INFORME DE OPERACIONES UNITARIAS I

PRACTICA 2. METODOS DE ESTERILIZACION

LABORATORIO Nº2
ESTERILIZACIÒN
Mora Velandia Brianny Jasley (1611077) ; Flórez Jennifer Adriana (1611367)
Laboratorio Operaciones Unitarias I
Profesor: Carlos Eugenio Torres Poveda
Ingeniería Biotecnológica
Facultad ciencias agrarias y del ambiente.
Universidad Francisco de Paula Santander.

RESUMEN
Todo tipo de trabajo realizado en los laboratorios requiere siempre ciertos parámetros
para llevar acabo un control de las poblaciones microbianas. Por ente se lleva a cabo un
proceso conocido como la esterilización se define como “el proceso mediante el cual se
eliminan todos los microorganismos (incluyendo formas de resistencia) de un objeto,
medio o superficie”. La esterilización puede ser preparativa, en la que los materiales a
utilizar en el laboratorio o durante distintos procesos deben ser esterilizados antes del
mismo trabajo; pero también es necesaria la esterilización antes de desechar el material
ya utilizado y contaminado en el laboratorio, en cuyo caso se habla de esterilización
final y su aplicación garantiza la ausencia de microorganismos en el material y equipos
a ser empleados. Existen diversos métodos de esterilización, entre ellos: calor (seco o
húmedo), filtración (para sustancias termolábiles y aire), radiaciones y aplicación de gas
de óxido de etileno (para material de plástico), etc. Las técnicas de esterilización
aplicables dependen directamente de las características del material de trabajo. En este
documento se describen las técnicas de esterilización más habitualmente utilizadas en
un laboratorio de Operaciones Unitarias y de metodologías de control de la
esterilización.

Palabras claves: Esterilización, calor seco, calor húmedo, filtración, radiaciones.

ABSTRAD
All types of work carried out in laboratories always require certain parameters to carry
out a control of microbial populations. Entity carries out a process known as
sterilization is defined as "the process by which all microorganisms (including forms of
resistance) are removed from an object, medium or surface." Sterilization can be
preparative, in which the materials to be used in the laboratory or during different
processes must be sterilized before the same work; but sterilization is also necessary
before disposing of the material already used and contaminated in the laboratory, in
which case we speak of final sterilization and its application guarantees the absence of
microorganisms in the material and equipment to be used. There are various sterilization
methods, including: heat (dry or wet), filtration (for heat-labile substances and air),
radiation and application of ethylene oxide gas (for plastic material), etc. The applicable
sterilization techniques depend directly on the characteristics of the work material. This
document describes the most commonly used sterilization techniques in a Unit
Operations laboratory and sterilization control methodologies.

Keywords: Sterilization, dry heat, humid heat, filtration, radiation.

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INTRODUCCION
La esterilización es un proceso a través
del que se puede lograr la destrucción
total de los microorganismos viables
presentes en un determinado material.
La esterilización es el proceso de
eliminación de toda forma de vida,
incluidas las esporas. Es un término
absoluto que implica pérdida de la
viabilidad o eliminación de todos los
microorganismos contenidos en un
objeto o sustancia, acondicionado de tal
modo que impida su posterior
contaminación.
En el laboratorio la esterilización se
puede utilizar como esterilización
preparativa o como esterilización final.
La esterilización preparativa es la que
se realiza para mantener libre de
microorganismos los equipos que
vamos a utilizar antes de empezar el
trabajo en sí mismo o durante el proceso
de trabajo (caldera, cristalizador,
analizador de gases de combustión,
extractor solido-liquido, etc.) La
esterilización final sin embargo tiene
como único fin destruir los
microorganismos con los que se ha
estado trabajando. En el primer caso, la
elección del proceso de esterilización se
debe adecuar para preservar las
características de los diversos equipos
esterilizar, pues algunos pueden ser
susceptibles de ser destruidos o
alterados, durante los mecanismos de
esterilización. Sin embargo, en la
esterilización final no es necesario
considerar la posible alteración de los
equipos, excepto para tener la
constancia de que el proceso ha
conseguido su finalidad, es decir, la
muerte de todos los microorganismos.
 METODOS DE
ESTERILIZACION
1. AGENTES FÍSICOS:
CALOR: La utilización de este método
y su eficacia depende de dos factores: el
tiempo de exposición y la temperatura.
El calor provoca desnaturalización de
proteínas, fusión y desorganización de
las membranas y/o procesos oxidantes
irreversibles en los microorganismos.
A) Acción directa: flameado,
quemado directo
B) Calor seco: aire caliente en el
horno
C) Calor húmedo: ebullición,
vapor fluente, vapor discontinuo
o tindalización y vapor saturado
a presión
1. Autoclave: Se utiliza para
esterilizar medios de cultivo,
instrumentos, equipos y otros
muchos artículos que puedan
soportar altas temperaturas y presión
2. Centrifugación: Es otro método
utilizado para esterilizar, se
requieren temperaturas de 120º a
180ºC
3. Radiaciones: Encontramos
corpúsculos ionizantes y longitud
“luz ultravioleta” y su acción
depende del tiempo de radiación,
tiempo de exposición (rayos
ultravioletas, rayos gamma, rayos
x).
2. AGENTES QUIMICOS:
Líquidos: Glutaraldehído, peróxido de
hidrogeno, ácido peracético
Gaseosos: Óxido de etileno,
formaldehido
Plasma: Plasma de peróxido de
hidrogeno, plasma de acido peracético
AGENTES MECANICOS:
Filtración: Se usan membranas
filtrantes con poros de un tamaño
determinado, el tamaño del poro
dependerá del uso al que se va someter
la muestra. Los filtros que se utilizan no
retienen virus ni micoplasmas.
Calor húmedo (Autoclave): 
 Características: Es el medio más
práctico y eficaz para la esterilización
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en el consultorio estomatológico.          * Temperatura 132 ºC; Presión 30

La                             esterilización psi; Tiempo 10 min. 
se logra por el vapor de agua          * Temperatura 121 ºC; Presión 15
supercalentado y mantenido a presión, psi;  Tiempo 20 min. 
que provee una caldera de metal           Según la Organización Panamericana de
de paredes resistentes y tapa de cierre la Salud (OPS): 
hermético. Se compone de un cilindro           * Temperatura 134 ºC; Presión 2
de cobre, con una tapa en su parte                   kg/cm2; Tiempo 3 a 5 min 
anterior, la que cierra herméticamente.            * Temperatura 121 ºC; Presión
En su interior hay varias divisiones 1,05 kg/cm2; tiempo 15 a 20 min 
donde se coloca el material a esterilizar.  De manera general en los Servicios
En su parte inferior hay un recipiente Estomatológicos del país se esteriliza
que         se llena de agua, la que al según las normas vigentes 
recibir el calor de un serpentín de gas o           * Temperatura 121 ºC a 126ºC;
eléctrico, entra en ebullición y produce Presión 1,05 kg/cm2; Tiempo 15 a 20
el vapor de         agua necesario para la min
esterilización.  
La parte superior de este equipo Recomendaciones para el uso: 
presenta 3 aberturas; en una de ellas hay    * Seguir las orientaciones del
una válvula de seguridad que funciona               fabricante y dar mantenimiento
con un contrapeso que sirve para periódico al aparato 
comunicarse con el exterior; al frente    * Evitar el exceso de agua que causa
tiene dos relojes, una que indica la humedad en los paquetes 
presión y             otro la temperatura    * Evitar la falta de agua porque se
respectivamente. Este aparato tiene queman los paquetes 
dentro una camiseta metálica que le    * Colocar los frascos o bandejas con
sirve de protección.  su abertura hacia abajo para facilitar la
 Una vez colocado el material a penetración del vapor 
esterilizar dentro, se le pone una cinta    * No abrir el autoclave hasta el total
testigo de color blanco. Entonces se enfriamiento, porque el vapor se
cierra la               puerta teniendo condensa y humedece los paquetes 
cuidado de que el pin de seguridad este    * Usar, en todos los paquetes, cintas
en su lugar; se cierra la válvula de adhesivas con indicadores químicos. 
escape de vapor y se                    * No usar cargas mayores al 80 % de
programa de la siguiente manera: capacidad. 
 Cuidados: En autoclaves está    * Para la verificación biológica se
PROHIBIDO   esterilizar grasas, usará el Bacillus stearothermophilus. 
aceites, vaselina, talco en paquetes y  
vendajes con                  nitrofurazona Ventajas  del método:
(Furacín) o con vaselina.  Existen a. El  ciclo necesario para la
autoclaves tipo cassette (STATIM) que esterilización es corto
esterilizan en corto tiempo sin            
necesidad de embolsar (135ºC; 3,5 b. Se caracteriza por una buena
min). Estas son las recomendadas para penetración
esterilizar instrumental rotatorio.  c. Da la posibilidad de esterilizar gasas
 Tiempos de esterilización estos varían algodón, campos, gomas y otros
según la temperatura seleccionada.  materiales, así como de esterilizar
 Según la American Dental Association instrumental rotatorio. 
(ADA), las condiciones estándares Desventajas del método:
recomendadas para instrumentos con                  a.  Los instrumentos cortantes pierden
varias envolturas son:  filo
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b. Produce corrosión del 6. Ebullición: se pueden usar 2 tipos de

instrumental.  líquidos: agua y aceite
        0 Agua en ebullición. El agua
3. Radiaciones Ionizantes:  hierve a 100ºC, este sistema ofrece
      * Rayos gamma. Son radiaciones todas las garantías de esterilización
ionizantes que se usan en la industria de siempre y                      cuando se
artículos médicos, odontológicos y                     cumpla
    el tiempo en que el material
farmacéuticos. Se caracterizan por una debe permanecer en ebullición, para
alta energía y gran penetración. Es un lograr la muerte de las bacterias,          
método costoso.  no así las de las esporas que aún siguen
      * Rayos beta. Se usan resistentes. Aquí por supuesto no se
principalmente en la industria. Su poder puede esterilizar gasas, artículos de                
de penetración es menor que el de las papel (conos) etc. Tiempo de ebullición
radiaciones                  gamma  establecido: 20 minutos.
      * Rayos ultravioleta. Son       0 Aceite en ebullición. Para esto se
radiaciones no ionizantes. No tienen utiliza un aceite especial volátil,
efecto esterilizante sobre algunos aprovechando la ventaja de que el aceite
microorganismos.                Son de baja hierve a          una temperatura mayor
energía y escasa penetración. Su acción que la del agua, la que puede llegar a
es superficial y se usan para mantener 300ºC. Desde luego, no hace falta que
una baja tasa de                         hierva, basta                con mantener el
microorganismos en el quirófano y para instrumental a 130ºC Tiempo de
mantener estéril el instrumental una vez ebullición establecido: 20 minutos 
que ha sido ya esterilizado.  
  7. Flameo: Se trata del calor que
4. Ondas Supersónicas: (microondas produce una llama de gas o alcohol; es
odontológico): Este aparato está un procedimiento de emergencia y
formado por un foco emisor de alta consiste en colocar directamente en la
frecuencia que causa vibraciones en las llama el objeto que se desea esterilizar.
moléculas de los microorganismos. Con la llama se consigue una
Dichas vibraciones se transforman, por temperatura muy alta que puede
fricción interna, en calor y de esta forma exceder, en la de gas, los 1000ºC. Esta
se altera y se desactiva todo tipo de temperatura tan elevada deteriora el
estructura viva. El instrumental se instrumento, y para evitarlo, se debe
coloca en un contenedor cubierto por colocar por encima de la llama a fin de
bolitas de vidrio humedecidas con un que no reciba directamente el calor de
líquido (ortobencil paraclorofenato de esta.
sodio). El tiempo de esterilización es de  
90 segundos.  8. Microesferas de vidrio
  (esterilizadora de bolitas): Este tipo de
5. Filtración: Es un proceso que impide esterilización se realiza con un equipo
el paso de microorganismos de un que contiene un recipiente con
ambiente a otro. Se utiliza en la microesferas de vidrio que son
industria farmacéutica, en soluciones calentadas eléctricamente y que pueden
termolábiles que no pueden sufrir la ser sustituidas por sal común o arena. Se
acción del calor. Actualmente este usa para esterilizar instrumental
método se usa en los compresores de pequeño de Endodoncia, conos de papel
aire que utilizan filtros coalescentes que o bolillas de algodón, que se introducen
filtran partículas hasta 0,001 ?m (99,9 en el compartimiento durante 15 a 20
% de pureza). segundos  a temperatura de 250 °C. Su
  uso es cuestionado.
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ESTERILIZACIÓN POR prolija limpieza, ya que la sangre, así

MÉTODOS QUÍMICOS: como
  los detritos adheridos al instrumento
AGENTES QUÍMICOS  demoran y anulan la acción del agente
1. Óxido de etileno químico que se utilice. 
2. Plasma de peróxido de hidrógeno Otros esterilizantes son las soluciones
3. Pastillas de formol químicas que tienen, por si mismas,
4. Soluciones químicas propiedades bactericidas, tales como:
  alcohol, agua oxigenada, fenol, timol,
Esta tipo de esterilización se utiliza para yodo, solución de formol, solución de
algunos instrumentos muy delicados, hipoclorito, permanganato de potasio,
cuyo temple y filo conviene proteger del bicloruro de mercurio, etc., estos son
calor. Los productos químicos que se bactericidas que se usan puros o en
utilizan son bactericidas o solución acuosa o alcohólica.
desinfectantes. Tales productos, en unos
casos destruyen la bacteria, actuando
como desinfectantes y en otros impiden
su desarrollo por lo que se denominan
antisépticos. 
La eficiencia de estos bactericidas está
en razón directa de la concentración del
producto, del tiempo que el instrumento
permanezca dentro de ellos y de su

OBJETIVO GENERAL
 Proporcionar al estudiante conocimientos básicos sobre los principales métodos
empleados en la esterilización, tanto para la eliminación o destrucción completa
de microorganismos contenidos en objetos, productos, etc.

OBJETIVOS ESPECIFICOS
 Impartir conocimientos de cómo prevenir el ingreso de los microorganismos en
un ambiente determinado estéril.
 Conocer y aplicar el procedimiento de esterilización por calor seco y húmedo,
así como las ventajas de los procedimientos.

METODOLOGÌA desinfección de los implementos de

operaciones unitarias y se verificará
Se realizará la lectura de la técnica de detenidamente para que se usa cada uno
esterilización y los diferentes métodos con el fin de reducir el riesgo
para la correcta esterilización y microbiológico del laboratorio.

RESULTADOS

Método  Medio Opciones

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Físicos  Autoclave a vapor saturado

Calor húmedo  Calor
seco Pupinel
Inmersión en glutaraldehído al 2%
Inmersión en peróxido de hidrógeno al 6%
Líquidos  Inmersión en ácido paracético 0,2 al 30 %
Gas de óxido de etileno
Gas de formaldehido
Químicos  Gas  Vapor de peróxido de hidrógeno

Plasma  Plasma de peróxido de hidrógeno

METODOS FISICOS
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1. Calor húmedo.
2. Calor seco.
3. Filtración.
4. Radiación.
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CABINA DE FLUJO

METODOS QUIMICOS
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ALDEHIDOS
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BARRERA DE PROTECCION
PERSONAL

DISCUSIONES
1. Archundia García, Abel (1997). Dado que la esterilidad no se puede
demostrar de manera absoluta, sin causar la destrucción completa de todas
las unidades del lote de producto terminado; se define la esterilidad en
términos probabilísticos, en donde la probabilidad de que una unidad de
producto esté contaminada es aceptablemente remota. Se considera que un
producto crítico es estéril, cuando la probabilidad de que un microorganismo
esté presente en forma activa o latente es igual o menor de 1 en 1.000.000
(coeficiente de seguridad de esterilidad 10^-6).

CONCLUSIONES
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 Una vez suministrada la información y dar a conocer a todos los

integrantes los métodos de esterilización para su bienestar siendo de
aplicación constante durante cada proceso realizado, ya que un área esterilizada
brinda mayor rendimiento, protección, eficiencia y limpieza, teniendo resultados
satisfactorios durante la realización de la práctica.
 Se conoció por qué se elige cada método, para que tipos de fluidos se emplea y
que acción causa en ellos, siendo de gran responsabilidad su uso y basados en
los criterios de spaulding.
 Se logró reconocer, saber y analizar los diferentes aspectos, el cómo actúan los
diferentes métodos de esterilización, la diferencia entre los físicos y químicos y
las contradicciones que estos pudiesen tener en exceso o si no tienen un nivel de
uso adecuado o ña protección adecuada en el momento de su uso.

BIBLIOGRAFÍA

1. Archundia García, Abel (1997). «Capítulo 4: Esterilización y

antisépticos». Educación quirúrgica para el estudiante de ciencias de salud.
México: Méndez-editores. pp. 81-109. ISBN 968-6596-20-8. OCLC 39719626.
«ISBN 9789686596205».
2. Esterilizacion y procedimientos relacionados . (s.f.). Obtenido de
https://www.mheducation.es/bcv/guide/capitulo/8448164180.pdf
3. MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN. (s.f.). Obtenido de
https://docplayer.es/8706508-Metodos-de-esterilizacion.html
4. Sobrados, I. R. (2015). informe. 2 ESTERILIZACION. Obtenido de
https://es.scribd.com/document/257338331/informe-2-ESTERILIZACION
5. EL SERVIER._ Sterilization techniques for biotextiles for medical applications.
Recuperado de sciencedirect.com.