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Capítulo I Introducción Al Análisis Instrumental PDF
Capítulo I Introducción Al Análisis Instrumental PDF
CAPTULO I
INTRODUCCIN AL
ANLISIS
INSTRUMENTAL
seales analticas que se suelen utilizar en el anlisis instrumental. Obsrvese que las seis
primeras estn relacionadas con la radiacin electromagntica. En la primera, el analito origina la
seal radiante; las cinco restantes implican cambios en el haz de radiacin producidos a su paso
por la muestra. Las cuatro siguientes son elctricas. Por ltimo, cuatro seales diversas se
agrupan conjuntamente. Estas son la razn masa a carga, la velocidad de reaccin, las seales
trmicas y la radiactividad.
La segunda columna de la Tabla 1-1 indica los nombres de los mtodos instrumentales
basados en las distintas seales analticas. Debera entenderse que excepto en la cronologa,
pocas peculiaridades distinguen a los mtodos instrumentales de sus equivalentes clsicos.
Algunas tcnicas instrumentales son ms sensibles que las tcnicas clsicas, pero otras no. Un
mtodo instrumental puede ser ms selectivo para ciertas clases de elementos o de compuestos;
para otros, un planteamiento gravimtrico o volumtrico puede suponer una menor interferencia.
Igualmente difciles de establecer son las generalizaciones basadas en la exactitud, la
conveniencia, o el tiempo empleados. Tampoco es necesariamente cierto que los procedimientos
instrumentales utilicen aparatos ms sofisticados o ms costosos; en realidad, la moderna balanza
analtica electrnica que se emplea en las determinaciones gravimtricas supone un instrumento
ms complejo y refinado que muchos de los usados en los otros mtodos mencionados en la
Tabla 1-1.
Como ya se ha comentado anteriormente, adems de los numerosos mtodos indicados
en la segunda columna de la Tabla 1-1, existe un grupo de procedimientos instrumentales que se
utilizan para separar y resolver compuestos estrechamente relacionados. La mayora de estos
procedimientos se basan en la cromatografa. Para completar el anlisis tras las separaciones
cromatogrficas se suele usar alguna de las seales de la Tabla 1-1. Con esta finalidad se han
utilizado la conductividad trmica, la absorcin infrarroja y ultravioleta, el ndice de refraccin y la
conductancia elctrica.
Tabla 1.1 Seales utilizadas en los mtodos instrumentales
SEAL
METODOS INSTRUMENTALES
Emisin de radiacin
Absorcin de radiacin
Dispersin de la radiacin
Refraccin de la radiacin
Refractometra, interferometra
Difraccin de la radiacin
Rotacin de la radiacin
Potencial elctrico
Potenciometra, cronopotenciometra
Carga elctrica
Coulombimetra
Corriente elctrica
Polarografa, amperometra
Resistencia elctrica
Conductimetra
Espectrometra de masas
Mtodos cinticos
Propiedades trmicas
Radiactividad
1. Generadores de seales
Un generador de seales produce una seal que denota la presencia y, con frecuencia
tambin. la concentracin del analito. En muchos casos, el generador de seales es simplemente
un compuesto o un in generado a partir del propio analito. Por ejemplo un anlisis por emisin
atmica, el generador de seales son los tomos excitados o los iones del analito que emiten
fotones de radiacin. Otro ejemplo en una determinacin de pH, la seal es la actividad del in
hidrgeno de una disolucin de la muestra. Sin embargo, en muchos otros instrumentos el
generador de la seal est considerablemente ms elaborado. As, el generador de seales de un
instrumento de anlisis por absorcin infrarroja incluye, adems de la muestra, una fuente de
radiacin infrarroja, un monocromador, un divisor y un cortador (chop- per) del haz, un atenuador
de la radiacin y un recipiente de muestra.
La segunda columna de la Tabla 1-2 lista unos pocos ejemplos tpicos de generadores de
seales.
Fotmetro
Espectrofotmetro de
emisin
atmica
Coulombimetr
o
Medidor de pH
Difractmetro
de rayos X
para polvo
Comparador
de color
Generador de
seal
seal
analtica
Lmpara de
Tungsteno,
Haz de luz
filtro vidrio,
atenuado
muestra
Llama,
monocromador, Radiacin
cortador,
UV o visible
muestra.
Fuentecorriente
contnua,
Corriente de
muestra
la celda
Muestra
Transductor
de entrada
Seal
transducida
Procesador de
seal
Lectura
fotoclula
Corriente
elctrica
ninguno
Medidor de
corriente
Tubo
fotomultiplicador.
Potencial
elctrico
Amplificador
demodulador
Registrador
sobre papel
Electrodos
Corriente
elctrica
Amplificador
Registrador
sobre papel
Potencial
elctrico
Amplificador,
digitalizador
Unidad digital
Tubo de rayos
X, muestra
Radiacin
difractada
Pelcula
fotogrfica
Imagen
latente
Revelador
qumico
Luz solar,
muestra
Color
Ojo humano
Seal del
nervioptico
Cerebro
humano
Imgenes
ennegrecidas
en pelcula
Respuesta
visual color
Aunque la capacidad para separar las seales - que contienen datos significativos- del
ruido sin sentido siempre ha sido una propiedad deseable en cualquier instrumento, con la
demanda creciente de mediciones ms sensibles se ha convertido en algo indispensable. La
cantidad de ruido presente en un sistema instrumental determina la concentracin de analito ms
pequea que puede medirse con exactitud, y tambin fija la precisin de la medicin a
concentraciones ms grandes.
Los dos mtodos principales de acentuacin de la seal son 1) el uso de dispositivos
electrnicos, tales como filtros para reducir el ruido; la amplificacin (un proceso en el cual la seal
se multiplica por una constante mayor que la unidad); se atenan (proceso en el cual la seal se
multiplica por una constante menor que uno); se integran, se derivan se aumentan
exponencialmente; o algoritmos de programas computacionales equivalentes para procesar
seales a partir de la medicin mientras pasan a travs del instrumento, y 2) el tratamiento
matemtico de los datos, posterior a la medicin. Entre los mtodos posteriores a la medicin ms
tiles estn las tcnicas estadsticas; a dems de la acentuacin de la seal, estas tcnicas
ayudan a identificar las fuentes de error y a determinar la precisin, a la vez que proporcionan un
mtodo de comparacin objetiva de los resultados.
4. Dispositivos de lectura
Un dispositivo de lectura es un transductor que convierte una seal procesada en una
seal que puede ser entendida por un observador humano. Por lo general, la seal transducida
toma la forma de la posicin de una aguja en un medidor de escala, de una salida de un tubo de
rayos catdicos, de un trazo en un registrador de papel, de una serie de nmeros en una pantalla
digital, o del ennegrecimiento de una placa fotogrfica. En algunas ocasiones, el dispositivo de
lectura da directamente la concentracin de analito.
LA SELECCIN DE UN MTODO ANALITICO
La segunda columna de la Tabla 1-1 pone de manifiesto que el qumico moderno dispone
de una serie enorme de herramientas para realizar los anlisis tantas, de hecho, que la eleccin
entre ellas es a menudo difcil.
1. Definicin del problema
Para poder seleccionar de modo inteligente un mtodo analtico, es esencial definir con claridad la
naturaleza del problema analtico. Dicha definicin requiere la contestacin de las siguientes
cuestiones:
1. Qu exactitud y precisin se requiere?
2. De cunta muestra se dispone?
3. Cul es el intervalo de concentracin del analito?
4. Qu componentes de la muestra interferirn?
5. Cules son las propiedades fsicas y qumicas de la matriz de la muestra?
6. Cuntas muestras deben analizarse?
La respuesta a la pregunta 1 es de vital importancia ya que determina cunto tiempo y
esmero se precisar para el anlisis. Las respuestas a las preguntas 2 y 3 determinan cun
sensible debe ser el mtodo y a qu intervalo de concentraciones debe adaptarse. La respuesta a
la pregunta 4 determina la selectividad que requiere el mtodo. Las respuestas a la 5 son
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importantes porque algunos de los mtodos analticos de la Tabla 1-1 se aplican a disoluciones
(normalmente acuosas) del analito. Otros se aplican con mayor facilidad a muestras gaseosas,
mientras que unos terceros son adecuados para el anlisis directo de slidos.
Desde un punto de vista econmico, una consideracin importante es el nmero de
muestras que se tienen que analizar (pregunta 6). Si este nmero es elevado, se puede invertir
una cantidad considerable de tiempo y dinero en la instrumentacin, en el desarrollo del mtodo y
en la calibracin. Adems, si el nmero fuera muy elevado, debera elegirse un mtodo que
precisara del mnimo tiempo de operador por muestra. Por otro lado, si slo se tienen que analizar
unas pocas muestras, la eleccin prudente suele ser la de un mtodo ms sencillo aunque sea
ms largo pero que requiera poco o ningn trabajo preliminar.
Teniendo en cuenta las respuestas a las seis cuestiones anteriores, puede escogerse un
mtodo -siempre que se conozcan las caractersticas de funcionamiento de los distintos mtodos
instrumentales indicados en la Tabla 1-1.
CARACTERSTICAS DE FUNCIONAMIENTO
PARMETROS DE CALIDAD
DE
LOS
INSTRUMENTOS;
Criterio
Parmetro de calidad
entre los datos que se han obtenido de una misma forma. La precisin mide el error aleatorio, o
indeterminado, de un anlisis. Los parmetros de calidad de la precisin son la desviacin
estndar absoluta, la desviacin estndar relativa, la desviacin estndar relativa de la media, el
coeficiente de variacin y la varianza.
B. Exactitud: La exactitud mide el error sistemtico, o determinado, de un mtodo analtico. La
exactitud = u - x,
(1-1)
La Fig. 2.1 muestra una respuesta lineal (sensibilidad constante) en todo el intervalo de
concentraciones medidas, para las sustancias A y B. De las pendientes de las curvas se ve que la
sensibilidad del mtodo es mucho mayor para la sustancia B que para la A. La respuesta no lineal
en la Fig. 2.2 indica un cambio en el valor de la sensibilidad como funcin de la concentracin. Las
mediciones de sustancia C, como funcin de la concentracin, se van haciendo menos sensibles.
La sensibilidad tambin puede expresarse como la concentracin del analito necesaria para
causar una respuesta dada en el instrumento.
D. Lmite de deteccin: La definicin cualitativa ms aceptada del lmite de deteccin viene dada
por la concentracin o el peso mnimos de analito que pueden detectarse para un nivel de
confianza dado. Este lmite depende de la relacin entre la magnitud de la seal analtica y el valor
de las fluctuaciones estadsticas de la seal del blanco.
E. Intervalo de concentracin aplicable: La Figura 1.4 ilustra la definicin del intervalo til de un
mtodo analtico, que va desde la concentracin ms pequea con la que pueden realizarse
medidas cuantitativas (lmite de cuantificacin, LOQ) hasta la concentracin a la que la curva de
calibrado se desva de la linealidad (lmite de linealidad, LOL).
Figura 1.4 intervalo til de un mtodo analtico LOD = lmite de deteccin LOG = lmite de
cuantificacin LOL =lmite de respuesta lineal
F. Selectividad: La selectividad de un mtodo analtico denota el grado de ausencia de
interferencias debidas a otras especies contenidas en la matriz de la
muestra.
Desafortunadamente, ningn mtodo analtico est totalmente inafectado por otras especies y,
con frecuencia, diversas etapas se deben realizar para minimizar los efectos de estas
interferencias.
Para un problema analtico dado, los parmetros de calidad permiten al qumico reducir la
eleccin de los instrumentos a tan slo unos pocos. La seleccin entre stos puede entonces
basarse en los criterios cualitativos de funcionamiento sealados en la Tabla 1-4.
Tabla 1.4 Otras caractersticas a tener en cuenta en la eleccin del mtodo
1.
2.
3.
4.
5.
Velocidad
Facilidad y comodidad
Habilidad del operador
Coste y disponibilidad del equipo
Coste por muestra
EVALUACIN DE RESULTADOS
El control de las variables experimentales es usualmente difcil y a menudo imposible. Los
mtodos de muestreo, las tcnicas de los analistas y las respuestas instrumentales, son las
fuentes potenciales de error. Los mtodos estadsticos proporcionan un medio de evaluar,
objetivamente, la fuente y la magnitud del error en los mtodos analticos. La frase comn, dentro
del error experimental, carece de sentido si la magnitud del error no es definida mediante el uso
de tcnicas estadsticas.
TIPOS DE ERRORES
Para obtener resultados confiables a partir de un mtodo analtico, deben identificarse las
fuentes de error y cada una de ellas debe eliminarse o minimizarse. Los errores pueden ser
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interferentes sobre las medidas puedan mantenerse constantes; as puede realizarse la oportuna
correccin del error determinado por el interferente.
Muchas veces no se pueden eliminar todos los elementos interferentes durante la
preparacin de la muestra. A pesar de todo, los estndares, cuidadosamente preparados,
posibilitan la evaluacin de los efectos de cualquier elemento interferente y permiten corregir su
influencia sobre los resultados. De otra forma, no se podra hacer ninguna calibracin.
Si vara cualquier condicin o cualquiera de los pasos de la preparacin, los instrumentos
deben ser recalibrados y quizs se tengan que preparar nuevos estndares externos.
Ejemplo 1.
Quiere determinarse la concentracin de glucosa en una muestra que leda en el espectrofotmetro obtuvo
una Absorbancia de 0,250. Por otra parte, se prepararon una serie de soluciones patrn de glucosa cuyas
concentraciones se miden en g%mL. Las lecturas obtenidas de esta serie de estndares se presentan en la
tabla 1.
Tabla1. Lectura de soluciones estndar de glucosa de distintas concentraciones.
Concentracin Absorbancia
de glucosa (g
%mL)
250
0,56
200
0,45
150
0,33
100
0,21
75
0,15
50
0,1
0,6
0,4
Absorbancia
0,2
0
60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260
Concentracin g/100 mL
b) Resolucin matemtica:
Para trazar una recta son suficientes dos puntos, lo buscamos matemticamente. Estos corresponden a:
- Un patrn de concentracin exactamente conocida que llamaremos C p el cual tiene una absorbancia Ap.
- La muestra, de la cual del cual queremos saber su concentracin C x y conocemos su absorbancia Ax,
porque la hemos ledo en el espectrofotmetro.
Apliquemos la Ley de Lambert Beer para el problema:
para el patrn:
A p = a . b . Cp
para el problema: Ax = a . b . Cx
Como queremos saber la concentracin de glucosa en la muestra (C x), los dems datos son conocidos, si
los substitumos:
Ax = K C x
Sustituyendo en la ecuacin
( 2), el valor de K despejado de la ( 1 ) y reordenando obtenemos:
Cx = Cs Ax .
Vs
(AT - Ax ) Vx
Ax = Absorbancia de la muestra
AT = Absorbancia Total
Cx = concentracin de la muestra.
Cs = concentracin del estndar.
Vs = volmen del estndar.
Vx = volmen de la muestra.
6,99 ppm
mL
=
10 mL
b) Resolucin Grfica:
La resolucin grfica, usando el mtodo de las adiciones estndares, se muestra en la
figura 2. La escala de concentracin se encuentra sobre el eje de abscisas y en el eje de
ordenadas se encuentran las concentraciones de las soluciones estndar del analito
agregadas a la soluciones de muestra. La concentracin desconocida est dada por el
punto en el cul la lnea extrapolada corta el eje de concentracin. En este caso
corresponde a 7 ppm y coincide con los datos obtenidos por los otros mtodos.
que afectan las respuestas medidas, dichas respuestas del analito y del estndar interno deben
ser afectadas por igual.
Por lo tanto, el cociente de respuestas (del analito al estndar interno) depende solamente de la
concentracin del analito. Una grfica de la relacin o cociente de respuestas como funcin de la
concentracin del analito, da una curva de calibracin. El estndar debe aadirse al comienzo de
un anlisis para permitir su disolucin, mezclado y que ocurra cualquier reaccin antes de efectuar
cualquier medicin. Todos los equilibrios deben haberse establecido (y algunos pueden ser
dependientes del tiempo). La adicin de los estndares a la muestra disuelta puede llevar a una
interpretacin deficiente de los resultados si no se consideran las posibles reacciones entre la
sustancia estndar y otros componentes.
El estndar interno debe ser una sustancia similar al analito con una seal fcilmente medible
que no interfiere con la respuesta del analito, debe responder de manera similar a l, para
cualquiera de las variables que pudieran afectar la respuesta del detector. La concentracin del
estndar interno tiene que ser del mismo orden de magnitud que la del analito a fin de minimizar el
error al calcular los cocientes de respuestas. Este mtodo se usa ampliamente en los anlisis por
cromatografia de gases y por absorcin atmica y en menor grado, en las determinaciones
espectroscpicas de infrarrojo y de emisin.
Ejemplo 3.
Se determin un compuesto Cx en una muestra por fotometra de llama. Se emple el mtodo del
estndar interno, agregando cantidades crecientes del analito C x y cantidades iguales del
estndar Cs.b Los resultados obtenidos se muestran en la tabla 3. Calcular la concentracin de C x
de la muestra cuyas Intensidades fueron 33 para Cx y 9 para Cs.
Tabla 3. Absorbancias obtenidas en distintas soluciones del analito y la muestra luego de aadir
patrn interno.
Volumen
Cantidades
Cantidad constante Intensidad Intensidad
de muestra crecientes de Cx de patrn interno Cs
de Cx
de Cs
10 mL
0 ppm
1 ppm
33
9
10 mL
1 ppm
1 ppm
9
9
10 mL
2 ppm
1 ppm
14,3
9,5
10 mL
3 ppm
1 ppm
21,2
8,5
10 mL
4 ppm
1 ppm
34,4
9
a) Resolucin por mtodo grfico:
Calcular las relaciones: Ix / Is y luego graficar como se indica a continuacin:
Volumen
de
muestra
10 mL
10 mL
10 mL
10 mL
10 mL
4
3
Relacin Ix/Is
2
1
0
0,5
1,5
2,5
3,5
4,5
ppm de Cx
Figura 1.6. Grfica de los valores de relacin Ix/Is vs. concentracin de en ppm
GUA TERICA
INTRODUCCIN AL ANALISIS INSRTUMENTAL
1- Teniendo en cuenta las propiedades fsicas que se pueden utilizar como seales analticas en los
mtodos instrumentales, complete el siguiente cuadro:
Propiedades fsicas
Mtodo instrumental
2- Complete el siguiente cuadro teniendo en cuenta los diferentes componentes de los instrumentos.
Generador de
Seal
Transductor
Seal
Procesador
Instrumento
Lectura
seal
analtica
de entrada transducida
de seal
Fotmetro
Espectrofotmetro de
emisin
atmica
Coulombimetr
o
Medidor de pH
Difractmetro
de rayos X
para polvo
Captulo I Introduccin al Anlisis Instrumental
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Comparador
de color
3- Qu consideraciones debe tener en cuenta al seleccionar un mtodo analtico?
Criterio
Parmetro de calidad
Estndar interno
Adicin estndar