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prac9 Actividad Enzimatica

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Actividad Enzimática

Practica 9

UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO División De Ciencias Naturales Y Exactas. Departamento de Química. Laboratorio De Fisicoquímica en Biología y Farmacia. QU 30605 RESPONSABLE: Martha Lilia Ramírez Ramírez EQUIPO 1 INTEGRANTES DE EQUIPO:  Bautista García Diana Jessica.  Juárez Pérez Gabriela de Jesús.  Ugalde Estrella Georgina.

La actividad de las enzimas puede ser afectada por otras moléculas. Comparar la actividad de la catalasa de tejidos de organismos vivos. o de un catalizador en general. es decir. por lo tanto. A su vez. . transcurra a mayor velocidad que sin la presencia de la enzima. ni modifican. A las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimáticas. alcanza el equilibrio mucho más deprisa que la correspondiente reacción no catalizada. En estas reacciones.000 reacciones bioquímicas distintas. Las enzimas catalizan alrededor de 4.PRACTICA No. siempre que sean termodinámicamente posibles: Una enzima hace que una reacción química que es energéticamente posible pero que transcurre a una velocidad muy baja. Asimismo. Al igual que ocurre con otros catalizadores. INTRODUCCION Las enzimas son moléculas de naturaleza proteica que catalizan reacciones químicas. Debido a que las enzimas son extremadamente selectivas con sus sustratos y su velocidad crece sólo con algunas reacciones. 2. las enzimas actúan sobre unas moléculas denominadas sustratos. También cabe nombrar unas moléculas sintéticas denominadas enzimas artificiales capaces de catalizar reacciones químicas como las enzimas clásicas. 9 ACTIVIDAD ENZIMATICA OBJETIVOS 1. con un catalizador no proteico. Observar la actividad de la enzima catalasa. pues algunas moléculas de ARN son capaces de catalizar reacciones (como la subunidad 16S de los ribosomas en la que reside la actividadpeptidil transferasa). las cuales se convierten en moléculas diferentes denominadas productos.4 No todos los catalizadores bioquímicos son proteínas. Sin embargo. Examinar los factores que afectan la actividad enzimática. ni alteran su equilibrio químico. Como todos los catalizadores. gran cantidad de enzimas requieren de cofactores para su actividad. Muchas drogas o fármacos son moléculas inhibidoras. esta síntesis depende de la regulación de la expresión génica. el conjunto (set) de enzimas sintetizadas en una célula determina el tipo de metabolismo que tendrá cada célula. las enzimas no son consumidas por las reacciones que catalizan. pero consiguen acelerar el proceso incluso millones de veces. Los inhibidores enzimáticos son moléculas que disminuyen o impiden la actividad de las enzimas. mientras que los activadores son moléculas que incrementan dicha actividad. de forma que se acelera sustancialmente la tasa de reacción. sea cinéticamente favorable. Una reacción que se produce bajo el control de una enzima. 3. el equilibrio de la reacción. las enzimas difieren de otros catalizadores por ser más específicas. Las enzimas no alteran el balance energético de las reacciones en que intervienen. las enzimas funcionan disminuyendo la energía de activación (ΔG‡) de una reacción. Casi todos los procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas.

Algunas enzimas son usadas comercialmente. Comparación de la actividad de la catalasa y el dióxido de manganeso 1. 1 mL de HCl 0. . son ampliamente utilizadas en diversos procesos industriales. 1 = lenta. y otros factores físico-químicos. Coloca una pequeña cantidad de papa fresca en 3 tubos de ensaye.1 M DESARROLLO EXPERIMENTAL En los siguientes experimentos mide la velocidad de reacción de acuerdo a la siguiente escala: 0 = no hay reacción. en la síntesis de antibióticos y productos domésticos de limpieza. 2 = moderada. 2. MATERIAL REQUERIDO 8 tubos de ensaye de 13 x 100 mm 1 agitador de vidrio 2 pipetas graduadas de 5 mL 1 vaso de precipitados de 150 mL 1 gradilla metálica 1 parrilla de calentamiento con agitación REACTIVOS Peróxido de hidrógeno al 3 % Acido clorhídrico 0. Además. destinción de jeans o producción de biocombustibles. por ejemplo. Observaciones y resultados. Efecto del pH sobre la actividad enzimática 1.1 M Cianuro de potasio 0. Registra la velocidad de reacción en cada tubo y compara los resultados obtenidos. 4 = muy rápida. Adiciona a cada tubo 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 % y registra los resultados al cabo de 5 minutos. 2.1 M Hidróxido de sodio 0. Coloca en 4 tubos de ensaye 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 %. PARTE A. 3. Tubo 1 2 3 4 Agregar (1) 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% Agregar (2) Un poco de arena fina Un poco de MnO2 Una porción de papa cruda Una porción de hígado Velocidad 0 3 2 4 PARTE B. la actividad es afectada por la temperatura.1 M al tercer tubo. Usa el agitador y un poco de arena fina para triturar la papa. Agrega a cada tubo las siguientes sustancias: 3. 3 = rápida.Igualmente. la concentración de la propia enzima y del sustrato. el pH. Registra el pH de cada tubo. Agrega 1 mL de agua destilada al primer tubo.1 M al segundo y 1 mL de NaOH 0. como son la fabricación de alimentos.

H a ≈0°C 5 min. durante 5 minutos. Si se observa reacción con efervescencia. Mezcla bien el contenido del tubo. Pon el tubo en un baño de agua hirviendo durante 5 minutos. 2.Observaciones y resultados. ambiente Agregar 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% Observaciones La reacción se observo mas rápida. agrega 3 gotas de KCN 0.1M no se observaron cambios.M a 37°C 5 min. Coloca una pequeña cantidad de papa en un tubo de ensaye y tritura con arena. 4. Coloca uno de los tubos en un baño de agua a 37°C y el otro tubo en un baño de agua helada. Tubo C/papa en B. al agregar el ml de H2O2 al 3% no se observo reacción ni cambio alguno. Observaciones: Cuando se agrego el KCN 0. La reacción fue mínima de cero. 1 ml HCl 0. Coloca una pequeña cantidad de papa en un tubo de ensaye y tritura con arena. Añade 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 %. 3. C/papa a Temp. Efecto de un inhibidor 1. Añade 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 % al tubo y registra los resultados. Agregar una pequeña cantidad de papa triturada a cada tubo.1M 1 ml NaOH 0. Efecto de la temperatura 1.M 5 min. Compara las velocidades de reacción. Tubo c/papa 1 2 3 Agregar (1) 1 ml H2O d.1M pH (1) 5 1 12 Agregar (2) 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% pH (2) 5 1 11 PARTE C. Tubo C/1 ml de H2O2 al 3% en B. 2. C/1 ml de H2O2 al 3% en B. Observaciones y resultados.1 M. Observa y registra los resultados. Coloca en dos tubos de ensaye 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 %. . Agregar Papa triturada Papa triturada Observaciones Se observa reacción con mayor rapidez y más efervescencia. Repite lo anterior pero a temperatura ambiente. PARTE D.

A pesar de que el peróxido de hidrógeno es relativamente estable a temperatura ambiente. Elabora una tabla con los resultados obtenidos y 2. La luz del día también favorece la descomposición del peróxido de hidrógeno. el pH y del inhibidor sobre la velocidad de reacción de la enzima. 4. Describe el efecto del tamaño de partícula.5 4 3.  Efecto del pH sobre la actividad enzimática .5 2 1.5 1 0.5 0 1 c/arena 2 c/MnO2 Velocidad 0 3 2 4 Actividad Enzimatica Serie 1 3 c/papa cruda Tubo 4 c/hígado 3. por lo que debe conservarse en envases opacos.Anotación de los resultados del experimento y discusión 1.5 Velocidad 3 2. de la temperatura. entre otras: metales de transición. Basado en tus anotaciones sobre la velocidad de las reacciones de los experimentos anteriores. y óxidos metálicos. Tubo 1 c/arena 2 c/MnO2 3 c/papa cruda 4 c/hígado 4. elabora un gráfico de barras. álcalis. numerosas sustancias actúan como catalizadores de su descomposición. ¿Puede el peróxido de hidrógeno ser descompuesto por otros catalizadores diferentes de los que se encuentran en los tejidos vivos? Explica.

Se demostró que el pH influye en la actividad enzimática de las proteínas así mismo se comprobó que el factor temperatura es de gran . Estos inhibidores bien pueden ocupar temporalmente el centro activo por semejanza estructural con el sustrato original (inhibidor competitivo) o bien alteran la conformación espacial del enzima. habrá un pH en el cual la conformación será la más adecuada para la actividad catalítica . Como la conformación de las proteínas depende. los aumentos de temperatura aceleran las reacciones químicas: por cada 10ºC de incremento.Los enzimas poseen grupos químicos ionizables (carboxilos -COOH. la ureasa lo tiene a pH 7 y la arginasa lo tiene a pH 10. a partir de cierta temperatura. se empiezan a desnaturalizar por el calor.  Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática En general. menor superficie de contacto para la misma cantidad de materia. al ser proteínas. Según el pH del medio. Así. tiol -SH. Desviaciones de pocas décimas por encima o por debajo del pH óptimo pueden afectar drásticamente su actividad. La mayoría de los enzimas son muy sensibles a los cambios de pH. el aumento de velocidad de la reacción debido a la temperatura es contrarrestado por la pérdida de actividad catalítica debida a la desnaturalización térmica. negativa o neutra. y la actividad enzimática decrece rápidamente hasta anularse. mayor velocidad de reacción. la pepsina gástrica tiene un pH óptimo de 2. Las reacciones catalizadas por enzimas siguen esta ley general.  Efecto de los inhibidores sobre la actividad enzimática Ciertas moléculas pueden inhibir la acción catalítica de un enzima: son los inhibidores. A mayor tamaño de partícula. La temperatura representa uno de los tipos de energía presente en la reacción. estos grupos pueden tener carga eléctrica positiva. la velocidad de reacción se duplica. de sus cargas eléctricas. mayor velocidad de reacción. imidazol. La temperatura a la cual la actividad catalítica es máxima se llama temperatura óptima. El sentido del flujo de energía entre los miembros de la reacción. Sin embargo.  Efecto del tamaño de partícula: Superficie de contacto: A mayor superficie de contacto. impidiendo su unión al sustrato (inhibidor no competitivo). amino -NH2. Por encima de esta temperatura. Conclusiones Se cumplió el objetivo de la practica al comparar la actividad de la enzima catalasa en diferentes muestras observando su velocidad de reacción. Como ligeros cambios del pH pueden provocar la desnaturalización de la proteína. en parte. determina si esta es exotérmica o endotérmica. los seres vivos han desarrollado sistemas más o menos complejos para mantener estable el pH intracelular: Los amortiguadores fisiológicos. etc. donde logramos ver que en un tejido vivo la actividad enzimática de la catalasa es muy rápida. La superficie de contacto determina el número de átomos y moléculas disponibles para la reacción. A mayor temperatura.Este es el llamado pH óptimo.) en las cadenas laterales de sus aminoácidos.

Bibliografia: http://es.scribd.cfm .mx/edmedia/material/quimicaII/enzimas.wikipedia.org/wiki/Enzima www.uag.com/doc/19002681/actividad-enzimatica genesis.influencia en la actividad enzimática ya que se observo mayor velocidad de actividad a temperaturas altas que en temperatura ambiente o bajas. En la prueba del efecto de inhibidor se corroboró que al adicionar una especie química con esta función si se evita que la enzima tenga actividad pues después de agregar el inhibidor y realizar la prueba ya no se observo reacción como en los casos que no tenían inhibidor.

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