Laboratorio 6: “Análisis de glucosa, y creatinina”

Laboratorio 7: “BIOQUÍMICA CLÍNICA – II:

ANÁLISIS DE COLESTEROL, TRIACILGLICÉRIDOS Y
ALBÚMINA”

nombre:
★ Traecy Brockway C.
Carrera: Odontología
Asignatura: Bioquímica
Docente: Livia Mettifogo
Fecha:23/01/19

Introducción
¿Que es la glucosa?
La glucosa es la principal fuente de energía necesaria para asegurar el buen funcionamiento de las
células del organismo. Estas necesitan energía para estar en activo, mantener las funciones vitales (el
latido cardíaco, los movimientos digestivos, la respiración...), la temperatura corporal y los movimientos
musculares. De alguna manera, se podría decir que la glucosa es para el cuerpo humano como la
gasolina para un coche, ya que aporta la energía suficiente para desarrollar con normalidad la actividad
diaria.(1)
Cuando tiene diabetes, es posible que tenga niveles altos de azúcar en la sangre (hiperglucemia) o
niveles bajos de azúcar en la sangre (hipoglucemia) .(2)
El método para determinar la cantidad de glucosa en la muestra se basa en las siguientes reacciones
químicas:
La glucosa de la sangre es transformada por la enzima glucosa oxidasa, en presencia del oxígeno del
aire y se transforma en gluconolactona, desprendiéndose también peróxido de hidrógeno. Este
peróxido de hidrógeno, en presencia de la enzima peroxidasa, oxida a la 4 aminofenazona y el fenol,
obteniéndose 4-(p-benzoquinona-monoimino)fenazona. Esta sustancia formada le brinda un cierto color
a la reacción. La intensidad de dicho color es medido por fotometría, y es directamente proporcional a la
concentración de glucosa que estaba presente en el suero o plasma.(3)

¿Que es la creatinina?
La creatinina es una sustancia que se produce en el organismo humano como resultado de la
degradación de la creatina, un compuesto químico derivado de aminoácidos tales como arginina, glicina
y metionina, cuya estructur molecular es muy parecida a ellos.La creatinina es un producto de desecho
en la sangre. Viene de proteína en su dieta y la descomposición normal de los músculos de su cuerpo.
La creatinina se elimina de la sangre por los riñones y luego sale del cuerpo en la orina. Si tiene
enfermedad de los riñones, el nivel de creatinina en la sangre aumenta.Los análisis de suero y de orina
pueden determinar sus niveles de creatinina. Las pruebas se realizan para comprobar qué tan bien
están funcionando sus riñones.(4)
¿Que es el colesterol?
El colesterol es una sustancia cerosa y parecida a la grasa que se encuentra en todas las células de su
cuerpo. Su cuerpo necesita algo de colesterol para producir hormonas, vitamina D y sustancias que le
ayuden a digerir los alimentos. Su cuerpo produce todo el colesterol que necesita. El colesterol también
se encuentra en alimentos de origen animal, como yemas de huevo, carne y queso.(5)

Si tiene demasiado colesterol en la sangre, puede combinarse con otras sustancias en la sangre para
formar placa. La placa se pega a las paredes de sus vasos sanguíneos. Esta acumulación se llama
arterioesclerosis. Puede provocar enfermedad de las arterias coronarias, la que puede estrecharse o
incluso bloquearlas.El método para la determinación del colesterol consiste en oxidar el colesterol
después de la hidrólisis enzimática.(5)

¿Qué son los triglicéridos?

Los triglicéridos son un tipo de grasa. Son el tipo más común de grasa en su cuerpo. Provienen de
alimentos, especialmente mantequilla, aceites y otras grasas que usted come. Los triglicéridos también
provienen de calorías adicionales. Estas son las calorías que usted come pero que su cuerpo no
necesita de inmediato.(6)

Su cuerpo cambia estas calorías adicionales en triglicéridos, y los almacena en las células de grasa.
Cuando su cuerpo necesita energía, libera los triglicéridos. Sus partículas de lipoproteína de muy baja
densidad llevan los triglicéridos a sus tejidos.(6)

Tener un alto nivel de triglicéridos puede aumentar el riesgo de enfermedades del corazón, como la
enfermedad de las arterias coronarias.(6)

¿Cómo se diagnostican los triglicéridos altos?

Existe una prueba de sangre que mide sus triglicéridos, junto a su colesterol. Los niveles de triglicéridos
se miden en miligramos por decilitro (mg/dL). Las pautas para los niveles de triglicéridos son:(6)

Categoría Nivel de triglicéridos

 Normal Menos de 150mg/dL
Límite alto 150 a 199 mg/dL
Alto 200 a 499 mg/dL
Muy alto 500 mg/dL y más

Niveles superiores a 150 mg/dL pueden aumentar su riesgo de enfermedad cardíaca. Un nivel de
triglicérido de 150 mg/dL o más es también un factor de riesgo para el síndrome metabólico.(6)

¿Que es la albúmina?

La albúmina es una proteína que se encuentra en gran proporción en el plasma sanguíneo, siendo la
principal proteína de la sangre, y una de las más abundantes en el ser humano. Se sintetiza en el
hígado.(7)
La concentración normal en la sangre humana oscila entre 3,5 y 5,0 gramos por decilitro,y supone un
54,31 % de la proteína plasmática. El resto de proteínas presentes en el plasma se llaman en conjunto
globulinas. La albúmina es fundamental para el mantenimiento de la presión oncótica, necesaria para la
distribución correcta de los líquidos corporales entre el compartimento intravascular y el extravascular,
localizado entre los tejidos.(7)
Tipos de albúmina
● Seroalbúmina: Es la proteína del suero sanguíneo.
● Ovoalbúmina: Es la albúmina más abundante de la clara del huevo.
● Lactalbúmina: Es la albúmina de la leche.
● Conalbúmina u ovotransferrina: constituye en torno al 13 % de la clara del huevo. Tiene una
gran afinidad por el hierro.
Funciones:
● Mantenimiento de la presión oncótica.
● Transporte de hormonas tiroideas.
● Transporte de hormonas liposolubles.
● Transporte de ácidos grasos libres. (Esto es, no esterificados)
● Transporte de bilirrubina no conjugada.
● Transporte de muchos fármacos y drogas.
● Unión competitiva con iones de calcio.
● Control del pH.
● Funciona como un transportador de la sangre y lo contiene el plasma.
● Regulador de líquidos extracelulares, efecto Donnan.

Objetivo Glucosa
1. OBJETIVO GENERAL
● Determinar la concentración de glucosa en una muestra de sangre o un estándar.
1. OBJETIVOS ESPECÍFICOS
 ● Identificar reacciones bioquímicas que caracterizan la determinación de la
concentración glucosa desde muestras biológica.
● Manipular según protocolo insumos de kits para la determinación glucosa.

Objetivo creatinina
1. OBJETIVO GENERAL
● Determinar la concentración de creatinina en una muestra biológica.
2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS
● Identificar reacciones bioquímicas que caracterizan la determinación de la
concentración creatinina desde muestras biológica.
● Manipular según protocolo insumos de kits para la determinación creatinina.

Objetivo análisis del colesterol

1.- OBJETIVO GENERAL
● Determinar la concentración de colesterol en muestras biológicas por método
enzimático-colorimétrico.
2.- OBJETIVOS ESPECÍFICOS
● Identificar las reacciones bioquímicas que caracterizan la determinación de la
concentración colesterol desde muestras biológica.
● Manipular según protocolo los insumos de kits para la determinación de colesterol
en muestra biológica.

Objetivo análisis de triglicéridos

1.- OBJETIVO GENERAL
● Determinar la concentración de triacilglicéridos en muestras biológicas por método
enzimático-colorimétrico.
2.- OBJETIVOS ESPECÍFICOS
● Identificar las reacciones bioquímicas que caracterizan la determinación de la
concentración triacilglicéridos desde muestras biológica.
● Manipular según protocolo los insumos de kits para la determinación de lípidos en
muestra biológica.

Objetivo análisis de albúmina

1.- OBJETIVO GENERAL
● Determinar la concentración de albúmina en muestras biológicas por método
colorimétrico.
2.- OBJETIVOS ESPECÍFICOS
● Identificar las reacciones bioquímicas que caracterizan la determinación de la
concentración albúmina desde muestras biológica.
 ● Manipular según protocolo los insumos de kits para la determinación de albúmina
en muestra biológica.

Procedimiento experimental análisis de glucosa

● Se prepararon tres tubos como indica la tabla.

● Luego se adicionan las concentraciones de reactivos a cada tubo de ensayo
antes de llevarlos a la centrífuga.
● RGT: glucosa oxidasa,ácido glucónico , peroxido de hidrogeno y fenol.
Tabla concentraciones
Tubo 1: Tubo 2: Tubo 3:
 Blanco Estándar Muestra(humatrol)
Glucosa - 10 μL glucosa 10μL umatrol
RGT 1000μL RGT 1000μL RGT 1000μL RGT

● Una vez agregadas las adecuadas cantidades respectivas de solución a

cada tubo de ensayo se llevan los tubos al baño termorregulado en donde se
dejan a 37° por 5 minutos.
● Luego de haber transcurrido el tiempo se retiran los tubos del baño
termorregulado.
● Se transfirió la muestras de cada tubo a una cubeta del espectrofotómetro,
para su posterior medición de absorbancia a 530 nm.

Resultados:

Tabla de resultados absorbancia glucosa

Tubo 1: Blanco Tubo 2: Estándar Tubo 3: Muestra

0 0.249 0.221

● Luego de tener los valores de absorbancia se reemplazan estos valores en la

siguiente forma para saber la concentración de glucosa en la muestra.
 ● Concentración glucosa = 100 x ▲A(de la muestra) (mg/dl)
▲A(del standard)

● Concentración glucosa: 100 x Ab muestra(0.221) = 88,7 (mg/dl)

Ab estándar(0,249)

R: La concentración de glucosa en la muestra dio como resultado utilizando la fórmula

de 88,7 (mg/dl+)

Discusión análisis de la glucosa

● Los resultados de absorbancia obtenidos por el espectrofotómetro permitieron
medir la concentración de glucosa en la sangre la cual da como resultado
utilizando la fórmula de 88,7 (mg/dl+) ,en donde este resultado representa un valor
normal de glucosa en la sangre ya que los valores normales van de 75-115 mg/dL.
(8)

Procedimiento experimental análisis creatinina

● Se preparó 4 tubos de ensayo y se rotulan.
● Cantidad de reactivos que se deben adicionar a cada uno de los tubos de ensayo
antes de llevar al baño termorregulado.
● RGT: Acido picrico
Tabla concentraciones

Tubo 1: Tubo 2: Tubo 3:

Blanco Estándar Muestra(humatrol)
creatinina - 100 μL 100μL umatrol
creatinina
 RGT 1000μL RGT 1000μL RGT 1000μL RGT

● Luego se preparó el espectrofotómetro para poder medir la absorbancia de cada

tubo de ensayo transfiriendo las muestras de cada tubo a una cubeta respectiva.
● Para su posterior medición de absorbancia a 510 nm.
● Una vez medida la absorbancia a los 30 segundos se esperó 2 minutos y se
vuelve a medir la absorbancia de nuevo para conocer la real absorbancia de las los
tubos de ensayos.

Resultados:
Tabla resultados absorbancia creatinina

Tubo 1: Blanco Tubo 2: Estándar Tubo 3: muestra

0 0,007 0.094
0 0.031 0.100
0 0.024(absorbancia real) 0,006(absorbancia real)

● Se mide dos veces la absorbancia ya que a la segunda vez de

medirla se sabe el valor real.
 ● Luego se reemplazan estos valores en la siguiente fórmula para
saber la concentración de creatinina en la muestra.

Calcular:
▲A(estándar) = Aestandar - Ablanco
▲A(muestra) = Amuestra - Ablanco

Creatinina (suero ó plasma) = 2 x ▲A(muestra) mg/dl

▲A(estándar)

Creatinina (suero ó plasma) = 2 x 0,006 = 0,5 mg/dl(absorbancia real)

0,024

R: La concentración de creatinina en el plasma sanguíneo utilizando la

fórmula con los datos anteriores dieron como resultado 0,5 (mg/dl) en el caso
del plasma.
Discusión análisis creatinina
● Los resultados de absorbancia obtenidos por el espectrofotómetro permitieron
medir la concentración de creatinina en el plasma sanguíneo dando como
resultado 0,5 mg/dl , en donde se puede inferir que es una mujer ya que las
concentraciones normales de plasma son de 0.6-1.1 mg/dl.(9)

Procedimiento experimental analisis colesterol

● se prepararon 3 tubos de ensayo y se rotularon y luego se adicionan las cantidades
de reactivos como se muestra en la tabla.
● (RGT1)El indicador en este caso es la quinoneimina formada a partir del peróxido
de hidrógeno y la 4-aminofenazona en presencia de fenol y peroxidasa

Tabla de Cantidades de reactivos que se deben adicionar a cada uno de los tubos.

Tubos Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3

(blanco:B) (estándar:STD) (muestra humatrol)
colesterol --------- 10μL 10μL
(RGT1) 1000μL 1000μL 1000μL

● Luego se mezcló cuidadosamente cada tubo para llevarlo al baño termorregulado

a 37° por 5 minutos.
● Después se preparó el espectrofotómetro para medir la absorbancia a 500 nm.
● se colocó el contenido de cada tubo en una celda para espectrofotómetro.
● Luego se realizó la lectura en el espectrofotómetro.
● Considerando que las muestras de suero/plasma son lineales hasta una
concentración de 750 mg/dL, si la concentración es mayor se diluye la muestra con
suero fisiológico en proporción 1 + 2 y luego se multiplica el valor de la
absorbancia por 3
Resultados:

Tabla resultados absorbancia colesterol

Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3

(blanco:B) (estándar:STD) (muestra humatrol)

0 0,371 0,258

● Una vez obtenidos los resultados de absorbancia se Calcula el contenido de

colesterol en la muestra con la siguiente relación de las absorbancias obtenidas:
● calcule:
▲A(estándar) = Aestandar - Ablanco
▲A(muestra) = Amuestra - Ablanco

Concentración de colesterol = A(muestra) x 200(mg/dL)

A(estándar)

colesterol: 0,258 x 200 = 139,0(mg/dL)

0,371
R:La concentración de colesterol utilizando la fórmula con los datos anteriores
dieron como resultado 139,0(mg/dL).

Discusion analisis de colesterol

● Los resultados de absorbancia obtenidos por el espectrofotómetro permitieron

medir la concentración de colesterol en la sangre dando como resultado
139,0(mg/dL) el cual es un valor deseable dentro de los niveles de colesterol en la
 sangre ya que debe ser menor de 200 mg/dL para que la persona se encuentra
sana.(10)

Procedimiento experimental triglicéridos

● Se prepararon 3 tubos de ensayo y se rotularon y luego se adicionan las
cantidades de reactivos como se muestra en la tabla.
● (RGT1)= glicerol kinasa,glicerol fosfato quinasa y lipasas

Tabla de Cantidades de reactivos que se deben adicionar a cada uno de los tubos.

Tubos Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3

(blanco:B) (estándar:STD) (muestra humatrol)
triglicéridos --------- 10μL 10μL
(RGT1) 1000μL 1000μL 1000μL

● Luego se mezcló cuidadosamente cada tubo para llevarlo al baño termorregulado

a 37° por 5 minutos.
● Después se preparó el espectrofotómetro para medir la absorbancia a 500 nm.
 ● se colocó el contenido de cada tubo en una celda para espectrofotómetro.
● Luego se realizó la lectura en el espectrofotómetro.
● Considerando hacer la lectura de las tres celdas en el espectrofotómetro. se tuvo
en cuenta que las muestras de suero/plasma son lineales hasta una concentración
de 100mg/dL, si la concentración es mayor diluya la muestra con suero fisiológico
en proporción 1 + 4 y luego se multiplicó el valor de la absorbancia por 5.

Resultados:
Tabla resultados absorbancia triglicéridos

Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3

(blanco:B) (estándar:STD) (muestra)

0 0,171 0,138

● Una vez obtenidos los resultados de absorbancia se Calcula el contenido de

triacilglicéridos en la muestra con la siguiente relación de las absorbancias
obtenidas:

● calcule:
▲A(estándar) = Aestandar - Ablanco
▲A(muestra) = Amuestra - Ablanco

Concentración de triglicéridos = A(muestra) x 200(mg/dL)

A(estándar)

Triglicéridos = 200 x 0,138 = 161,1 mg/dl(absorbancia real)

0,171
R:La concentración de triglicéridos en la sangre utilizando la fórmula con los
datos anteriores dieron como resultado 161,1(mg/dl)

Discusión análisis triglicéridos

● Los resultados de absorbancia obtenidos por el espectrofotómetro permitieron
medir la concentración de triglicéridos en la sangre dando como resultado
161,1(mg/dl) ,en donde este resultado representa un valor sospechoso ya que
lo mantiene en el límite alto de concentración de triglicéridos que van de 150 a 199
mg/dL.(11)
Procedimiento experimental albúmina
● Se prepararon 3 tubos de ensayo y se rotularon y luego se adicionan las
cantidades de reactivos como se muestra en la tabla.
● (RGT1 bromo cresol)

Tabla de Cantidades de reactivos que se deben adicionar a cada uno de los tubos.

Tubos Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3

(blanco:B) (estándar:STD) (muestra humatrol)
Albúmina --------- 10μL 10μL
(RGT1 bromo cresol) 1000μL 1000μL 1000μL

● Después se preparó el espectrofotómetro para medir la absorbancia a 546-578 nm.

● Se colocó el contenido de cada tubo en una celda para espectrofotómetro.
● Luego se realizó la lectura en el espectrofotómetro.
● Considerando que las muestras de suero/plasma son lineales hasta una
concentración de 7 g/dL o 70 g/L si la concentración es mayor diluya la muestra
con suero fisiológico en proporción 1 + 1 y luego se multiplica el valor de la
absorbancia por 2.
 ● Resultados
Tabla resultados absorbancia albúmina

Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3

(blanco:B) (estándar:STD) (muestra)

0 0,387 0.287

● Una vez obtenidos los resultados de absorbancia se Calcula el contenido de

albúmina en la muestra con la siguiente relación de las absorbancias.
● calcule:
▲A(estándar) = Aestandar - Ablanco
▲A(muestra) = Amuestra - Ablanco

Concentración de albúmina = A(muestra) x 4(g/dL)

A(estándar)
concentración albúmina = 0.287 x 4 = 2.9(g/dL)
0,387

R:La concentración de albúmina en la sangre utilizando la fórmula con los

datos anteriores dieron como resultado 2.9 (g/dL)

Discusión albúmina
● Los resultados de absorbancia obtenidos por el espectrofotómetro permitieron
medir la concentración de albúmina en la sangre dando como resultado 2.9 (g/dL),
en donde este resultado representa un valor bajo de albúmina en la sangre ya que
El rango normal es de 3.4 a 5.4 g/dL, esta baja de concentración de triglicéridos en
la sangre se puede deber a distintos problemas como :Enfermedad del hígado,
como cirrosis ,enfermedad de los riñones ,desnutrición ,infección ,enfermedad
inflamatoria intestinal o Enfermedad tiroidea.(12)
 Conclusión
● Mediante el experimento se pudo medir las distintas concentraciones de
glucosa,creatinina,colesterol,triglicéridos y albúmina en la sangre por medio de el
espectrofotómetro dando resultados que fueron analizados con sus respectivos
estándares de medición para tener una referencia de los valores adecuados para
cada una de los experimentos.
 Bibliografía
● https://quierocuidarme.dkvsalud.es/salud-para-
todos/glucosa-que-es (1)
● https://www.northshore.org/healthresources/encyclopedia/e
ncyclopedia.aspx?DocumentHwid=tm7018&Lang=es-us (2)
● https://quimica.laguia2000.com/enlaces-
quimicos/dosificacion-de-glucosa-en-sangre (3)
● https://medlineplus.gov/spanish/creatinine.html (4)
● https://medlineplus.gov/spanish/cholesterol.html (5)
● https://medlineplus.gov/spanish/triglycerides.html (6)
● https://es.wikipedia.org/wiki/Alb%C3%BAmina (7)
● Glucose liquicolor (8)
● Creatinine liquicolor (9)
● https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-
laboratorio/niveles-de-colesterol/ (10)
● https://medlineplus.gov/spanish/triglycerides.html (11)
● https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-
laboratorio/prueba-de-albumina-en-la-sangre/ (12)