra los resultados. Mezcla bien el contenido del tubo. 3. Coloca una pequeña cantidad de papa en un tubo de ensaye y tritura con arena.1M pH (1) 5 1 12 Agregar (2) 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% pH (2) 5 1 11 PARTE C. Agregar una pequeña cantidad de papa triturada a cada tubo.Observaciones y resultados. durante 5 minutos. C/1 ml de H2O2 al 3% en B.1M 1 ml NaOH 0. Coloca una pequeña cantidad de papa en un tubo de ensaye y tritura con arena.1 M.M a 37°C 5 min. PARTE D. 2. Observaciones y resultados. Coloca en dos tubos de ensaye 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 %. Añade 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 % al tubo y registra los resultados. Tubo c/papa 1 2 3 Agregar (1) 1 ml H2O d. Compara las velocidades de reacción. agrega 3 gotas de KCN 0. 2. Repite lo anterior pero a temperatura ambiente.

Anotación de los resultados del experimento y discusión 1. elabora un gráfico de barras. de la temperatura. Basado en tus anotaciones sobre la velocidad de las reacciones de los experimentos anteriores. por lo que debe conservarse en envases opacos.5 0 1 c/arena 2 c/MnO2 Velocidad 0 3 2 4 Actividad Enzimatica Serie 1 3 c/papa cruda Tubo 4 c/hígado 3. el pH y del inhibidor sobre la velocidad de reacción de la enzima.5 Velocidad 3 2.  Efecto del pH sobre la actividad enzimática . numerosas sustancias actúan como catalizadores de su descomposición. y óxidos metálicos.5 4 3. ¿Puede el peróxido de hidrógeno ser descompuesto por otros catalizadores diferentes de los que se encuentran en los tejidos vivos? Explica. álcalis. entre otras: metales de transición. Elabora una tabla con los resultados obtenidos y 2. La luz del día también favorece la descomposición del peróxido de hidrógeno. 4.5 2 1. A pesar de que el peróxido de hidrógeno es relativamente estable a temperatura ambiente. Describe el efecto del tamaño de partícula.5 1 0. Tubo 1 c/arena 2 c/MnO2 3 c/papa cruda 4 c/hígado 4.

Estos inhibidores bien pueden ocupar temporalmente el centro activo por semejanza estructural con el sustrato original (inhibidor competitivo) o bien alteran la conformación espacial del enzima. Según el pH del medio. donde logramos ver que en un tejido vivo la actividad enzimática de la catalasa es muy rápida. se empiezan a desnaturalizar por el calor. A mayor tamaño de partícula. a partir de cierta temperatura. la ureasa lo tiene a pH 7 y la arginasa lo tiene a pH 10.  Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática En general. La temperatura a la cual la actividad catalítica es máxima se llama temperatura óptima. etc. los seres vivos han desarrollado sistemas más o menos complejos para mantener estable el pH intracelular: Los amortiguadores fisiológicos. estos grupos pueden tener carga eléctrica positiva.  Efecto del tamaño de partícula: Superficie de contacto: A mayor superficie de contacto. al ser proteínas. Desviaciones de pocas décimas por encima o por debajo del pH óptimo pueden afectar drásticamente su actividad. imidazol. A mayor temperatura. Como ligeros cambios del pH pueden provocar la desnaturalización de la proteína. La temperatura representa uno de los tipos de energía presente en la reacción. la pepsina gástrica tiene un pH óptimo de 2. negativa o neutra. Las reacciones catalizadas por enzimas siguen esta ley general. de sus cargas eléctricas. Como la conformación de las proteínas depende. menor superficie de contacto para la misma cantidad de materia.Este es el llamado pH óptimo. y la actividad enzimática decrece rápidamente hasta anularse. los aumentos de temperatura aceleran las reacciones químicas: por cada 10ºC de incremento. el aumento de velocidad de la reacción debido a la temperatura es contrarrestado por la pérdida de actividad catalítica debida a la desnaturalización térmica.) en las cadenas laterales de sus aminoácidos. Por encima de esta temperatura. mayor velocidad de reacción. amino -NH2. tiol -SH. La superficie de contacto determina el número de átomos y moléculas disponibles para la reacción. La mayoría de los enzimas son muy sensibles a los cambios de pH.Los enzimas poseen grupos químicos ionizables (carboxilos -COOH. Así. Conclusiones Se cumplió el objetivo de la practica al comparar la actividad de la enzima catalasa en diferentes muestras observando su velocidad de reacción. El sentido del flujo de energía entre los miembros de la reacción. habrá un pH en el cual la conformación será la más adecuada para la actividad catalítica .  Efecto de los inhibidores sobre la actividad enzimática Ciertas moléculas pueden inhibir la acción catalítica de un enzima: son los inhibidores. en parte. la velocidad de reacción se duplica. Se demostró que el pH influye en la actividad enzimática de las proteínas así mismo se comprobó que el factor temperatura es de gran . Sin embargo. impidiendo su unión al sustrato (inhibidor no competitivo). mayor velocidad de reacción. determina si esta es exotérmica o endotérmica.

En la prueba del efecto de inhibidor se corroboró que al adicionar una especie química con esta función si se evita que la enzima tenga actividad pues después de agregar el inhibidor y realizar la prueba ya no se observo reacción como en los casos que no tenían inhibidor.org/wiki/Enzima www.cfm .mx/edmedia/material/quimicaII/enzimas.influencia en la actividad enzimática ya que se observo mayor velocidad de actividad a temperaturas altas que en temperatura ambiente o bajas.com/doc/19002681/actividad-enzimatica genesis. Bibliografia: http://es.scribd.wikipedia.uag.

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