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TEMA 10
1. Introduccin
2. El ADN como portador de la informacin genntica
3. Herencia y replicacin del ADN
4. Transcripcin y ARN
5. Cdigo gentico y traduccin. Sntesis de protenas
1. Introduccin
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Tema 10. Replicacin, transcripcin y traduccin Bioqumica
celular. Se consideraba ms probable que los genes estuvieran formados por protenas,
que eran molculas mucho ms complejas
El ADN posee la informacin necesaria para transmitir los caracteres de una especie
de generacin en generacin y conseguir la supervivencia de la especie. Por lo tanto
la molcula de ADN constituye la base qumica de la herencia. La mayora de las
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Tema 10. Replicacin, transcripcin y traduccin Bioqumica
Figura 1.
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Tema 10. Replicacin, transcripcin y traduccin Bioqumica
Semiconservador. Es decir cada hebra sirve como molde para la sntesis de una
nueva cadena, produciendo dos nuevas molculas de ADN, cada una con una de las
hebras viejas y una nueva hebra hija. Esta hiptesis fue propuesta pro Watson and
Crick poco despus de la publicacin del modelo de la doble hlice, y fue probado
definitivamente por los ingeniosos experimentos diseados por Meselson and Stahl
en 1957.
Meselson and Stahl cultivaron clulas de E.coli en medio con N15 (istopo pesado
de N14) durante muchas generaciones, hasta que todo el ADN de E. coli estuviera
marcado con N15. El ADN aislado de estas clulas tena una densidad un 1% mayor
que el ADN normal con N14. Esta pequea diferencia puede apreciarse en una
centrifugacin en gradiente de densidad CsCl.
Las clulas de E. coli cultivadas con N15 se transfierieron a medio fresco con N14, y
se dejaron crecer durante el tiempo suficiente para que la poblacin se duplicara. El
ADN aislado de estas clulas formaba una sola banda en la centrifugacin en
gradiente. Esto eliminaba al hiptesis de la replicacin conservadora. Si las clulas
de E. coli se dejaban en el medio fresco con N14 durante dos generaciones se
observaban en la centrifugacion en gradiente dos bandas. Una con la densidad
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Tema 10. Replicacin, transcripcin y traduccin Bioqumica
correspondiente al ADN ligero y otra con la densidad del ADN mixto obtenido en la
primera generacin. Esto descartaba tambin la hiptesis dispersante y confirmaba
la replicacin semiconservativa como la nica hiptesis posible.
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Tema 10. Replicacin, transcripcin y traduccin Bioqumica
puede variar desde unos cientos de nucletidos hasta unos miles, segn el tipo de
clula.
La replicacin se lleva a cabo gracias a la ADN polimerasa III, esta enzima cataliza
la unin de los desoxinucletidos trifosfato que son abundantes en el fluido del
ncleo celular. Estos desoxinucletidos trifosfato se desplazan hacia la parte
desenrollada de la molcula de ADN y se colocan por complementariedad enfrente
de la base que les corresponde (A=T; C=G) de la cadena que acta como molde, y
una vez que estn en el sitio adecuado se unen entre si por accin de la polimerasa
III. La adicin de dos unidades nucletidicas consecutivas tiene lugar mediante la
unin del grupo hidroxilo del carbono 3`de un nucletido con el grupo fosfato del
extremo 5`del siguiente. El mecanismo por el que se produce esta unin es un
ataque nucleoflico del grupo 3`-OH de un nucletido al 5`-trifosfato del nulcetido
adyacente, eliminndose el pirofosfato y formndose un enlace fosfodister. La
polimerasa lee la hebra que hace de molde en el sentido 3` 5` y sintetiza la nueva
hebra en el sentido 5` 3`. Esta enzima necesita para iniciar la sntesis un pequeo
fragmento de nucletidos que denominamos cebador. En la sntesis del cebador
interviene un tipo de ARN polimerasa denominado primasa.
Durante el proceso de replicacin, una de las cadenas madre se lee bien (en
sentido 3` 5`) y, por lo tanto, la nueva cadena se sintetiza de corrido (hebra
conductora), pero la otra est dispuesta en sentido contrario al que la polimerasa
puede leer (hebra retardada). La solucin a este problema es sintetizar la cadena en
pequeos fragmentos en el sentido 5` 3`. Los cebadores son luego eliminados por
la accin exonucleasa de la ADN polimerasa tipo I y los nuevos fragmentos
resultantes son unidos por la accin de la ligasa, que elimina las mellas que quedan
entre fragmentos. La secuencia de pasos implicados la replicacin del ADN puede
resumirse como sigue (Figura 2):
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Tema 10. Replicacin, transcripcin y traduccin Bioqumica
Figura 2.
4. Transcripcin y ARN
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Tema 10. Replicacin, transcripcin y traduccin Bioqumica
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Tema 10. Replicacin, transcripcin y traduccin Bioqumica
Figura 3.
La ARN polimerasa necesita al igual que la ADN polimerasa los cuatro nucletidos
trifosfato (ATP, GTP, CTP, UTP), Mg2+ y la cadena patrn de ADN cuya secuencia
determinar la del ARN, pero a diferencia de la ADN polimerasa no necesita cebador
para iniciar la sntesis de la cadena (Figura 3). La ARN polimerasa al igual que la
ADN polimerasa slo lee en el sentido 3` 5` y sintetiza la nueva hebra en el
sentido 5` 3`. La primera etapa del proceso de transcripcin es la unin de la ARN
polimerasa a la molcula de ADN; esta unin se produce por unas zonas especficas
del ADN denominadas promotores, que indican a la enzima que tiene que empezar a
transcribir. El reconocimiento del promotor es un paso crucial de la transcripcin,
tanto en lo que se refiere al mecanismo como para la regulacin de la transcripcin,
como veremos en el prximo tema. Tambin la terminacin obedece a ciertas
secuencias especficas denominadas secuencias de terminacin.
Los promotores son zonas especficas del ADN donde se une la ARN polimerasa
para empezar la transcripcin, y dirigen la transcripcin de los genes adyacentes.
Las secuencias de los promotores no son idnticas pero se han encontrado en
muchas bacterias ciertas secuencias que son particularmente comunes en ciertas
posiciones (secuencia consenso). Se sitan unos 10 y 35 nucletidos a la izquierda
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Figura 4.
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Tema 10. Replicacin, transcripcin y traduccin Bioqumica
La traduccin del ARNm tiene lugar en los ribosomas y sigue los mismos pasos en
procariotas y eucariotas. Cada triplete de nucletidos o codn del ARNm determina
un aminocido especfico. Cada molcula de ARNt porta el aminocido
correspondiente a un codn. El reconocimiento entre el ARNt y el codn tiene lugar
gracias al anticodn. Entre los dos aminocidos consecutivos debe formarse el
enlace peptdico, este paso est catalizado por la enzima peptidil transferasa. Luego
el ribosoma se transloca, desplazandose a lo largo de la cadena peptdica que se
est formando y dejando un sitio vacante para un nuevo ARNt-aminocido. La
traduccin contina hasta que aparece un codn de terminacin.
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Figura 5.
El cdigo gentico.
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Figura 6.
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