Actividad Enzimática

Practica 9

UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO División De Ciencias Naturales Y Exactas. Departamento de Química. Laboratorio De Fisicoquímica en Biología y Farmacia. QU 30605 RESPONSABLE: Martha Lilia Ramírez Ramírez EQUIPO 1 INTEGRANTES DE EQUIPO:  Bautista García Diana Jessica.  Juárez Pérez Gabriela de Jesús.  Ugalde Estrella Georgina.

En estas reacciones. 3. sea cinéticamente favorable. Al igual que ocurre con otros catalizadores. ni alteran su equilibrio químico. Asimismo. Como todos los catalizadores. gran cantidad de enzimas requieren de cofactores para su actividad. 2. esta síntesis depende de la regulación de la expresión génica. Muchas drogas o fármacos son moléculas inhibidoras. Comparar la actividad de la catalasa de tejidos de organismos vivos. las enzimas no son consumidas por las reacciones que catalizan. el equilibrio de la reacción. el conjunto (set) de enzimas sintetizadas en una célula determina el tipo de metabolismo que tendrá cada célula. A las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimáticas. La actividad de las enzimas puede ser afectada por otras moléculas. pero consiguen acelerar el proceso incluso millones de veces. Casi todos los procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas.4 No todos los catalizadores bioquímicos son proteínas. Sin embargo. Examinar los factores que afectan la actividad enzimática. Observar la actividad de la enzima catalasa. mientras que los activadores son moléculas que incrementan dicha actividad. 9 ACTIVIDAD ENZIMATICA OBJETIVOS 1. las cuales se convierten en moléculas diferentes denominadas productos. alcanza el equilibrio mucho más deprisa que la correspondiente reacción no catalizada. transcurra a mayor velocidad que sin la presencia de la enzima. de forma que se acelera sustancialmente la tasa de reacción. Los inhibidores enzimáticos son moléculas que disminuyen o impiden la actividad de las enzimas. A su vez. . Las enzimas catalizan alrededor de 4. ni modifican. Las enzimas no alteran el balance energético de las reacciones en que intervienen. las enzimas difieren de otros catalizadores por ser más específicas.PRACTICA No. INTRODUCCION Las enzimas son moléculas de naturaleza proteica que catalizan reacciones químicas. Una reacción que se produce bajo el control de una enzima. Debido a que las enzimas son extremadamente selectivas con sus sustratos y su velocidad crece sólo con algunas reacciones. es decir. por lo tanto. con un catalizador no proteico. siempre que sean termodinámicamente posibles: Una enzima hace que una reacción química que es energéticamente posible pero que transcurre a una velocidad muy baja. o de un catalizador en general. También cabe nombrar unas moléculas sintéticas denominadas enzimas artificiales capaces de catalizar reacciones químicas como las enzimas clásicas.000 reacciones bioquímicas distintas. pues algunas moléculas de ARN son capaces de catalizar reacciones (como la subunidad 16S de los ribosomas en la que reside la actividadpeptidil transferasa). las enzimas funcionan disminuyendo la energía de activación (ΔG‡) de una reacción. las enzimas actúan sobre unas moléculas denominadas sustratos.

Agrega 1 mL de agua destilada al primer tubo. Registra el pH de cada tubo. Tubo 1 2 3 4 Agregar (1) 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% Agregar (2) Un poco de arena fina Un poco de MnO2 Una porción de papa cruda Una porción de hígado Velocidad 0 3 2 4 PARTE B. Algunas enzimas son usadas comercialmente. Usa el agitador y un poco de arena fina para triturar la papa. como son la fabricación de alimentos. por ejemplo. el pH. MATERIAL REQUERIDO 8 tubos de ensaye de 13 x 100 mm 1 agitador de vidrio 2 pipetas graduadas de 5 mL 1 vaso de precipitados de 150 mL 1 gradilla metálica 1 parrilla de calentamiento con agitación REACTIVOS Peróxido de hidrógeno al 3 % Acido clorhídrico 0.1 M Hidróxido de sodio 0. en la síntesis de antibióticos y productos domésticos de limpieza. 2 = moderada. 4 = muy rápida. destinción de jeans o producción de biocombustibles. Registra la velocidad de reacción en cada tubo y compara los resultados obtenidos. y otros factores físico-químicos. son ampliamente utilizadas en diversos procesos industriales. Observaciones y resultados. Adiciona a cada tubo 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 % y registra los resultados al cabo de 5 minutos. Comparación de la actividad de la catalasa y el dióxido de manganeso 1. 1 = lenta.1 M al segundo y 1 mL de NaOH 0.1 M Cianuro de potasio 0. . Agrega a cada tubo las siguientes sustancias: 3. 2. la concentración de la propia enzima y del sustrato. Coloca en 4 tubos de ensaye 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 %. Además.Igualmente. 2. PARTE A. la actividad es afectada por la temperatura. 3 = rápida. 1 mL de HCl 0. Coloca una pequeña cantidad de papa fresca en 3 tubos de ensaye.1 M DESARROLLO EXPERIMENTAL En los siguientes experimentos mide la velocidad de reacción de acuerdo a la siguiente escala: 0 = no hay reacción. 3. Efecto del pH sobre la actividad enzimática 1.1 M al tercer tubo.

Observaciones y resultados.Observaciones y resultados. 1 ml HCl 0. Pon el tubo en un baño de agua hirviendo durante 5 minutos. .1M pH (1) 5 1 12 Agregar (2) 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% pH (2) 5 1 11 PARTE C. PARTE D. Si se observa reacción con efervescencia. Observaciones: Cuando se agrego el KCN 0. ambiente Agregar 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% Observaciones La reacción se observo mas rápida. Agregar una pequeña cantidad de papa triturada a cada tubo. Tubo C/papa en B. 3.1 M. Añade 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 %. Coloca en dos tubos de ensaye 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 %. Coloca una pequeña cantidad de papa en un tubo de ensaye y tritura con arena.1M 1 ml NaOH 0. 4.1M no se observaron cambios.H a ≈0°C 5 min. agrega 3 gotas de KCN 0. Repite lo anterior pero a temperatura ambiente. Coloca uno de los tubos en un baño de agua a 37°C y el otro tubo en un baño de agua helada. C/1 ml de H2O2 al 3% en B. Coloca una pequeña cantidad de papa en un tubo de ensaye y tritura con arena.M a 37°C 5 min. Efecto de un inhibidor 1. 2.M 5 min. durante 5 minutos. Efecto de la temperatura 1. al agregar el ml de H2O2 al 3% no se observo reacción ni cambio alguno. Tubo C/1 ml de H2O2 al 3% en B. 2. Compara las velocidades de reacción. Agregar Papa triturada Papa triturada Observaciones Se observa reacción con mayor rapidez y más efervescencia. Mezcla bien el contenido del tubo. Observa y registra los resultados. Añade 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 % al tubo y registra los resultados. Tubo c/papa 1 2 3 Agregar (1) 1 ml H2O d. La reacción fue mínima de cero. C/papa a Temp.

5 0 1 c/arena 2 c/MnO2 Velocidad 0 3 2 4 Actividad Enzimatica Serie 1 3 c/papa cruda Tubo 4 c/hígado 3. elabora un gráfico de barras. numerosas sustancias actúan como catalizadores de su descomposición.  Efecto del pH sobre la actividad enzimática . Describe el efecto del tamaño de partícula. La luz del día también favorece la descomposición del peróxido de hidrógeno. Tubo 1 c/arena 2 c/MnO2 3 c/papa cruda 4 c/hígado 4. el pH y del inhibidor sobre la velocidad de reacción de la enzima. Basado en tus anotaciones sobre la velocidad de las reacciones de los experimentos anteriores. de la temperatura. 4.5 2 1. ¿Puede el peróxido de hidrógeno ser descompuesto por otros catalizadores diferentes de los que se encuentran en los tejidos vivos? Explica.5 Velocidad 3 2.5 4 3. por lo que debe conservarse en envases opacos. Elabora una tabla con los resultados obtenidos y 2.Anotación de los resultados del experimento y discusión 1. álcalis. y óxidos metálicos. A pesar de que el peróxido de hidrógeno es relativamente estable a temperatura ambiente.5 1 0. entre otras: metales de transición.

Desviaciones de pocas décimas por encima o por debajo del pH óptimo pueden afectar drásticamente su actividad. etc. imidazol. La temperatura a la cual la actividad catalítica es máxima se llama temperatura óptima. Se demostró que el pH influye en la actividad enzimática de las proteínas así mismo se comprobó que el factor temperatura es de gran . A mayor temperatura. Como la conformación de las proteínas depende. los seres vivos han desarrollado sistemas más o menos complejos para mantener estable el pH intracelular: Los amortiguadores fisiológicos. estos grupos pueden tener carga eléctrica positiva. Como ligeros cambios del pH pueden provocar la desnaturalización de la proteína.) en las cadenas laterales de sus aminoácidos. al ser proteínas. la velocidad de reacción se duplica. de sus cargas eléctricas. La mayoría de los enzimas son muy sensibles a los cambios de pH. amino -NH2. Las reacciones catalizadas por enzimas siguen esta ley general. A mayor tamaño de partícula. mayor velocidad de reacción.  Efecto del tamaño de partícula: Superficie de contacto: A mayor superficie de contacto. Conclusiones Se cumplió el objetivo de la practica al comparar la actividad de la enzima catalasa en diferentes muestras observando su velocidad de reacción. la pepsina gástrica tiene un pH óptimo de 2. habrá un pH en el cual la conformación será la más adecuada para la actividad catalítica .  Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática En general. La temperatura representa uno de los tipos de energía presente en la reacción. Según el pH del medio. determina si esta es exotérmica o endotérmica. a partir de cierta temperatura. tiol -SH. impidiendo su unión al sustrato (inhibidor no competitivo). menor superficie de contacto para la misma cantidad de materia. Sin embargo. Estos inhibidores bien pueden ocupar temporalmente el centro activo por semejanza estructural con el sustrato original (inhibidor competitivo) o bien alteran la conformación espacial del enzima.Este es el llamado pH óptimo. la ureasa lo tiene a pH 7 y la arginasa lo tiene a pH 10. y la actividad enzimática decrece rápidamente hasta anularse. El sentido del flujo de energía entre los miembros de la reacción.  Efecto de los inhibidores sobre la actividad enzimática Ciertas moléculas pueden inhibir la acción catalítica de un enzima: son los inhibidores. Por encima de esta temperatura. mayor velocidad de reacción. negativa o neutra. el aumento de velocidad de la reacción debido a la temperatura es contrarrestado por la pérdida de actividad catalítica debida a la desnaturalización térmica. La superficie de contacto determina el número de átomos y moléculas disponibles para la reacción. donde logramos ver que en un tejido vivo la actividad enzimática de la catalasa es muy rápida.Los enzimas poseen grupos químicos ionizables (carboxilos -COOH. los aumentos de temperatura aceleran las reacciones químicas: por cada 10ºC de incremento. en parte. Así. se empiezan a desnaturalizar por el calor.

influencia en la actividad enzimática ya que se observo mayor velocidad de actividad a temperaturas altas que en temperatura ambiente o bajas.mx/edmedia/material/quimicaII/enzimas.wikipedia. Bibliografia: http://es.com/doc/19002681/actividad-enzimatica genesis.cfm .scribd.org/wiki/Enzima www.uag. En la prueba del efecto de inhibidor se corroboró que al adicionar una especie química con esta función si se evita que la enzima tenga actividad pues después de agregar el inhibidor y realizar la prueba ya no se observo reacción como en los casos que no tenían inhibidor.

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