Fase 3– Métodos instrumentales

Plomo (Pb) en leche de vaca

Yarlen Toloza Moya

Edilberto Bello Guerrero

Lauren Guzmán Romero

Marlon López Gutiérrez

Grupo: 26

Tutora: Lady Diana Castañeda Trujillo

Universidad Nacional Abierta y a Distancia

7/05/2020

Problemática seleccionada por el grupo colaborativo

 Estudiante alimento Contaminante Limite permisible
(mg/kg)

Yarlen leche Pb 0,02

Método De Análisis Para La Cuantificación Del Analito En La

Problemática Identificada

La espectrometría de absorción atómica es una técnica para determinar la

concentración de un elemento metálico determinado en una muestra.

Para analizar los constituyentes atómicos de una muestra es necesario atomizarla.

La muestra debe ser iluminada por la luz. Finalmente, la luz es transmitida y medida
por un detector. Con el fin de reducir el efecto de emisión del atomizador (por
ejemplo, la radiación de cuerpo negro) o del ambiente, normalmente se usa un
espectrómetro entre el atomizador y el detector. Para atomizar la muestra
normalmente se usa una llama, pero también pueden usarse otros atomizadores
como el horno de grafito o los plasmas, principalmente los plasmas de acoplamiento
inductivo.

Cuando se usa una llama, se dispone de tal modo que pase a lo largo lateralmente
(10 cm) y no en profundidad. La altura de la llama sobre la cabeza del quemador se
puede controlar mediante un ajuste del flujo de mezcla de combustible. Un haz de
luz pasa a través de esta llama en el lado más largo del eje (el eje lateral) e
impacta en un detector.

Lámparas de cátodo hueco. En su modo de funcionamiento convencional, la luz es

producida por una lámpara de cátodo hueco. En el interior de la lámpara hay un
cátodo cilíndrico de metal que contiene el metal de excitación, y un ánodo. Cuando
un alto voltaje se aplica a través del ánodo y el cátodo, los átomos de metal en el
cátodo se excitan y producen luz con una determinada longitud de onda.
 Plantear el procedimiento de la preparación de muestra para
análisis.

Pesar 1,0 g Leche

adicionar lentamente 65 -70% P.A

5 mL de HNO3

Color traslucido Realizar digestión Sistema Cerrado

Enfriar 30 min

Transferir a balón de
50 mL

Aforar con agua tipo

I

Homogenizar

Almacenar

Materiales
Pipetas y matraces aforados
Balanza de precisión.

Propone una posible alternativa de solución al problema

identificado a través de métodos instrumentales.
Para la determinación del contenido de plomo en un alimento por el método de
espectroscopia UV-Vis, se obtuvieron los siguientes datos de absorbancia para las
soluciones estándar:

Estándar Concentración Absorbancia

(Molar )

1 0 0
2 2 0,03
3 4 0,06
4 6 0,08
5 8 0,1
6 10 0,13

A partir de los datos de la tabla:

-Grafique los datos experimentales de absorbancia en función de la concentración.

-Utilice el método de mínimos cuadrados para realizar un ajuste lineal que le

permita determinar la ecuación correspondiente.

Estándar Concentraci Absorbanci X*Y X2 

ón a
(Molar ) y
x
1 0 0 0 0
2 2 0,03 0,06 4
3 4 0,06 0,24 16
4 6 0,08 0,48 36
5 8 0,1 0,8 64
6 10 0,13 1,3 100
Total 30 0,4 2,88 220
 y=ax+ b
n ∑ xy−∑ x ∑ y
a=
n ∑ x 2−¿ ¿

6 ( 2,88 )−(30 x 0,4)

a=
6(220)−¿¿
a=0,0126

b=
∑ x−a ∑ y
n
30−0,0126( 0,4)
b=
6
b=0,0038
y=0,0126 x +0,0038

Curva de Calibració n
0.14
0.13
0.12 f(x) = 0.01 x + 0
R² = 0.99
0.1 0.1

0.08 0.08

0.06 0.06

0.04
0.03
0.02

0 0
0 2 4 6 8 10 12
A partir de la curva de calibración del numeral anterior se requiere calcular la
concentración en una muestra que luego de tratarla adecuadamente se llevó a un
volumen de 250 mL. La lectura de absorbancia de esta solución fue de 0,04.
Determine la concentración de plomo en la muestra.

y=ax+ b
y=0,0126 x +0,0038
0,04=0,0126 x +0,0038
0,04−0,0038
x=
0,0126
x=¿ 2,873
Concentración de plomo en leche 2,873

Define las relaciones matemáticas para identificar y determinar el

analítico de la problemática identificada.

Determinar el contenido de plomo en una muestra de leche, se toma 2.0 mL de la leche,

se diluye a un volumen final de 6.0 mL, se le realiza una medida por espectroscopia de

absorción atómica y se obtiene una señal de absorbancia de 0.294 a 0,221 nm. Una

segunda muestra de leche de 3.0 mL es fortificada con 1.00 µL de un estándar de plomo

de 1,750 ppb y diluido a un volumen final de 4.0 mL. Se realiza la medida de esta

nueva muestra y se obtiene una señal de absorbancia de 0.336 a la misma longitud de

onda. Determinar la concentración de plomo en la muestra de leche,

 El siguiente ejercicio se trata de un problema de fortificación de la muestra de la

problemática similar a la adición estándar

2∗10−3∗1,750
C Pb+
6 0,294
= =0,875cpb
C 0,336

Concentración de plomo en leche = 6x0, 875 en la disolución de medida = 5,25

Estudiante N° 1 Yarlen Toloza moya

1ª: Para la determinación del contenido de fosforo en carne por el método de

espectroscopia UV-Vis, se obtuvieron los siguientes datos de absorbancia para las
soluciones estándar:

Concentració
Estándar Absorbancia xy x2
n (ppm)
1 1 0,116 0,116 1
2 3 0,221 0,663 9
3 5 0,347 1,735 25
4 7 0,456 3,192 49
5 9 0,535 4,815 81
6 11 0,588 6,468 121
16,98
suma 36 2,263 9 286

-Grafique los datos experimentales de absorbancia en función de la concentración.

 co nte nido de f osf or o e n ca rne
0.6
f(x) = 0.05 x + 0.08
0.5 R² = 0.98

0.4
absorbancia

0.3

0.2

0.1

0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
-0.1

concentracion (ppm)

-Utilice el método de mínimos cuadrados para realizar un ajuste lineal que le

permita determinar la ecuación correspondiente .

Formula

Ajuste
286∗2,263−36∗16,989
a= =0,08479524
6∗286−(36)2
6∗16,989−36∗2,263
b= =0,04872857
6∗286−(36)2

1b: A partir de la curva de calibración del numeral anterior se requiere

calcular la concentración en una muestra para lo cual se tomó 2 g de harina
y luego de tratarla adecuadamente se llevó a un volumen de 100 mL. La
lectura de absorbancia de esta solución fue de 0,240. Determine la
concentración de fósforo en la muestra de harina.
A=0,0487 C−0,0848
A+0,0848=0,0487 C
A +0,0848
=C
0,0487
0,240+0,0848
0,0487
6,6 concentracion de harina
1C: Indique cuales son las limitaciones de la absorción atómica y a la
emisión atómica.

Emisión atómica

Limitaciones del método: Sensibilidad limitada para los halógenos y otros no

metales
Limitaciones para la muestra: La mayoría de muestras orgánicas líquidas y sólidas
requieren de digestión antes del análisis.

Absorción atómica
Limitaciones del método: Los metales se analizan individualmente no
simultáneamente. Por lo general no es aplicable a no metales
Limitaciones para la muestra: La mayoría de muestras orgánicas líquidas y sólidas
requieren de digestión antes del análisis

1d: Mencione lo criterios necesarios en la selección de una fase

estacionaria en cromatografía HPLC

La fase móvil puede ser un gas o un líquido, mientras que la fase estacionaria sólo
puede ser un líquido o un sólido (Tabla 2. l) dando lugar a la cromatografía de gases
y a la cromatografía líquida En la cromatografía líquida, cuando la separación
involucra predominantemente un reparto simple entre dos fases líquidas inmiscibles,
una estacionaria y la otra móvil, el proceso se llama cromatografía líquido-líquido
(LLC). Cuando en la aptitud retentiva de la fase estacionaria intervienen
principalmente fuerzas físicas de superficie, el proceso se denomina cromatografía
líquido-sólido (LSC, de liquid-solid chromatography) (o de adsorción). Otros dos
métodos de cromatografía líquida difieren un poco en su modo de acción, En
cromatografía de intercambio iónico (IEC, de ionic-exchange chromatography), los
componentes iónicos de la muestra se separan por el intercambio 2. Cromatografía.
Principios generales 2.2 selectivo con contraiones de la fase estacionaria. En
cromatografía de exclusión (EC, de exclusión cromatography), la fase estacionaria
proporciona una clasificación de moléculas basadas en su mayor parte en la
geometría y el tamaño molecular. Este método también se llama cromatografía de
permeación en gel, en la química de los polímeros, y de filtración en gel, en la
bioquímica Cuando la fase móvil es un gas, los métodos se llaman cromatografía
gas-líquido (GLC), y cromatografía gas-sólido (GSC).

Estudiante 2: Edilberto Bello Guerrero

2ª. Para la determinación del contenido de hierro en un alimento por el método de
espectroscopia UV-Vis, se obtuvieron los siguientes datos de absorbancia para las
soluciones estándar:

Estándar Concentración Absorbancia

(Molar )

1 0 0
2 2 0,03
3 4 0,06
4 6 0,08
5 8 0,1
6 10 0,13
A partir de los datos de la tabla:

-Grafique los datos experimentales de absorbancia en función de la concentración.

-Utilice el método de mínimos cuadrados para realizar un ajuste lineal que le

permita determinar la ecuación correspondiente.

Estándar Concentraci Absorbanci X*Y X2 

ón a
(Molar ) y
x
1 0 0 0 0
2 2 0,03 0,06 4
3 4 0,06 0,24 16
4 6 0,08 0,48 36
5 8 0,1 0,8 64
6 10 0,13 1,3 100
Total 30 0,4 2,88 220

y=ax+ b
n ∑ xy−∑ x ∑ y
a=
n ∑ x 2−¿ ¿

6 ( 2,88 )−(30 x 0,4)

a=
6(220)−¿¿
a=0,0126

b=
∑ x−a ∑ y
n
30−0,0126( 0,4)
b=
6
b=0,0038
y=0,0126 x +0,0038

Curva de Calibració n
0.14
0.13
0.12 f(x) = 0.01 x + 0
R² = 0.99
0.1 0.1

0.08 0.08

0.06 0.06

0.04
0.03
0.02

0 0
0 2 4 6 8 10 12

A partir de la curva de calibración del numeral anterior se requiere calcular la

concentración en una muestra que luego de tratarla adecuadamente se llevó a un
volumen de 250 mL. La lectura de absorbancia de esta solución fue de 0,04.
Determine la concentración de hierro en la muestra.
y=ax+ b
y=0,0126 x +0,0038
0,04=0,0126 x +0,0038
0,04−0,0038
x=
0,0126
x=¿ 2,873
Rta: La concentración de hierro en la muestra es de 2,873 M

Indique cuales son los principios básicos de absorción atómica y de un ejemplo.

 a. Todos los átomos neutros en fase gaseosa pueden absorber radiación y
transferir un electrón has un nivel excitado
b. Las transiciones electrónicas son posibles sin niveles vibraciones y rotaciones,
por lo que las anchuras de líneas son más estrecha
c. Las transiciones electrónicas ocurren a longitudes de onda discretas. Los
fotones absorbidos son específicos para cada elemento.
d. Emplea la absorción de la luz para medir la concentración de átomos.

¿Cuál es la clasificación de los métodos cromatográficos según la disposición de la

fase estacionaria?

La clasificación de los métodos cromatográficos según la disposición de la fase

estacionaria es la siguiente:

a. Cromatografía en columna: La fase estacionaria se encuentra empaquetada

en el interior de una columna generalmente fabricada en acero, polímero o
vidrio.
b. Cromatografía plana
 Cromatografía de capa fina: la fase estacionaria está extendida sobre
un soporte solido inerte de vidrio, plástico o aluminio. La muestra para
análisis se aplica por medio de un tubo capilar sobre la superficie de
una capa fina adsorbente en forma de banda o punto
 Cromatografía de papel: Emplea celulosa como fase estacionaria.

Estudiante 3: Lauren Guzmán Romero

3a La provitamina A se determina como β-caroteno. Para lo cual se

hace una extracción previa, se purifica por cromatografía de
columna y el extracto se diluye a un volumen conocido y se mide a
450 nm. Para determinar el contenido de esta sustancia en un
alimento se preparó la siguiente curva de calibración:
 Estándar Concentración Absorbancia
(molar)

1 0 0,0

2 0,3 0,13

3 0,5 0,23

4 0,7 0,36

5 0,9 0,48

6 1,0 0,62

A partir de los datos de la tabla:

Grafique los datos experimentales de absorbancia en función de la concentración.

0.7

0.6

0.5
f(x) = 0.36 x + 0.15
R² = 0.6
Absorvancia

0.4

0.3

0.2

0.1

0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2
Concentració n
-Utilice el método de mínimos cuadrados para realizar un ajuste lineal que le
permita determinar la ecuación correspondiente.

N N

a=
( )(∑ ) (∑
∑Yi
i=1 i=1
X 2i −
i=1
Xi
)(∑ X Y )
i=1
i i

2
N
( ∑ X )−¿ ¿
i=1
i

b=
N (∑ ) ( ∑
i=1
Xi Y 1 −
i=1
Xi
)(∑ Y )
i=1
i

2
N
(∑ X )−¿ ¿
i=1
i

Estándar X Y XY X2
1 0 0,3 0 0
2 0,3 0,13 0,039 0,09
3 0,5 0,23 0,115 0,25
4 0,7 0,36 0,252 0,49
5 0,9 0,48 0,432 0,81
6 1 0,62 0,62 1
Suma 3,4 2,12 1,458 2,64

Ajuste
 B
0,6396
1,54
4,28
0,14943925 4,28
2 0,35981308
4

3b A partir de la curva de calibración del numeral anterior se requiere

calcular la concentración de provitamina A en una muestra para lo
cual se tomó 10 mL y se llevó a un volumen de 100 mL. La lectura
de absorbancia de esta solución fue de 0,21. Determine la
concentración de provitamina A en la muestra.

A=0,3598 C−0,1494
A+0,1494=0,3598 C
0,1494
A+ =C
0,3598
0,21+0,1494
=0,99
0,3598
0,99 concentración de provitamina A en la muestra

3d ¿Qué papel juega el coeficiente de partición del compuesto en la

separación por cromatografía?

El coeficiente de reparto (K) de una sustancia, también llamado coeficiente de

partición (P), es el cociente o razón entre las concentraciones de esa sustancia en
las dos fases de la mezcla formada por dos disolventes inmiscibles en equilibrio.

Por tanto, ese coeficiente mide la solubilidad diferencial de una sustancia en esos
dos disolventes.

Estudiante 4: Marlon López Gutiérrez

4ª. Para determinar la concentración de plomo en un alimento se

construyó la siguiente curva de calibración:

Estándar Concentración Porcentaje de

(ppm) Tramitación (%)
1 30 56
2 45 39
3 60 28
4 85 21
5 100 15

A partir de los datos de la tabla:

-Grafique los datos experimentales de absorbancia en función de la

concentración teniendo en cuenta que:

A=2-Log%T

A= 2-Log%T

Y= Lectura

a= Intervalo
b= Pendiente

x= Concentración

Haciendo uso de la calculadora determinamos que a= 66. 56 y b= (-0.54)

Y= a+bx

2= 66.56+ (-0.54)

2= 66.02
2
=x
66.02
mg
X= 0.03
ml
-Utilice el método de mínimos cuadrados para realizar un ajuste lineal que
le permita determinar la ecuación correspondiente.

Estándar Concentración Porcentaje de

(ppm) tramitación X*Y X2
(%)
1 30 56 1,680 900
2 45 39 1,755 2,025
3 60 28 1,680 3,600
4 85 21 1,785 7,225
5 100 15 1,500 10,000
Total 320 159 8,400 23,750

y=mx+b

∑ ( x )∗∑( y )
∑ ( xy )−
m= n
2
∑ ( x ) −∑ ¿ ¿ ¿
320∗159
8400−
m= 6 =-0.01
( 23750 ) −¿ ¿ ¿
∑y ∑x
b= y−m x= (−o . o 1)
n n
159 320
b= (−o . o 1) =27
6 6
y=-0.01x+27

Despejamos (x)

x=-27/-0.01=2.7
4b. A partir de la curva anterior, determine la concentración de plomo en
mg en cada 100 g de muestra, si un 1,0 g de una muestra problema, se
disolvió a 100 ml y se midió dando una tramitación de 28%

Y= 2.7+0.03
100
−0.03=x
2.7
X= 37,007 Esta es la concentración de Pb en la muestra.
4c. Indique cuales son las aplicaciones de la absorción atómica.

Aplicaciones en absorción atómica

Áreas de aplicación:

 Análisis químicos
 Minería
 Medicina
 Ambiental
 Industrial
 Petroquímica
 Farmacéutica
 Alimentaria

Análisis de aleaciones:

Se utiliza para analizar muestras de aleaciones, siempre y cuando se puedan poner

en disolución y el tiempo para hacerlo no sea excesivamente largo.

Se determinan normalmente Fe, Pb, Ni, Cr, Mn, Co, Sb, etc. en rango que van
desde los 0,003% hasta los 30% en aleaciones con base de estos mentales.

Aplicaciones en la Industria alimentaria:

 Estimación de contaminantes por oligoelementos

 Determinación de composición cárnicas de embutidos y conservas.
 Estudios de Citotoxicidad de conservantes y adictivos.
 Análisis de elementos químicos en vinos y aceite.
Aplicaciones en el análisis ambiental:

Contribuye a la determinación de sustancia contaminante a nivel de trazas, en

particular de metales pesados.

El análisis de absorción atómica ha sido extensamente empleado para el análisis del

agua.

Análisis de muestras de suelo previa disolución.

Aplicaciones en la Medicina

Análisis de muestras biológicas (Bioquímica clínica)

 Discriminación Ca/Sr en los mecanismos de absorción intestinal

 Los efectos del Pb en biosíntesis del grupo Hem.
 Elementos en fluidos cerebroespinal (Fisiopatología)

4d. Mencione las propiedades de la fase estacionaria en la cromatografía

de gases.

La cromatografía de gases es una técnica cromatografía en la que la muestra se

volatiliza y se inyecta en la cabeza de un mechero de una columna cromatografía.
La elución se produce por el flujo de una fase móvil de gas inerte. A diferencia de lo
otros tipos de cromatografía, la fase móvil no interactúa con las moléculas del
anualito; Su única función es la de transportar el analítico a través de la columna.

Existe dos tipos de cromatografía de gases (GC): la cromatografía gas-solido (GSC)

y la cromatografía gas-liquido (GLC), siendo esta la ultima la que se utiliza más
ampliamente, y que se puede llamar simplemente cromatografía de gases (GC). En
la GC la fase estacionaria es sólida y la retención de los anualitos en ella se produce
mediante el proceso de absorción.
Existen muchas manetas de clasificar los métodos cromatograficos. Según,
Giddings, se puede clasificar la cromatografía por sus variantes:

 Fase móvil (Puede ser gaseosa, liquida o fluido supercrítico)

 Fase estacionaria
 Mecanismos de retención (tipos de equilibrios en la transferencia de los
solutos entre las fases).
 Forma de contacto entre las fases (columna o superficie plana)
 Dimensionalidad
 Escala física
 Gradientes.

Referencias