Actividad Enzimática

Practica 9

UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO División De Ciencias Naturales Y Exactas. Departamento de Química. Laboratorio De Fisicoquímica en Biología y Farmacia. QU 30605 RESPONSABLE: Martha Lilia Ramírez Ramírez EQUIPO 1 INTEGRANTES DE EQUIPO:  Bautista García Diana Jessica.  Juárez Pérez Gabriela de Jesús.  Ugalde Estrella Georgina.

o de un catalizador en general. Al igual que ocurre con otros catalizadores. gran cantidad de enzimas requieren de cofactores para su actividad. También cabe nombrar unas moléculas sintéticas denominadas enzimas artificiales capaces de catalizar reacciones químicas como las enzimas clásicas.PRACTICA No. Las enzimas catalizan alrededor de 4. A las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimáticas. sea cinéticamente favorable. 3. es decir. Una reacción que se produce bajo el control de una enzima. las enzimas actúan sobre unas moléculas denominadas sustratos. Comparar la actividad de la catalasa de tejidos de organismos vivos. Debido a que las enzimas son extremadamente selectivas con sus sustratos y su velocidad crece sólo con algunas reacciones. ni modifican. Muchas drogas o fármacos son moléculas inhibidoras. alcanza el equilibrio mucho más deprisa que la correspondiente reacción no catalizada. las enzimas no son consumidas por las reacciones que catalizan. las enzimas difieren de otros catalizadores por ser más específicas. Observar la actividad de la enzima catalasa. . A su vez. las cuales se convierten en moléculas diferentes denominadas productos. Como todos los catalizadores. las enzimas funcionan disminuyendo la energía de activación (ΔG‡) de una reacción. pero consiguen acelerar el proceso incluso millones de veces. con un catalizador no proteico.000 reacciones bioquímicas distintas. Examinar los factores que afectan la actividad enzimática. INTRODUCCION Las enzimas son moléculas de naturaleza proteica que catalizan reacciones químicas. En estas reacciones. Asimismo. 9 ACTIVIDAD ENZIMATICA OBJETIVOS 1. ni alteran su equilibrio químico. 2. transcurra a mayor velocidad que sin la presencia de la enzima.4 No todos los catalizadores bioquímicos son proteínas. el equilibrio de la reacción. el conjunto (set) de enzimas sintetizadas en una célula determina el tipo de metabolismo que tendrá cada célula. mientras que los activadores son moléculas que incrementan dicha actividad. Casi todos los procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas. de forma que se acelera sustancialmente la tasa de reacción. La actividad de las enzimas puede ser afectada por otras moléculas. esta síntesis depende de la regulación de la expresión génica. siempre que sean termodinámicamente posibles: Una enzima hace que una reacción química que es energéticamente posible pero que transcurre a una velocidad muy baja. Sin embargo. por lo tanto. pues algunas moléculas de ARN son capaces de catalizar reacciones (como la subunidad 16S de los ribosomas en la que reside la actividadpeptidil transferasa). Las enzimas no alteran el balance energético de las reacciones en que intervienen. Los inhibidores enzimáticos son moléculas que disminuyen o impiden la actividad de las enzimas.

2 = moderada. Coloca en 4 tubos de ensaye 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 %. la concentración de la propia enzima y del sustrato. 2. destinción de jeans o producción de biocombustibles. PARTE A. Además. Comparación de la actividad de la catalasa y el dióxido de manganeso 1. por ejemplo. Tubo 1 2 3 4 Agregar (1) 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% Agregar (2) Un poco de arena fina Un poco de MnO2 Una porción de papa cruda Una porción de hígado Velocidad 0 3 2 4 PARTE B.1 M DESARROLLO EXPERIMENTAL En los siguientes experimentos mide la velocidad de reacción de acuerdo a la siguiente escala: 0 = no hay reacción. Efecto del pH sobre la actividad enzimática 1. y otros factores físico-químicos. 2. Adiciona a cada tubo 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 % y registra los resultados al cabo de 5 minutos. Agrega 1 mL de agua destilada al primer tubo. Usa el agitador y un poco de arena fina para triturar la papa. . Coloca una pequeña cantidad de papa fresca en 3 tubos de ensaye. Registra la velocidad de reacción en cada tubo y compara los resultados obtenidos.1 M al segundo y 1 mL de NaOH 0. Registra el pH de cada tubo. Observaciones y resultados.1 M Hidróxido de sodio 0. MATERIAL REQUERIDO 8 tubos de ensaye de 13 x 100 mm 1 agitador de vidrio 2 pipetas graduadas de 5 mL 1 vaso de precipitados de 150 mL 1 gradilla metálica 1 parrilla de calentamiento con agitación REACTIVOS Peróxido de hidrógeno al 3 % Acido clorhídrico 0. son ampliamente utilizadas en diversos procesos industriales. 3. Algunas enzimas son usadas comercialmente.1 M al tercer tubo.Igualmente. Agrega a cada tubo las siguientes sustancias: 3. la actividad es afectada por la temperatura. 1 mL de HCl 0. el pH. como son la fabricación de alimentos. en la síntesis de antibióticos y productos domésticos de limpieza. 1 = lenta. 4 = muy rápida.1 M Cianuro de potasio 0. 3 = rápida.

durante 5 minutos. Observaciones y resultados. al agregar el ml de H2O2 al 3% no se observo reacción ni cambio alguno. agrega 3 gotas de KCN 0. C/papa a Temp. Agregar Papa triturada Papa triturada Observaciones Se observa reacción con mayor rapidez y más efervescencia. Observa y registra los resultados. Coloca en dos tubos de ensaye 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 %. Mezcla bien el contenido del tubo.M a 37°C 5 min. PARTE D. Coloca una pequeña cantidad de papa en un tubo de ensaye y tritura con arena. Añade 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 %.M 5 min. C/1 ml de H2O2 al 3% en B. 1 ml HCl 0. Tubo C/papa en B. Si se observa reacción con efervescencia. Añade 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 % al tubo y registra los resultados. Tubo C/1 ml de H2O2 al 3% en B. Pon el tubo en un baño de agua hirviendo durante 5 minutos.1M 1 ml NaOH 0. Tubo c/papa 1 2 3 Agregar (1) 1 ml H2O d. Coloca uno de los tubos en un baño de agua a 37°C y el otro tubo en un baño de agua helada. Agregar una pequeña cantidad de papa triturada a cada tubo. Efecto de un inhibidor 1.1 M. Coloca una pequeña cantidad de papa en un tubo de ensaye y tritura con arena. . La reacción fue mínima de cero.Observaciones y resultados. Repite lo anterior pero a temperatura ambiente. 2. 2.1M no se observaron cambios. Compara las velocidades de reacción. 3. ambiente Agregar 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% Observaciones La reacción se observo mas rápida.H a ≈0°C 5 min. 4. Observaciones: Cuando se agrego el KCN 0. Efecto de la temperatura 1.1M pH (1) 5 1 12 Agregar (2) 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% 1 ml de H2O2 al 3% pH (2) 5 1 11 PARTE C.

el pH y del inhibidor sobre la velocidad de reacción de la enzima. de la temperatura. Tubo 1 c/arena 2 c/MnO2 3 c/papa cruda 4 c/hígado 4. entre otras: metales de transición.5 Velocidad 3 2. elabora un gráfico de barras.  Efecto del pH sobre la actividad enzimática . La luz del día también favorece la descomposición del peróxido de hidrógeno. 4.5 1 0.5 2 1. A pesar de que el peróxido de hidrógeno es relativamente estable a temperatura ambiente. Basado en tus anotaciones sobre la velocidad de las reacciones de los experimentos anteriores. álcalis.5 4 3. numerosas sustancias actúan como catalizadores de su descomposición. Elabora una tabla con los resultados obtenidos y 2.Anotación de los resultados del experimento y discusión 1. Describe el efecto del tamaño de partícula.5 0 1 c/arena 2 c/MnO2 Velocidad 0 3 2 4 Actividad Enzimatica Serie 1 3 c/papa cruda Tubo 4 c/hígado 3. por lo que debe conservarse en envases opacos. ¿Puede el peróxido de hidrógeno ser descompuesto por otros catalizadores diferentes de los que se encuentran en los tejidos vivos? Explica. y óxidos metálicos.

menor superficie de contacto para la misma cantidad de materia. impidiendo su unión al sustrato (inhibidor no competitivo). Sin embargo. A mayor temperatura. se empiezan a desnaturalizar por el calor. La temperatura representa uno de los tipos de energía presente en la reacción. estos grupos pueden tener carga eléctrica positiva. La superficie de contacto determina el número de átomos y moléculas disponibles para la reacción.  Efecto de los inhibidores sobre la actividad enzimática Ciertas moléculas pueden inhibir la acción catalítica de un enzima: son los inhibidores.  Efecto del tamaño de partícula: Superficie de contacto: A mayor superficie de contacto. Estos inhibidores bien pueden ocupar temporalmente el centro activo por semejanza estructural con el sustrato original (inhibidor competitivo) o bien alteran la conformación espacial del enzima. etc. habrá un pH en el cual la conformación será la más adecuada para la actividad catalítica . la pepsina gástrica tiene un pH óptimo de 2. La mayoría de los enzimas son muy sensibles a los cambios de pH. Se demostró que el pH influye en la actividad enzimática de las proteínas así mismo se comprobó que el factor temperatura es de gran . tiol -SH. Como ligeros cambios del pH pueden provocar la desnaturalización de la proteína. imidazol. a partir de cierta temperatura. los seres vivos han desarrollado sistemas más o menos complejos para mantener estable el pH intracelular: Los amortiguadores fisiológicos. determina si esta es exotérmica o endotérmica. el aumento de velocidad de la reacción debido a la temperatura es contrarrestado por la pérdida de actividad catalítica debida a la desnaturalización térmica. al ser proteínas. de sus cargas eléctricas. mayor velocidad de reacción. Según el pH del medio. Por encima de esta temperatura. La temperatura a la cual la actividad catalítica es máxima se llama temperatura óptima. amino -NH2. mayor velocidad de reacción. Las reacciones catalizadas por enzimas siguen esta ley general. la ureasa lo tiene a pH 7 y la arginasa lo tiene a pH 10.Este es el llamado pH óptimo. negativa o neutra. Desviaciones de pocas décimas por encima o por debajo del pH óptimo pueden afectar drásticamente su actividad. los aumentos de temperatura aceleran las reacciones químicas: por cada 10ºC de incremento. Así. donde logramos ver que en un tejido vivo la actividad enzimática de la catalasa es muy rápida. Como la conformación de las proteínas depende.) en las cadenas laterales de sus aminoácidos. El sentido del flujo de energía entre los miembros de la reacción. la velocidad de reacción se duplica. A mayor tamaño de partícula. en parte. Conclusiones Se cumplió el objetivo de la practica al comparar la actividad de la enzima catalasa en diferentes muestras observando su velocidad de reacción.  Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática En general.Los enzimas poseen grupos químicos ionizables (carboxilos -COOH. y la actividad enzimática decrece rápidamente hasta anularse.

cfm .com/doc/19002681/actividad-enzimatica genesis.uag.wikipedia. Bibliografia: http://es.scribd.mx/edmedia/material/quimicaII/enzimas. En la prueba del efecto de inhibidor se corroboró que al adicionar una especie química con esta función si se evita que la enzima tenga actividad pues después de agregar el inhibidor y realizar la prueba ya no se observo reacción como en los casos que no tenían inhibidor.influencia en la actividad enzimática ya que se observo mayor velocidad de actividad a temperaturas altas que en temperatura ambiente o bajas.org/wiki/Enzima www.

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