ESTERILIZACIN

Mercedes Fernndez Arvalo

ESTERILIDAD
DEFINICIN:
Ausencia de todas las formas de vida
viables
Imposible en trminos absolutos
(Probabilidad matemtica)
En la prctica: no se detecta ningn
microorganismo en cultivo

Esterilizacin
PROCESO DINNICO:
Depende de:
Producto (naturaleza, cantidad, grado
inicial de contaminacin)
Equipo
Condiciones de trabajo
POSIBILIDAD DE DAOS
IRREVERSIBLES EN DETERMINADAS
ESTRUCTURAS MOLECULARES
PRECAUCIN

Modos de actuacin

PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA:
Daos en protenas y lpidos, provocando
extravasacin del contenido

DAOS EN PROTENAS Y CIDOS

NUCLEICOS:
El calor y las radiaciones afecta a la
estructura 3-D de las protenas, daando
DNA y RNA.

Tcnicas de esterilizacin

AGENTES FSICOS
Calor (hmedo, seco)
Radiaciones (UV, ionizantes)
Filtracin y manipulacin asptica

AGENTES QUMICOS
Gaseosos

Se selecciona en funcin de
la estabilidad del material

Tcnicas de esterilizacin

AGENTES FSICOS
Calor (hmedo, seco)
Radiaciones (UV, ionizantes)
Filtracin y manipulacin asptica

AGENTES QUMICOS
Gaseosos

Se selecciona en funcin de
la estabilidad del material

Esterilizacin por calor:

Conceptos
La resistencia al calor vara segn el
microorganismo

Tiempo de reduccin decimal (D): una reduccin

del 10 % de la poblacin a una T determinada

Thermal Death Point (TDP): T menor a la que

mueren todos los microorganismos en 10
minutos
Thermal Death Time (TDT): tiempo al que
mueren todos los microorganismos a una T
determinada

Esterilizacin por calor: cintica

El proceso es exponencial
La velocidad depende de la T

Log Clulas #
10

500C
9

600C
8
0

800C
10

20

30

40

Esterilizacin por calor: cintica

Si la velocidad (-T-) es la misma, se necesitar ms tiempo en
esterilizar un producto con mayor grado de contaminacin

Log Clulas #
10
500C
9
600C

8
0

600C

10

20

30

40

Esterilizacin por calor

El calor produce modificaciones estructurales de

componentes celulares no compatibles con la vida
Eficacia = f(Q, t, presencia de agua)
Calor hmedo (coagulacin y desnaturalizacin
de protena esenciales)
<t

- <T

Calor seco (procesos de oxidacin)

>t

- >T


S
NO
E
G

IR
P
NA
I
M
LI
E
NO

Calor hmedo

AGUA HIRVIENDO:
Uso domiciliario (condiciones) T = 100 C P = 1 atm
Son sensibles numerosos patgenos, bacterias, virus y hongos
No se destruyen algunas endosporas y virus de hepatitis

TINDALIZACIN:

Elimina esporas

T = 100 C P = 1 atm
t = 20 45 min / da * 3 das
BAJO P y T
(AUTOCLAVE)

Calor hmedo: AUTOCLAVE

En esencia, un autoclave es un recipiente en el
que se consigue exponer el material a esterilizar
a temperaturas superiores a la de ebullicin del
agua, gracias a aumentar la presin.

Cmara de autoclave
Instalaciones perifricas
Elementos de control (registro de P y T)

FASES DEL PROCESO:

1. Calentamiento
2. Esterilizacin
3. Enfriamiento

Calor hmedo: AUTOCLAVE

1. FASE DE CALENTAMIENTO:
A medida que la resistencia calienta el agua del fondo de la cmara, se va
produciendo vapor que desplaza el aire, hacindolo salir por la vlvula de
purgado que est abierta.
Esta fase termina cuando se alcanza la temperatura de esterilizacin y se
cierra la vlvula.

Calor hmedo: AUTOCLAVE

2. FASE DE ESTERILIZACIN:
Una vez cerrada la vlvula de purgado y alcanzada la temperatura de
esterilizacin previamente seleccionada se inicia el proceso de esterilizacin.
T = 120 C

P = 2 atm

t 20
t de esterilizacin (cepa control) al
que se aade un t de seguridad

T-P

Calor hmedo: AUTOCLAVE

3. FASE DE DESCARGA:
DESCARGA
Terminado el proceso de esterilizacin, deja de funcionar la resistencia
calefactora, con lo que deja de producirse vapor y la presin y temperatura de
la cmara empiezan a bajar poco a poco.

DURACIN TOTAL DE PROCESO = 2 - 3 h

Calor hmedo: AUTOCLAVE

Algunas normas a tener en cuenta:
Para que la esterilizacin sea eficaz, la temperatura y el tiempo
seleccionados deben alcanzarse en todo el lquido. Como la
transmisin del calor en el lquido de los recipientes se realiza de
fuera hacia dentro, es evidente que la eficacia del proceso
depender del volumen de lquido.
En general, no conviene esterilizar juntos recipientes grandes y
pequeos.
En todo caso la seleccin de la temperatura y tiempo se efectuar
segn sea el volumen de los recipientes.
Los recipientes vacos precisan de un tiempo de esterilizacin mayor
que los recipientes con lquido en su interior.
Hay que tener en cuenta que algunos productos son termolbiles a
las temperaturas de esterilizacin con autoclave.
En esos casos es preciso utilizar otros sistemas de esterilizacin,
como el filtrado.

Calor hmedo: AUTOCLAVE

VENTAJAS:
Econmico
Alta eficacia de destruccin
No deja resduos txicos
Proceso fcilmente monitorizado
APLICACIONES:
Materiales porosos
Materiales quirrgicos
Productos lquidos
Materiales plsticos (propileno, polietileno de alta densidad...)

NO VLIDO PARA PRODUCTOS TERMOLBILES

NO VLIDO PARA FLUDOS NO ACUOSOS (ej.: emulsiones)

Calor hmedo: AUTOCLAVE

Autoclave porttil Modelo 0080 Marca Autoclean.
Fabricada especialmente para Tattoomania. 6 Meses de
Garantia en todos sus componentes. Esteriliza a 121
Centigrados. Con 4 ciclos de esterilizacin : 15, 20, 30 y 60
minutos. Su sistema comienza a contar el tiempo a partir
de que alcanza la temperatura necesaria y apaga
automaticamente, incluye aditamento para enfirado rapido
(sic). www.tattoomaniastudio.com/ ta2

Pasteurizacin
)

Pasteurizacin clsica:
Calentamiento de un producto (leche) a 63 C
durante 30

High temperature short time

pasteurization (HTST):
Calentamiento a 72 C durante 15

Ultra high temperature treatment (UHTT):

Calentamiento a 140 C durante 1

A
N
I
IM
EL

S
NO
E
G

R
PI

Calor seco

Vlido para productos termoestables e inestables

(o no sensibles) a la humedad).
>t

>T

Flameado (microbiologa)
Estufas de aire circulante (proceso discontinuo)
Tneles de aire circulante (proceso continuo)
FILTROS HEPA ( 0.3m)
Eficacia de retencin > 99.97 %)

Calor seco
Estufas de aire circulante (proceso discontinuo)
FASES DEL PROCESO:
Secado y calentamiento
Esterilizacin (30 a 250 - 350 C)
Enfriamiento

DISPOSICIN DE LOS
MATERIALES
(circulacin del aire)

Calor seco
Tneles de aire circulante (proceso continuo, industrial)
FILTRO HEPA

Secado y
calentamiento

Esterilizacin

Enfriamiento

Calor seco
APLICACIONES:
Fluidos no acuosos estables al calor (ceras,
aceites, parafinas, glicerol, ...)
Material de vidrio (ampollas, viales, frascos)
Algodn, gasas
Slidos sensibles a la humedad
S ELIMINA PIRGENOS (>T por >t)
PRIONES (agentes infecciosos ms resistentes
al Q, resisten T = 134 - 138 C / 1 h)

Tcnicas de esterilizacin

AGENTES FSICOS
Calor (hmedo, seco)
Radiaciones (UV, ionizantes)
Filtracin y manipulacin asptica

AGENTES QUMICOS
Gaseosos

Se selecciona en funcin de
la estabilidad del material

Esterilizacin por radiaciones

RADIACIONES UV
226 328 nm
Alteran estructuras del ADN y del ARN
Aplicaciones:
Disminuir contaminacin aire y superficies de trabajo
Quirfanos
Mantener esterilidad zonas de trabajo
Agua (concentracin de solutos)
DESVENTAJAS
Escaso poder de penetracin
No vlido para medicamentos

PROTECCIN TOTAL DE USUARIOS

Esterilizacin por radiaciones

RADIACIONES UV
Mail sterilization equipment. ICU
Corp. is now able to offer corporate
America the equipment necessary to
conduct business through the US mail,
regardless of the possibilities of
contamination. All possible biological
warfare agents are rendered harmless.
All of ICU Corp's mail sterilization
equipment utilizes Ultra-violet light to
kill any bacteria, viruses and any other
pathogens, that may have come into
contact with your mail (sic).

Esterilizacin por radiaciones

RADIACIONES IONIZANTES
Radiaciones con menores longitudes de ondas (R- y R- x)
Mayores contenido energtico y potencial de penetracin
Mayor rapidez de accin
Producen radicales OH, H que reaccionan con
estructuras proteicas, lpdicas y cidos nucleicos
Aplicaciones:
Frmacos termolbiles (vitaminas, hormonas,
antibiticos,)
Material mdico termolbil (jeringas, sondas, catteres,
implantes, prtesis,)

COSTE: EMPRESAS ESPECIALIZADAS

NORMAS DE SEGURIDAD

Esterilizacin por filtracin

ESTERILIZACIN POR ELIMINACIN FSICA
DE LOS CONTAMINANTES PRESENTES
EN UN FLUIDO, SIN PRODUCIR NI LA
INACTIVACIN NI LA MUERTE DE LOS
MICRORGANISMOS
Aplicaciones:
Soluciones de productos termolbiles
Filtracin de aire en zonas lmpias y cabinas
de flujo laminar
Farmacia Hospitalaria: Preparados
extemporneos

Esterilizacin por filtracin

NO ES UNA ETAPA DE
ESTERILIZACIN TERMINAL
PROCESAMIENTO POSTERIOR
Condiciones aspticas (personal, zona)
(No suele aceptarse por las autoridades
sanitarias)

Esterilizacin por filtracin

FILTROS DE MEMBRANA
HEPA: high-efficiency particulate air filters (0.3 m,
usados en hospitales)
0.22 m -0.45 m (0.1 m)
Composicin: acetato/nitrato de celulosa, tefln, nylon,
Compatibilidad, cesin de aditivos, integridad,
esterilizables (mejor desechables,)

Tcnicas de esterilizacin

AGENTES FSICOS
Calor (hmedo, seco)
Radiaciones (UV, ionizantes)
Filtracin y manipulacin asptica

AGENTES QUMICOS
Gaseosos

Se selecciona en funcin de
la estabilidad del material

Esterilizacin por agentes

qumicos
xido de etileno (C2H4O)
xido de propileno (C3H6O)
Cloro (Cl2)
Dixido de cloro (ClO2)
Ozono (O3)

Esterilizacin por agentes qumicos

xido de etileno (C2H4O)

Alquilacin de molculas nucleoflicas

Altamente inflamable (se mezcla con
gases inertes: CO2, N2, Freones)
Alta capacidad de penetracin
Manipulacin peligrosa
(MUTAGNICO, CARCINOGENTICO)
Gas: irritacin, nuseas, vmitos
Lquido: irritacin y lesiones oculares,
quemaduras por congelcin
Toxicidad ambiental y residual
Ciclos de esterilizacin largos y
complejos (T, HR, t, [ ])

Esterilizacin por agentes qumicos

xido de etileno (C2H4O)
APLICACIONES
Materiales plsticos
Acero inoxidable
Instrumental delicado

No existen condiciones estndares

Concentracin: 450 1000 mg/l
Temperatura: 30 60 C
Humedad relativa: 20 65 %
Presin
Tiempo exposicin: 1 30 h
Tiempo aireacin: 20 500 h (t legislados)

Esterilizacin por agentes qumicos

CONTROLES DE ESTERILIZACIN
CONTROLES BIOLGICOS Bacilus stearothermophilus
Bacilus subtilis

Cultivos

Inoculacin

Incubacin

En cabinas
de FL (no
esterilizan)

(Usando la
tcnica de
esterilizacin)

(7 das)

Chequeo
diario

MANIPULACIN ASPTICA
RECINTOS CON FLUJO DE AIRE LAMINAR
Filtros HEPA
Desplazamiento del aire dentro de un recinto a
velocidad uniforme y a lo largo de lneas paralelas
Se transportan las partculas suspendidas en el aire
Velocidad: 0.45 m/s partculas < 15 m
Cabinas (menos costosas que salas completas con
flujo de aire laminar
Flujo de aire laminar horizontal
Flujo de aire laminar vertical

MANIPULACIN ASPTICA
CABINAS DE FLUJO LAMINAR
VERTICALES

MANIPULACIN ASPTICA
CABINAS DE FLUJO LAMINAR
HORIZONTALES

MANIPULACIN ASPTICA
ZONAS LIMPIAS (Cleanroms)
Cualquier recinto cerrado en donde
entra aire filtrado por filtros HEPA y
en donde se trabaja bajo presin
positiva.
Zonas que proporcionan proteccin
al producto con el que se est
trabajando permitiendo flexibilidad
durante la manipulacin.
(i.e., Class 10 = 10 particles per cubic foot; Class 1,000 = 1,000 particles per
cubic foot, etc.). Counts may be as high as 100,000 particles per cubic foot of
air. The class of cleanrooms required will determine the quantity and type of
HEPA or other filters needed.

PLASTIC HARDWALL CLEAN ROOM

Acrylic, Lexan
(polycarbonate) or
dissipative PVC rigid panels
are internally mounted to
powder-coated steel frame to
create smooth, easy-clean
surfaces

http://www.terrauniversal.com/products/cleanrooms/biosafe.php

PLASTIC SOFTWALL CLEAN ROOM

MANIPULACIN ASPTICA
CABINAS DE BIOSEGURIDAD
Class I. Biosafety cabinet is a ventilated cabinet with an inward
airflow and outlet HEPA filters (protects personnel and the
environment, no product protection) (obsolete).
Class II. Laminar Flow Biological Safety Cabinets that protect
personnel, product and environment. They provide inward airflow to
protect personnel, downflow HEPA filtered air to the work area to
protect the product and exhaust HEPA filtered air to protect the
environment from particulate and aerosol hazards.
Class III. Glovebox. This is a gas-tight chamber operated through
sealed gloves which provide a complete barrier between the worker
and hazardous material. The Glovebox is maintained under negative
pressure with HEPA filtered supply air and double HEPA filtered
exhaust air.

CABINAS DE BIOSEGURIDAD
www.germfree.com

CABINAS DE BIOSEGURIDAD

ALL-STEEL BIOSAFE ROOM

304/316 stainless steel or powdercoated steel panels can be cleaned and
sterilized with industry-standard
disinfectants
Rounded corners and ultra-smooth
interior surfaces eliminate germ traps
Anti-microbial coatings available

http://www.terrauniversal.com/products/cleanrooms/biosafe.php