ANEXO 3

Curso: Cromatografía
Código: 401542A_614

Nombre de la Tarea: Tarea 3 – Técnicas específicas

Temáticas a desarrollar:
- Cromatografía iónica: generalidades, equilibrios en el intercambio iónico,
intercambiadores iónicos y aplicaciones.
- Cromatografía de fluidos supercríticos: generalidades, fase estacionaria, fase
móvil, instrumentación: sistemas de muestreo, condiciones, detectores;
eficiencia, resolución y aplicaciones.

Fecha de desarrollo: 31 de octubre al 27 de noviembre de 2019

Nombre del estudiante: Melissa Marulanda Ramos

Código: 1032395201
Programa: Ingeniería de Alimentos

EJERCICIO 1 – CROMATOGRAFÍA IÓNICA

Tabla 1. Ejercicio 1.1 – Generalidades de la cromatografía iónica

Oraciones
a. Cromatografía de intercambio aniónico.
b. Cromatografía de intercambio catiónico.
c. Intercambiadores iónicos.
d. La relación carga y fuerza del soluto es mayor.
e. Matriz aniónica.
f. Matriz catiónica.
g. Resina.
h. Solución amortiguadora de pH.

Mapa conceptual

Solución amortiguadora de pH Estructura porosa e

insoluble (resinas)

intercambiadores
iónicos

Matriz negativamente Matriz positivamente

Su relación
carga/masa es mayor Cromatografía de Cromatografía
intercambio catiónico Intercambio aniónico
 Tabla 2. Ejercicio 1.1 – Generalidades de la cromatografía iónica
Afirmación
Según la influencia del pH, los
intercambiadores iónicos pueden
ser débiles o fuertes.
La cromatografía iónica se
caracteriza por su reversibilidad.
La reacción que representa el
equilibrio en cromatografía de
intercambio aniónico es:
R+A- + B+  R+B- + A+
F V Argumento
Respuesta:
Fuertes: sus grupos están totalmente
ionizados en un amplio rango de pH (más
básico en catiónicos y más ácido en
aniónicos), de forma que su actividad o
capacidad de intercambio se mantiene al
V máximo en todo ese r Débiles: sus grupos
están ionizados en un rango de pH más
estrecho. La disociación, que define su
carga y por tanto su capacidad de
intercambio, varía mucho con el pH.
Respuesta:
Están asociados a iones de carga opuesta
o contraiones (A-); la asociación reversible
de éstos se intercambia y está en equilibrio
V con la de moléculas de los solutos de su
misma carga presentes en la muestra (B-)
Respuesta:
Ecuación
La reacción que representa el
equilibrio en cromatografía de
F Res+A- + B-  Res+B- + A-
intercambio aniónico es:
R+C- + B+  R+B- + C+
La fase estacionaria consta de
intercambiadores iónicos (Res+), que son
Donde, R representa la resina, A grupos cargados unidos covalentemente a
y C el ion de la fase móvil, y B la un soporte o matriz.
carga del soluto.
Referencias bibliográficas:
- Doria, G. (2013). Introducción general a la Cromatografía. En Módulo Cromatografía
(pp. 47-49). Bogotá, Colombia. UNAD - Universidad Nacional Abierta y a Distancia.
Recuperado el 23 de mayo de 2019 de http://hdl.handle.net/10596/9904

Tabla 3. Ejercicio 1.2 – Análisis de nitritos y nitratos

Pregunta Respuesta
¿Por qué para la muestra del Respuesta:
Jamón no se logró obtener una
Para la muestra de jamón no dio niveles de
concentración de nitrato y nitrito?
nitritos y nitratos que se aproximaran a los
máximos permitidos.
Muestra Nivel permisible
NO−¿¿
2 NO−¿¿
3

Salami 3,7 mg por kg de peso 0,06 mg por kg de

corporal por día. peso corporal por
día
Cábano
Jamón
EJERCICIO 2 – CROMATOGRAFÍA DE FLUIDOS SUPERCRÍTICOS

Tabla 4. Ejercicio 2.1 – Fluidos supercríticos

Pregunta Respuesta
La extracción se realiza sin cambios de fase,
¿Por qué la cromatografía de simplemente variando de las condiciones de
fluidos supercríticos es un técnica presión y/o temperatura de los fluidos súper
en fase normal? críticos.

Respuesta:

¿Qué es temperatura crítica? Es aquella a partir de la cual una sustancia no

¿Qué es presión crítica?
puede existir en fase líquida, independientemente
de la presión.
Respuesta:
Máxima presión a la cual un líquido puede ser
convertido en un gas por incremento de la
temperatura.

Referencias bibliográficas:
- Santamaría, M. R. (2003). Extracción con fluidos supercríticos. En Industria
 alimentaria: tecnologías emergentes. (pp. 129-136;140-141; 162-163) Barcelona,
ES: Universitat Politécnica de Catalunya.
- LIDIA CON LA QUÍMICA. (octubre de 2019). Obtenido de
https://lidiaconlaquimica.wordpress.com/tag/cromatografia-de-fluidos-supercriticos/

Relación de conceptos
Cuando en la fase móvil está compuesta por un fluido supercrítico que está por
debajo de su presión crítica y por encima de su temperatura critica, actúa como
un líquido.

Cuando en la fase móvil está compuesta por un fluido supercrítico que está por
encima de su presión crítica y por debajo de su temperatura critica, actúa como
un gas.

Tabla 5. Ejercicio 2.1 – Tipos de columna en cromatografía de fluidos supercríticos

Tipos de Longitud Material Características
columna
Respuesta: Respuesta: Respuesta:
Recubrimientos
internos (de un
10 a los 20 m y Sílice fundida
espesor de 0’05 a 1
diámetros
μm) de varios tipos de
Capilar o tubular internos que
siloxanos enlazados o
oscilan entre 50 y
entrecruzados,
100 μm.
similares a las
empleadas en
cromatografía de
gases.
De relleno o Respuesta: Respuesta: Respuesta:
empaquetadas
 Son semejantes a las
empleadas en
10 a 25 cm de Acero inoxidable
cromatografía de
largo, diámetros
reparto y
que varían entre
proporcionan más
0’5 y 5 mm y
platos teóricos (más
cuyas partículas
de 100.000) y
tienen un
manejan volúmenes
diámetro que
más grandes de
oscila entre 3 y
muestra que las
10 μm
columnas capilares.
Referencias bibliográficas:
- LIDIA CON LA QUÍMICA. (noviembre de 2019). Obtenido de
https://lidiaconlaquimica.wordpress.com/tag/cromatografia-de-fluidos-supercriticos/

Tabla 6. Ejercicio 2.1 – Detectores

Detectores Características Tipo de muestra para analizar
Respuesta: Respuesta:
Suele utilizar una llama de aire Petroquímicos, farmacéuticos y
o hidrógeno por la cual se pasa de gas natural.
la muestra para oxidar las
Compuestos orgánicos, de
Ionización de moléculas orgánicas y que
elevada sensibilidad
llama produce partículas con carga
eléctrica (iones). Los iones se
recogen y se produce una
señal eléctrica.

Absorción visible- Respuesta: Respuesta:

UV
El flujo de líquido que sale de la
columna pasa a través de una
Grupos funcionales de
pequeña celda, de pequeño
 volumen (entre 1 a 10 μL), para moléculas.
minimizar el ensanchamiento
de banda. La medida de la
absorbancia del líquido que la Determina la fuerza en una
atraviesa en función del tiempo sustancia.
constituye el Cromatograma.

Respuesta: Respuesta:
Es una técnica de utilidad en la
identificación de todo tipo de
Poliméricos, combustibles,
compuestos orgánicos e
Espectrometría minerales,
inorgánicos, en la
infrarroja determinación de grupos
funcionales en matrices
orgánicas, así como en el
estudio de la composición
molecular de superficies
Espectrometría Respuesta: Respuesta:
de masas
Permite estudiar compuestos Compuestos orgánicos y
de naturaleza diversa: organometálicos, biopolímeros
orgánica, inorgánica o biológica y macromoléculas orgánicas.
(incluyendo biopolímeros y
macromoléculas naturales o
artificiales) y obtener
información cualitativa o
cuantitativa. Mediante el
análisis por Espectrometría de
masas es posible obtener
información de la masa
molecular del compuesto
analizado así como obtener
información estructural del
mismo, o simplemente detectar
su presencia y/o cuantificar su
 concentración.
Referencias bibliográficas:
- ESPECTROFOTOMETRÍA INFRARROJA. (noviembre de 2019). Obtenido de
https://www.upct.es/sait/es/tecnicas-espectrometricas-y-afines/espectrofotometro-
infrarrojo////
Espectrometría de masas. (noviembre de 2019). Obtenido de
http://laboratoriotecnicasinstrumentales.es/analisis-qumicos/espectrometra-de-masas

Tabla 7. Ejercicio 2.1 – Tipos de cromatógrafos de fluidos supercríticos

Cromatógrafo A Cromatógrafo B

Figura 1. Cromatógrafo A (Zambrano, M. Figura 2. Cromatógrafo B (Zambrano,

2019) M. 2019)
Componentes
A: Fase móvil A: Registrador
B: Regulador B: Detector
C: Bomba de jeringa C: Región supercrítica
D: Columna de relleno o empaquetadura D: Bomba reciprocante
E: Flujo modificador E: Flujo modificador
F: Sistema inyección F: Sistema de inyección
G: Detector G: Regulador de presión
H: Registrador H: Columna capilar o tubular
I: Horno termostatizado I: Fase Móvil
J: Región supercrítica J: Bomba de jeringa
K: Bomba reciprocante K: Horno termostatizado

Lista de componentes
Bomba de jeringa. Flujo modificador.
Bomba reciprocante. Horno termostatizado.
Columna capilar o tubular. Región supercrítica.
Columna de relleno o empaquetada. Regulador de presión.
Detector. Sistema de inyección.
Fase móvil.

Tabla 8. Ejercicio 2.2 – Diagrama de fases

 Análisis
Respuesta:
El punto 0 es el punto triple donde se tienen los valores de presión y temperatura
únicos a los que coexisten las tres fases sólido, liquido, y el gas, como lo indican los
siguientes valores.
Presión triple (bar): 5.17 Presión crítica (bar): 74.5
Temperatura triple (K): 216.55 Temperatura crítica (K): 304.15

Tabla 9. Ejercicio 2.3 – Purificación de EPA y DHA en muestras de aceites

Análisis comparativo
EPA DHA
Respuesta: Respuesta:
Uso de temperatura moderada
Extracción de lípidos de baja polaridad.
La fase móvil utilizando agua, su presión
generada para las diferentes muestras
oscilo de 50 – 250 con temperaturas
desde 150 -267, siendo la de mayor
concentración con un 88% este resultado
se logra por mantener una presión entre
los 100-200 y una temperatura de 234,
según los resultados entregados por los
estudiantes arrojan para una muestra 0
concentración de aceite EPA esto se
originó por no cumplir con los valores
correspondientes a presión y
temperatura.
La utilización CO2 parte desde una
temperatura de 80 – 200 para todas la
muestras EPA, sus temperaturas oscilan
entre 313 – 338, las concentraciones
significativas resultan de no aumentar su
temperatura a los 338, la concentración
mínima del 50% se origina por el
aumento en su temperatura la presión fue
constante.
Uso de temperatura moderada
Extracción de lípidos de baja polaridad.
La fase móvil utilizando agua tuvo un
mejor comportamiento en la
concentración de DHA factor importante
la temperatura la cual no superó los 234
con concentraciones entre los 79% y
90%.
La utilización de CO2 para las muestras
DHA depende del manejo de su
temperatura para una mayor
concentración dependiendo de las
muestras ya que para algunas su presión
debe disminuir pero la temperatura debe
estar por encima de 338 logrando un 90%
de concentración, con una presión de
entre 100-150 y una temperatura entre
313-333 se pierde la concentración de la
muestra debido a las fluctuaciones de los
valores a no ser constantes.