MODULO V

LIOFILIZACIN

Mercedes Fernndez Arvalo

 LIOFILIZACIN:
La ciencia del freeze-drying.

PROCESO DE DESECACIN DONDE EL

SOLVENTE (AGUA) ES CONGELADO Y
ELIMINADO POSTERIORMENTE POR
SUBLIMACIN EN AMBIENTE DE VACIO.

Freeze-drying es la eliminacin completa del agua

de un material sin producir ningn cambio ni en su
estructura bsica ni en su composicin.
LIOFILIZACIN: un poco de historia
LIOFILIZACIN DE PATATAS
Incas en Peru (y actualmente):
Eliminan la mayor cantidad de agua
posible hasta obtener una pasta muy
concentrada.

Almacenan la pasta en lo ms alto de

las montaas. Aqu, las bajsimas
temperaturas congelan el alimento y
el agua del interior se evapora muy
despacio a las bajas presiones del
aire en esas altitudes.

El producto obtenido (CHUNO), es un polvo fino

que se puede almacenar durante ms de 4 aos.
LIOFILIZACIN: un poco de historia

Freeze-drying se desarroll
comercialmente durante la
II Guerra Mundial para
preservar el plasma
sanguneo y la penicilina.

Desde los 60, la industria

utiliza prcticamente la misma
tecnologa para producir todo
tipo de productos.
LIOFILIZACIN: un poco de historia
Sublimacion vs. Fusion
LIOFILIZACIN

VENTAJAS

INCONVENIENTES
LIOFILIZACIN
VENTAJAS

EMPLEO DE TEMPERATURAS MUY BAJAS,

circunstancia que permite aumentar la estabilidad
del producto y disminuir la prdida de sustancias
voltiles
PRODUCTO FINAL LIOFILIZADO,
es decir, con alta porosidad, solubilidad rpida y
completa y condiciones estriles
CONTENIDO FINAL DE HUMEDAD < 0.5 %
EMPLEO DE VACO:
no existe oxidacin
LIOFILIZACIN
INCONVENIENTES

COSTE ELEVADO DE LOS EQUIPO (X3)

CONSUME ENERGTICO ELEVADO (X2)
PROCESO LARGO (24 h)
LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones ...
... en el campo farmaceutico

Ciertos antibiticos, vacunas, plasma,

hemoderivados, sueros, vitaminas, extractos,
leche materna, etc., son mucho ms estables
durante su almacenamiento en formulaciones
liofilizadas que en su estado natural.
LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones ...
... en el campo farmaceutico

La vacuna del sarampin es un ejemplo de

vacuna liofilizada ampliamente utilizada.
LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones ...
... en el campo farmacutico

Ratones genticamente modificados por la

insercin de una porcin extra de DNA,
utilizados en investigacin biomdica
ACTUALMENTE ESTAN LIOFILIZADOS
LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones ...
... en el campo farmacutico

Proyecto Genoma: pptidos, protenas, DNA,

... (estabilidad)

Biofrmacos: frmacos de origen biolgico

Muchas protenas y ptidos presentan

inestabilidad qumica y fsica,
desnaturalizndose rpidadmente incluso a
temperatura ambiente.

Muchos de los frmacos basados en este tipo

de biomolculas pueden estabilizarse por
liofilizacin.
LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones ...
... en el campo farmaceutico

Adems de los cometados, existen otro tipo de molculas que

para su uso como frmaco requieren de una previa liofilizacin:

Ej.: agentes quimioteraputicos cisplatino y doxorubicina.

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones
... en el campo farmaceutico

La liofilizacin de microorganismos se hace actualmente

de forma rutinaria; muchos de ellos se mantienen en
medios de cultivos para almacenarse y distribuirse en
forma liofilizada.
LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones
... en el campo alimentario

Mantienen intactas todas sus cualidades:

forma, gusto, sabor, color y valores
nutricionales, libre de aditivos y conservantes.
Tienen larga vida til.
No necesitan demasiados cuidados de
almacenamiento, solo requieren ser
almacenados en un lugar fresco y seco.
De fcil aplicacin.
Rehidratacin instantnea.
Excelente microbiologa.
LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones
... en el campo alimentario

YOGOURT EN POLVOS

FRUTAS: Manzana, Damasco, Banana, Mora, Zarzamora,

Arndano, Meln Cantaloupe, Cerezas, Limn, Mango,
Naranja, Papaya, Anan, Frambuesa, ...

VEGETALES: Esprrago, Maz, Zanahoria, Brcoli, Coliflor,

Apio, Patata, Hongos, Aceituna, Espinaca, Pimientos, ...

USOS:
Mezclas secas (sopas deshidratadas, postres, comidas para
microondas, etc); Snacks; Mezclas con cereales; Industrias de
confitera, chocolates y golosinas (barras de cereal, galletitas,
cremas, mousses, postres, etc)
LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones
... en el campo alimentario

VIDA UTIL
Para frutas y verduras 12 meses en un lugar fresco y seco,
aunque puede extenderse a 24 meses si son refrigerados.
El resto de los productos tienen una vida til de
aproximadamente 6 meses en su envase original.

PRESENTACION:
Polvo, Grnulos, Cubos, Slices, o Enteros
LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones
... en otros campos

INVESTIGACIN:
Ej.: Microscopa de muestras
hmedas, pueden distorsionarse
debido a un secado por
evaporacin en condiciones
normales. Estas distorsiones son
debidas a las fuerzas de tensin
superficial generadas durante todo
el tiempo que dure la evaporacin.
Si la muestra es previamente
liofilizada, la distorsin se reduce
enormemente, generando
resultados ms fiables.
LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones
... en otros campos

Especialmente importante en
SEM:
en este caso, las muestras
tiene que desecarse
previamente y ser conductoras,
porque la imagen se forma a
travs del uso de electrones y
no de la luz. La liofilizacin ha
permitido usar esta tecnologa
en campos de actuacin muy
mplios.
LIOFILIZACIN
CARACTERSTICAS DE LOS
PRODUCTOS A LIOFILIZAR

Productos inestables
Sustancias termolbiles
Cuando se requieran condiciones de asepsia
Resolucin rpida y completa
Productos de elevado coste
LIOFILIZACIN
TIPOS DE PRODUCTOS A LIOFILIZAR

Materiales no vivientes tales como plasma

sanguneo, suero, soluciones de hormonas,
productos farmacuticos y alimentos ...
Transplantes quirrgicos de especies tales como
arterias, piel y huesos
Clulas vivas destinadas a permanecer en ese
estado por largos perodos de tiempo. Ejemplos
incluyen bacterias, virus y levaduras
LIOFILIZACIN: Descripcin del
proceso

CONGELACIN

DESECACIN PRIMARIA

DESECACIN SECUNDARIA
 LIOFILIZACIN: Descripcin del
proceso
P Diagrama de
estado fsico de
agua
En los puntos de
cada curva, el agua
P.T. est en equilibrio
en las dos fases.
En el punto triple
4.6 mm coexisten las tres
fases.

- 0.008 C T
 LIOFILIZACIN: Descripcin del
proceso
Diagrama de estado fsico de agua

P
CONGELAR POR
DEBAJO DEL
PUNTO TRIPLE
P.T
.

4.6 mm ES ESTO
SUFICIENTE?
- 0.008 C T
 LIOFILIZACIN: Descripcin del
proceso

T T
PUNTO
Solucin de NaCl EUTCTICO
0 C
Sal slida + Temperatura
Hielo + mnima a la que
Solucin
Solucin congelan todos los
componentes
Hielo + sal slida
-21.5 C

100 % W 23 % NaCl 100 % NaCl

0 % NaCl 0%W
 LIOFILIZACIN: Descripcin del
proceso

T T ENFRIAR POR
Solucin
de NaCl DEBAJO DEL
0 C
Hielo + Sal slida + PUNTO
Solucin Solucin
EUTCTICO
-21.5 C Hielo + sal slida

100 % W 100 % NaCl

0 % NaCl 23 % NaCl 0%W
Resistividad,
A.T.D.

 ESQUEMA GENERAL DE UN LIOFILIZADOR

CMARA DE COMPRESOR CONDENSADOR

LIOFILIZACIN
T liof. > T cond.

Pv(s-g) > P liof.

BANDEJAS CALENTADAS SERPENTN

REFRIGERADO BOMBA DE
VACO
P liof. > P cond. > Pv (T liof.)
LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.
DISPOSICIN DEL MATERIAL:
1. GRANEL: Bandejas de acero inoxidable
Fondo plano
Capas finas (1.5 - 2 cm)
2. DOSIS UNITARIAS: Viales, ampollas,
frascos
(hemoderivados)
LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

CONGELACIN:
En congeladores independientes o en el propio
liofilizador
OPERACIN CRTICA (cualidades producto final)
1. ESTTICA: Bandejas, viales
2. ROTACIN: Frascos grandes (EN BANDA)
TEMPERATURA CONGELACIN (- 40 C - - 50 C)
VELOCIDAD DE CONGELACIN
OBJETIVO: Congelar el agua libre del producto
VELOCIDAD DE CONGELACIN
Condiciona la estructura de la matriz congelada.

LENTA
CRISTALES
MAYORES

RPIDA
CRISTALES
PEQUEOS
 VELOCIDAD DE CONGELACIN
Condiciona la estructura de la matriz congelada.

CRISTALES MAYORES
Estructura porosa mayor
Menor resistencia al flujo
del vapor de agua
CRISTALES PEQUEOS
Menor duracin de la
desecacin primaria Estructura porosa ms fina

Estructura menos Mayor resistencia al flujo del

resistente vapor de agua
Mayor duracin de la
desecacin primaria
Estructura ms resistente
LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.
DESECACIN PRIMARIA: SUBLIMACIN
HIELO VAPOR (PRESIN MUY REDUCIDA)

BOMBA DE VACO
APORTE DE CALOR (Resistencias elctricas
Fluido caliente)

Velocidad de secado
Velocidad de calentamiento
LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.
DESECACIN PRIMARIA: SUBLIMACIN
P liof. > P cond. > Pv (T liof.)
El vapor de agua que se origina
se recoge en la superficie del
CONDENSADOR. El
condensador ha de tener
suficiente superficie y capacidad
de enfriamiento para condensar
todo el agua que sublima a una
Es necesario reducir la temperatura inferior a la del
presin en el interior de la producto. (Si la temperatura del
cmara y aplicar calor al condensador es superior a la del
producto (no subir la producto, el vapor de agua
temperatura) para que se tender hacia ste y se parar el
produzca la sublimacin proceso de secado).
(proceso endotrmico). T liof. > T cond.
DIAGRAMA DE CONTROL
T (C) P (mm Hg)
Temperatura de las bandejas
40
500
Temperatura
20 del producto

0 300

20

Presin 100
40

CONGELACIN DESECACIN DESECACIN

PRIMARIA SECUNDARIA
LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.
DESECACIN PRIMARIA: SUBLIMACIN
CONTROLES

CONTROL de la velocidad de secado:

Si es demasiado rpido, el producto seco fluir hacia el
condensador escapando junto al vapor de agua.
PRDIDA DE PRODUCTO POR ARRASTRE
SUSTANCIAS DE CARGAS (sacarosa, manitol,
glicina)
LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.
DESECACIN PRIMARIA: SUBLIMACIN
CONTROLES

CONTROL de la velocidad de calentamiento

de las bandejas:
Si se calienta demasiado rpidamente, el producto
fundir y a esas bajas presiones se producir una
ebullicin (PUFFING).
Consecuencia: cambios en las caractersticas fsicas
del producto, visualmente inaceptable y mucho ms
difcil de reconstituir.

MIENTRAS EXISTA AGUA LIBRE CONGELADA, LA

TEMPERATURA DEL PRODUCTO DEBE ESTAR POR
DEBAJO DE SU PUNTO EUTCTICO.
DIAGRAMA DE CONTROL
T (C) P (m Hg)
Temperatura de las bandejas
40
500
Temperatura
20 del producto

0 300

20

Presin 100
40

CONGELACIN DESECACIN DESECACIN

PRIMARIA SECUNDARIA
LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.
DESECACIN PRIMARIA: SUBLIMACIN
CONTROLES

Mientras dure la
T (C) Temperatura de P (m Hg)
las bandejas
sublimacin del agua
congelada, el producto se
mantendr fro.
Temperatura Por lo tanto, durante esta
del producto
Presin
fase la T del producto
deber estar por debajo
CONGELACIN DESECACIN DESECACIN de la T de las bandejas,
PRIMARIA SECUNDARIA
que est proporcionando
el calor de sublimacin.
LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.
DESECACIN PRIMARIA: SUBLIMACIN
CONTROLES

T (C) P (m Hg)
Al finalizar la
Temperatura de
las bandejas desecacin primaria, la
T del producto subir
asintticamente hacia
Temperatura
la T de las bandejas.
del producto
Presin
Esto (y otros mtodos)
permite detectar el
CONGELACIN DESECACIN DESECACIN punto final de esta
PRIMARIA SECUNDARIA
etapa.
LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.
DESECACIN SECUNDARIA:
DESORCIN (30 %)

AGUA LIGADA VAPOR

(no congelable)

Productos cristalinos: % muy bajo

Productos amorfos: % muy elevado

DURACIN de
esta etapa

HUMEDAD FINAL: << 1%

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.
DESECACIN SECUNDARIA:
DESORCIN (30 %) T (C) Temperatura de P (m Hg)
las bandejas

Como en este punto no

existe agua libre, la T
de las bandejas puede Temperatura
del producto
subir sin riesgo de que Presin
se produzca fusin.
CONGELACIN DESECACIN DESECACIN
PRIMARIA SECUNDARIA

La T se aumenta para producir la desorcin del agua ligada (ej., de

cristalizacin) hasta que la humedad residual del producto baje
hasta los lmites exigidos para garantizar su estabilidad.
Normalmente se realiza a la mxima capacidad de vaco que el
desecador pueda alcanzar.
LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.
DESECACIN SECUNDARIA:
DESORCIN (30 %) T (C) P (m Hg)
Temperatura de
las bandejas

HUMEDAD FINAL: << 1%

Temperatura
del producto
Presin

CONGELACIN DESECACIN DESECACIN

PRIMARIA SECUNDARIA

CONTROL FINAL DEL CONTENIDO DE HUMEDAD

Ej.: protenas y pptidos requiren de un contenido de
humedad determinado para mantener sus estructuras
secundarias y terciarias y, por tanto, su actividad.
Lyophilization equipment has improved over the years,
and, with the advent of automated, sophisticated
control mechanisms, has become much easier to use.
The complexity of the controls, however, has made
validation efforts more complicated and usually quite
time consuming.
In addition to cooling, heating, and vacuum control
functions already discussed, many freeze dryers will
also incorporate clean in place (CIP), sterilize in place
(SIP), computerized cycle control, and cycle monitoring
functions. The reliable reproducible performance of all
these functions must be validated rigorously to insure
consistent product quality.
 Quik-Dry Flasks
When a product is frozen in a thin layer on the inner wall
surface of a large-diameter flask using a shell freezer, the
overall sublimation rate significantly increases as compared to
the product frozen as a plug in the bottom of a similar flask.
Quik-Dry flasks feature a special shape to achieve a thin layer
of product when shell-freezing a horizontally placed flask.

Multi-Tainers
Rugged, stainless steel Multi-Tainers are used for freeze-
drying bulky materials or products which have already been
frozen in Petri dishes, serum vials, or similar containers.

Acid Filters
Acid filters protect vacuum pumps when freeze drying
acidic or organic solvents. Models are available for
manifold freeze-dryers with a vapor stream or in-line
design. Replacement cartridges are also available.

FREEZE-DRYERS BENCHTOP ACCESSORIES

http://www.tradar.com.ar/Castellano/Productos/Liofilizados/Alimentos%
20liofilizados.htm

https://www2.seguridad.com/edelweiss/secure/cat2/cocina/alimen/liofil.htm

http://www.agrotecnica.net/espanol/marcospductos.html

http://home.howstuffworks.com/freeze-drying2.htm

http://www.ftssystems.com/