ANEXO 2

Curso: Cromatografía
Código: 401542
Nombre de la Tarea: Tarea 2 – Cromatografía líquida y de gases

Temáticas a desarrollar:
- Cromatografía de gases: generalidades, columnas, fase estacionaria y
fase móvil, instrumentación: sistema de inyección y detectores; elución
isocrática y gradiente, factor de capacidad, selectividad, resolución y
aplicaciones.
- Cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC): generalidades,
columnas, fase estacionaria y fase móvil, instrumentación: sistema de
inyección, de bombeo y detectores; adsorción, fase normal y fase
reversa, elución isocrática y gradiente, factor de capacidad,
selectividad, resolución y aplicaciones.

Fecha de desarrollo: 27 de septiembre al 30 de octubre de 2019

Suli Marisol Gómez Estudiante 1

Melisa Marulanda Estudiante 2
Nayibis Fonseca Estudiante 3
Elkin Vidal Estudiante 4
Nombre del estudiante Estudiante 5

EJERCICIO 1 – CROMATOGRAMAFÍA DE GASES

Tabla 1. Ejercicio 1.1 – Fórmula y estructura de compuestos (individual)

Muestra Fórmula
Orden de
Estudiante Compuesto molecul Estructura
polaridad
ar
 Furfural C 5 H 4 O2

Piridina C5 H5 N

Suli Marisol Colombi

Gómez a

Ácido
CH 3 COOH
acético

Furaneol C 6 H 8 O3

2-furfuriltiol
Guaiacol
Nombre Ácido
Vietnam
estudiante 2 acético
Ácido
isovalérico
Nombre Turquía 4,5-dimetil-
estudiante 3 tiazol
Ácido
acético
Metional
 Furaneol
4-etil-
guayacol

Nombre Ácido
Brasil acético
estudiante 4
Pirazina
Guaiacol
2,3-
butanediona

Nombre Ácido
Nepal acético
estudiante 5
Piridina
Furaneol

Tabla 2. Ejercicio 1.1 – Análisis muestras de café (individual)

Suli Marisol Gómez estudiante 1
Café Primer Segundo Tercer Cuarto
Colombia compuesto compuesto compuesto compuesto
Tiempo de Furfural Piridina Ácido acético Furaneol
retención 49,3
17,5 32,1 56,4
corregido
(tR’)
Número de tR
2
tR
2
tR
2
tR
2

platos
teóricos
N=16
Wa [ ] N=16
[ ]
Wa
N=16
[ ]
Wa
N=16
[ ]
Wa

(N)
 W a =0,13 W a =0,32 W a =0,54 W a =0,23

2 2 2 2
17,5 32,1 49,3 56,4
N=16 [ ]
0,13
N=16 [ ]
0,32
N=16 [ ]
0,54
N=16 [ ]
0,23

2 2 2 2
N=16 [ 134,6152 ] N=16 [ 100,3125 ] N=16 [ 91,2963 ] N=16 [ 245,2174 ]

N=289.940,82 N=161.001,56 N=133.360,21 N=962.105,1

H=L /N H=L /N H=L /N

H=L /N
L=60 m L=60 m L=60 m
L=60 m
Altura de H=60/289.940,82 H=60/161.001,56 H=60/133.360,21
H=60/962.105,1
plato (H)
−4 −4 −4
H=6,2363249×10−5
H=2,069387 × 10 H=3,73667 × 10 H=4,499 ×10

Nombre del estudiante 2

Café Primer Segundo Tercer Cuarto
Vietnam compuesto compuesto compuesto compuesto
Tiempo de
retención
corregido
(tR’)
Número de
platos
teóricos
(N)
Altura de
plato (H)
Nombre del estudiante 3
Café Primer Segundo Tercer Cuarto
Turquía compuesto compuesto compuesto compuesto
Tiempo de
retención
corregido
(tR’)
Número de
platos
teóricos
(N)
Altura de
plato (H)
Nombre del estudiante 4
Primer Segundo Tercer Cuarto
Café Brasil
compuesto compuesto compuesto compuesto
Tiempo de
retención
corregido
(tR’)
Número de
platos
teóricos
(N)
Altura de
plato (H)
Nombre del estudiante 5
 Primer Segundo Tercer Cuarto
Café Nepal
compuesto compuesto compuesto compuesto
Tiempo de
retención
corregido
(tR’)
Número de
platos
teóricos
(N)
Altura de
plato (H)

Tabla 3. Ejercicio 1.1 - Número de platos teóricos y altura de plato

(individual)
¿Qué relación tiene el número y la altura de platos
Estudiante
teóricos con los resultados obtenidos?
Suli Marisol Respuesta:
Gómez
Con el número de platos teóricos se lleva a cabo el cálculo
estudiante 1
sobre el cromatograma a partir de la altura y del ancho del
pico cromatográfico. El punto de corte con la línea base
proporciona el valor de la anchura del pico ( w) y la
perpendicular al máximo de pico de altura (h). h mide la
eficiencia de la columna entre más pequeño sea h , el sistema
es más eficiente, hay mayor número de platos teóricos por
metro. Para una misma longitud se logra mayor separación con
menor h . Al ser mayor el número de platos teóricos se logra
mejor la separación.

Referencias bibliográficas:
 - Gismera, G. M. J., Quintana, M. M. D. C., & Da, S. D. C.
M. D. (2012). Introducción a la cromatografía líquida de
alta resolución. (pp. 27-33) Madrid, ES: Editorial
Universidad Autónoma de Madrid. Recuperado el 27 de
octubre de 2019 de https://ebookcentral-proquest-
com.bibliotecavirtual.unad.edu.co/lib/unadsp/reader.acti
on?docID=3226641&ppg=28

Respuesta:

Nombre
estudiante 2 Referencias bibliográficas:
-
Respuesta:

Nombre
estudiante 3 Referencias bibliográficas:
-
Respuesta:

Nombre
estudiante 4 Referencias bibliográficas:
-
Respuesta:

Nombre
estudiante 5 Referencias bibliográficas:
-
Tabla 4. Ejercicio 1.2 – Compuestos que se analizan en cromatografía de
gases (individual)
¿Qué tipo de compuestos se pueden analizar en
Estudiante
cromatografía de gases?
Respuesta:
Compuestos volátiles con peso molecular menor de 1000
Hidrocarburos ligeros que contenga fosforo o azufre
Suli Marisol Referencias bibliográficas:
Gómez
estudiante 1 - Cromatografía de gases (Archivo PDF). Recuperado el 27
de octubre de 2019 de
http://www.mncn.csic.es/docs/repositorio/es_ES/investig
acion/cromatografia/cromatografia_de_gases.pdf

Respuesta:

Nombre
estudiante 2 Referencias bibliográficas:
-
Respuesta:

Nombre
estudiante 3 Referencias bibliográficas:
-
Respuesta:

Nombre
estudiante 4 Referencias bibliográficas:
-
Nombre Respuesta:
estudiante 5
Referencias bibliográficas:
-
 Tabla 5. Ejercicio 1.2 – Tipos de inyección en cromatografía de gases (colaborativa)
Tipo de Descripción de la Cromatograma (ejemplo) Relación con la
inyección inyección separación de picos
Respuesta: Respuesta:
Un inyector de división Esta inyección con división
(split) divide la muestra de flujo ilustra una mirada
vaporizada en dos partes: de picos que sería
una minoritaria que se imposible resolver e
transfiere a la columna y identificar.
otra mayoritaria que se
expulsa del inyector por la
Inyección válvula de split. La inyección
con en split evita sobrecargar la
división de columna con los efectos
flujo(Split) negativos que pueden
producirse. Es el método de
inyección más usual en el
análisis de muestras
complejas muy
concentradas como las
usuales en la industria
petrolífera o en la industria
de los aceites esenciales
Inyección Respuesta: Respuesta:
sin
En la inyeccion de splittles Se observan picos cortos y
división de
la muestra se inyecta con la se evidencian con más
flujo
válvula de split cerrada. El claridad
splittles
componente mayoritario, el
solvente, se evapora y llena
en parte el volumen interno
del inserto. Puesto que este
volumen puede ser de 1 ml
y el caudal de gas portador
en la columna suele ser de
1 ml/min. Las utilizaciones
de técnica de ¨splitless¨
tiene dos importantes
ventajas. En primer lugar,
dado que no existe división,
permite un aumento notable
de la sensibilidad por lo que
es muy adecuada para el
análisis de trazas y por otra
parte, la reconcentración de
la muestra en la cabeza de
la columna origina que las
pérdida de eficacia debidas
a una inyección inadecuada
sean de mucha menor
importancia que en otras
técnicas de inyección
Referencias bibliográficas:
- Cromatografía de gases (Archivo PDF). Recuperado el 27 de octubre de 2019 de
http://www.mncn.csic.es/docs/repositorio/es_ES/investigacion/cromatografia/cromatografia_de_gases.pdf
 Tabla 6. Ejercicio 1.2 – Tipos de columna en cromatografía de gases (colaborativa)
Flujo de Flujo de Longitud Material Características
Tipos de la fase la
columna móvil inyecció
n
0,5 – 0,001 a 10-75 cm se fabrican a partir Respuesta:
4mL/min 2μL de sílice fundido o
Proporcionan eficacias muy
vidrio
altas, por lo que son
Capilar o relativamente fácil que una
tubular columna capilar pueda
realizar una separación
concreta únicamente en
base a su eficacia.
De relleno o 25-150 <20 μL 10-75 cm Vidrio o sílice Respuesta:
empaquetada mL/min fundido
Este tipo de columnas
s
admiten cantidades de
muestra relativamente
elevadas y la inyección de
unos cuantos micro litros
de muestra no conduce a
una merma de la eficacia
de la columna. La
utilización de columnas
empaquetadas permite en
muchos casos, a pesar de
la escasa eficacia que
ofrecen, conseguir
separaciones muy
complejas en base a la
selectividad de la fase
estacionara, ya que en
este caso existe una
enorme variedad de
características diferentes
entre las que poder elegir
una propiedad.
Referencias bibliográficas:
- Cromatografía de gases (Archivo PDF). Recuperado el 27 de octubre de 2019
de
http://www.mncn.csic.es/docs/repositorio/es_ES/investigacion/cromatografia/c
romatografia_de_gases.pdf
-UNAD. (2019, octubre 27) Segunda web conferencia cromatografía.
Recuperado de http://bit.ly/2IujiL3

Tabla 7. Ejercicio 1.2 – Elución isotérmica (colaborativa)

Casos Elución isotérmica Cromatograma
Caso 1. Respuesta: Respuesta:
Componentes
de una mezcla
con puntos de
ebullición
similares
Caos 2. Respuesta: Respuesta:
Componentes
de una mezcla
con puntos de
ebullición
diferentes
Referencias bibliográficas:
-

Tabla 8. Ejercicio 1.2 – Detectores (individual)

 Tipo de muestra para
Detectores Características
analizar
Respuesta: Respuesta:
Se emplea para La mezcla o muestra
separar iones dentro analizar puede estar
de una muestra que constituida por distintos
Suli Marisol poseen distinta isótopos de una misma
Gómez Masas relación carga/masa sustancia o bien por
estudiante 1 y la composición distintos elementos
cualitativa y químicos.
cuantitativa de
analitos orgánicos e
inorgánicos en
muestras complejas.
Referencias bibliográficas:

-Introducción a la espectrometría de masas y sus aplicaciones de análisis

ambiental. (Archivo PDF) Recuperado el 27 de octubre de 2019 de
http://www4.ujaen.es/~mjayora/docencia_archivos/Quimica%20analitica
%20ambiental/Tema7.pdf
-Burriel Martí, F., Arribas Jimeno, S., Lucena Conde, F., & Hernández Méndez,
J. (2008). Cromatografía. En: Química analítica cualitativa (18a. ed.). (pp. 326-
327). Madrid: Paraninfo. Recuperado el 23 de mayo de 2019 de
http://bibliotecavirtual.unad.edu.co:2081/ps/i.do?
p=GVRL&sw=w&u=unad&v=2.1&it=r&id=GALE|
CX4056100039&asid=0753481720a1cd4eadbebdcef16242d6

Nombre Ionización de Respuesta: Respuesta:

estudiante 2 llama
Referencias bibliográficas:
-
Nombre Conductividad Respuesta: Respuesta:
estudiante 3 térmica
Referencias bibliográficas:
-
Nombre Respuesta: Respuesta:
Termoiónico
estudiante 4
Referencias bibliográficas:
-
Nombre Captura de Respuesta: Respuesta:
estudiante 5 electrones
Referencias bibliográficas:
-

EJERCICIO 2 – CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA

Tabla 9. Ejercicio 2.1 - Concentraciones y áreas del analito y del patrón

interno (colaborativo)
Áreas y Patrón
concentraciones 1 2 3 4 5 Muestra

concentración analito
concentración lactosa
 área analito
árealactosa

Tabla 10. Ejercicio 2.1 - Curva de calibración (colaborativo)

Inserte la curva de calibración

Ecuación de la recta:
Coeficiente de correlación (R2):

Tabla 11. Ejercicio 2.1 – Concentración de extracto y del analito

(colaborativo)
Concentració Respuesta:
n del extracto
Realice el cálculo a partir de la ecuación de la recta. Tenga en
cuenta que “y” corresponde al área analito/área lactosa y “x” es
la concentración analito/concentración lactosa
Concentració Respuesta:
n analito
Realice el cálculo a partir de la ecuación de la recta. Tenga en
cuenta que “y” corresponde al área analito/área lactosa y “x” es
la concentración analito/concentración lactosa
 Tabla 12. Ejercicio 2.1 - Resultados y coeficiente de correlación (R 2)
(individual)
¿Qué relación tienen el valor del coeficiente de
Estudiante
corrección (R2) con los resultados obtenidos?
Respuesta:
Suli Marisol
Gómez
estudiante 1 Referencias bibliográficas:
-
Respuesta:

Nombre
estudiante 2 Referencias bibliográficas:
-
Respuesta:

Nombre
estudiante 3 Referencias bibliográficas:
-
Respuesta:

Nombre
estudiante 4 Referencias bibliográficas:
-
Respuesta:

Nombre
estudiante 5 Referencias bibliográficas:
-
 Tabla 13. Ejercicio 2.1 - Análisis cromatogramas (individual)
Indique la relación que existe entre las muestras
Estudiante
analizadas con la intensidad de señal de los picos.
Respuesta:
Suli Marisol
Gómez
Referencias bibliográficas:
estudiante 1
-
Respuesta:

Nombre
estudiante 2 Referencias bibliográficas:
-
Respuesta:

Nombre
estudiante 3 Referencias bibliográficas:
-
Respuesta:

Nombre
estudiante 4 Referencias bibliográficas:
-
Respuesta:

Nombre
estudiante 5 Referencias bibliográficas:
-
Tabla 14. Ejercicio 2.2 – Compuestos que se analizan en HPLC (individual)
Estudiante ¿Qué tipo de compuestos se pueden analizar en HPLC?
Respuesta:
Suli Marisol
Gómez
estudiante 1 Referencias bibliográficas:
-
Respuesta:

Nombre
estudiante 2 Referencias bibliográficas:
-
Respuesta:

Nombre
estudiante 3 Referencias bibliográficas:
-
Respuesta:

Nombre
estudiante 4 Referencias bibliográficas:
-
Respuesta:

Nombre
estudiante 5 Referencias bibliográficas:
-
 Tabla 15. Ejercicio 2.2 – Elución isocrática y gradiente (colaborativa)
Tipo de Descripción Ejemplo
elución
Elución
isocrática
Elución
gradiente
Referencias bibliográficas:
-

Tabla 16. Ejercicio 2.2 – Modo de separación (colaborativo)

¿Qué es fase Ejemplo ¿Qué es fase Ejemplo
normal? reversa?
Respuesta: Muestra: Respuesta: Muestra:
Fase estacionaria: Fase estacionaria:
Fase móvil: Fase móvil:
Referencias bibliográficas:

Tabla 17. Ejercicio 2.2 – Detectores (individual)

Tipo de muestra
Detectores Características
para analizar
Suli Marisol Respuesta: Respuesta:
Espectrometrí
Gómez
a de masas
estudiante 1
Referencias bibliográficas:
-

Nombre Absorción Respuesta: Respuesta:

estudiante 2 visible- UV

Referencias bibliográficas:
-

Nombre Respuesta: Respuesta:

Fluorescencia
estudiante 3

Referencias bibliográficas:
-

Nombre Índice de Respuesta: Respuesta:

estudiante 4 refracción

Referencias bibliográficas:
-

Nombre Respuesta: Respuesta:

FTIR
estudiante 5

Referencias bibliográficas:
-