Esterilización calor seco y

húmedo
Unidad 2, Microbiología Ii
QFB. Thalia Liseth Velasco Villafuerte
ESTERILIZACION

Es la condición de estar libre de

microorganismos en cualquiera de sus
formas puede realizarse por métodos
físicos y químicos.
Métodos de Esterilización

FÍSICOS Calor seco

Calor húmedo
(autoclave)

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 Tipos de calor
1.-Seco
a)Incineración
b)Flameado
c)Aire caliente

2.-Húmedo:
d)Agua hirviendo
e)Pasteurizacion
f)Ultrapasteurizacion
g)Tindalización (esterilización fraccionada)
h)Autoclave de vapor
 1.-Calor seco
Todos los microorganismos son susceptibles, en distinto grado, a la
acción del calor.

El calor provoca desnaturalización de proteínas, fusión y

desorganización de las membranas y/o procesos oxidativos
irreversibles en los microorganismos.

La efectividad del calor como método de esterilización depende de:

Temperatura y Tiempo de exposición
 a) Incineración
Es una de las tecnologías térmicas existentes para el tratamiento de residuos.

Incineración es la quema de materiales a alta temperatura (generalmente superior a

900°C), mezclados con una cantidad apropiada de aire durante un tiempo
predeterminado.

En el caso de incineración de los residuos sólidos, los compuestos orgánicos son

reducidos a sus constituyentes minerales, principalmente dióxido de carbono
gaseoso, vapor de agua, y sólidos inorgánicos (cenizas).
 b) Flameado
Se aplica directamente la llama de un mechero.

Se utiliza para la esterilización de asas e hilos de siembra, pinzas  así

como las bocas de tubos y matraces antes y después de utilizarlos.

La incineración se emplea para destruir materiales de desecho

contaminados.
 c) Aire caliente
Alcanzan temperaturas mayores a 150ºC. Las condiciones usuales de
esterilización son de 160-180ºC durante 1-2 horas.

Las ventajas son que penetra en materiales insolubles en agua (aceites,

grasas) y es menos corrosivo sobre metales que el calor húmedo.

Se utiliza para la esterilización de materiales secos, grasas, aceites,

material de vidrio y metales  termorresistentes

160º C x 2 hs
170º C x 1 hs
180º C x 30 minutos
Estufas de esterilización
 2.-Calor húmedo
El calor húmedo destruye los microorganismos por coagulación
de sus proteínas celulares.

El principal método de esterilización que emplea calor húmedo

es la esterilización por vapor a presión.

Existen otros métodos de descontaminación que emplean este

tipo de calor los cuales, aunque no permiten la destrucción total
de los microorganismos, disminuyen la carga microbiana que
posee un material.
 a) Agua hirviendo
Se considera que se debe mantener el agua hirviendo (100°C) y
el material durante 5 minutos totalmente sumergido en el agua.

Se considera más un método de desinfección, pero no asegura la

esterilización.
 b) Pasteurización
Es un método que reduce la cantidad de microorganismos viables.

No es un método de esterilización pues no destruye esporas bacterianas.

Es utilizada en la industria alimentaria. Hay dos tipos de tratamiento: la

pasterurización a baja temperatura y mayor tiempo (63ºC/30 minutos) y la
pasteurización a alta temperatura y corto tiempo (72ºC/15 segundos).
 c) Ultra pasteurización
Variante de la pasteurización (ultrarrápida) en la que la
temperatura se eleva por encima de 150ºC durante unos segundos
d) Tindalización (calentamiento
intermitente)
Calentar a 80º C x 30 min., luego incubar el medio 24 hs a 35º C.
Volver a repetir este proceso por 3 a 5 días sucesivos

Para líquidos que no resisten temperaturas altas. Ha sido reemplazada

por la filtración de membrana
e) Esterilización por vapor
a presión
La esterilización por vapor a presión se lleva a cabo en un
autoclave.

Estos equipos emplean vapor de agua saturado, a una presión de

15 libras lo que permite que la cámara alcance una temperatura
de 121ºC.

El tiempo de esterilización usualmente es de 15 minutos, sin

embargo, en algunas oportunidades, dadas las características del
material, es necesario variar el tiempo de esterilización.
Cuando se utiliza este método es importante controlar en el
autoclave la relación entre la temperatura, la presión y el tiempo
de exposición, ya que éstos son factores críticos en el proceso.

Sólo cuando el vapor se coloca bajo presión, es cuando su

temperatura aumenta por encima de los 100ºC y esto permite
alcanzar las temperaturas de esterilización (121ºC).
 Ventajas
Entre las ventajas de este método de esterilización tenemos que
no deja residuos, los autoclaves modernos son sencillos de
manejar y es un método rápido de esterilización.

Éste es el método de elección para esterilizar materiales

termoestables y no sensibles a la humedad como medios de
cultivo, cultivos de microorganismos para descartar, lencería,
uniformes, instrumentos quirúrgicos, etc.
 Desventaja

Entre sus desventajas están que no permite la esterilización de

materiales sensibles al calor y materiales no miscibles con el
agua como es el caso de polvos, aceites y grasas.
 Precauciones
• Antes de comenzar el proceso de esterilización es necesario
remover todo el aire de la cámara del autoclave, porque de lo
contrario no se podrán alcanzar las condiciones de esterilización
requeridas debido a que la cámara interna del equipo no podrá ser
saturada por el vapor de agua.

• El tiempo de esterilización se debe comenzar a contar una vez

que se han alcanzado los 121ºC en la cámara interna del
autoclave.
• Si se van a esterilizar materiales tales como instrumentos
quirúrgicos, equipos, etc. no se deben cubrir con materiales
impermeables al agua como por ejemplo el papel de aluminio,
porque éste no permite que el vapor tenga acceso al material y
por lo tanto no se logrará la esterilización.

• Cuando se coloca el material a esterilizar en el interior del

equipo se debe garantizar la libre circulación del vapor de agua
alrededor de todo el material.
¿Dudas?
 Autoclaves
Verticales Horizontales
 Uso de autoclave
1. Retira el recipiente interno o parrilla
2. Agrega agua hasta la marca
3. Coloca el recipiente interno o parrilla
4. Coloca el material para esterilizar
5. Cierra la tapa, ten cuidado de que cierre bien
6. Si tiene mariposas para cerrar, se debe realizar de manera
contraria al mismo tiempo
7. Colocar la olla en un soporte y prender los mecheros bunsen
fisher (pueden ser 2 o 3)
8. Esperar que salga el vapor constante por la válvula
9. Cerrar la válvula
10. Revisar el mechero y cuando llega a la temperatura y presión,
empezar a contar el tiempo
• Terminado el tiempo de esterilización, apagar los mecheros
• Esperar que la presión baje a por lo menos 10libras
• Abrir con cuidado la válvula
• Después abrir la autoclave cuidando levantar la tapa al lado
contrario de donde estén.
• Sacar con cuidado el material
Controles de Calidad
 Indicadores físicos
Para controlar la esterilización por vapor a presión se emplean
indicadores físicos tales como medidores de presión,
termómetros, o termógrafos.

Aunque estos controles son ampliamente utilizados, actualmente

se consideran métodos secundarios para el control del proceso y
son los indicadores biológicos los que permiten determinar si
realmente se llevó a cabo en forma efectiva la esterilización.
 Indicadores biológicos
Entre los indicadores biológicos más utilizados para controlar el
proceso de esterilización, se encuentran las esporas de Bacillus
stearothermophilus que son altamente resistentes a este proceso.

Se recomienda el uso de controles biológicos por lo menos una

vez a la semana para verificar el buen funcionamiento del
autoclave. En caso de que se sospeche de alguna falla se debe
colocar un indicador biológico en cada carga de esterilización.
¿Dudas?
• https://www.youtube.com/watch?v=Nw5DkCnVEWw