MICROBIOLOGIA APLICADA

Manual de Laboratorio

PRACTICA Nm. 17
COLIFORMES TOTALES Y FECALES EN AGUA DE CONSUMO HUMANO

I. OBJETIVO
Investigar la presencia de bacterias del grupo Coliforme en agua de consumo
humano mediante la tcnica del Nmero Ms Probable (NMP), usando tubos de
fermentacin mltiple.
II. INTRODUCCION
La potabilidad del agua es de gran importancia en cuanto a Salud Pblica, ya que
sta puede servir como vehculo de microorganismos patgenos, es decir,
productores de enfermedades llamadas comnmente "de origen hdrico" tales
como Salmonelosis (Tifoidea y Paratifoidea), Shigelosis, Clera, Hepatitis, etc.
Estos microorganismos son todos de origen entrico.
Se sabe que los microorganismos patgenos que llegan a los depsitos de agua,
proceden de las descargas intestinales de hombres y animales.
Adems, ciertas especies de bacterias, particularmente Escherichia coli, y varios
microorganismos similares, denominados coliformes, Estreptococos fecales (como
Streptococcus faecalis) y Clostridium perfringens, son habitantes normales del
intestino grueso de hombres y animales y en consecuencia siempre estn en las
materias fecales.
As pues, la presencia de cualquiera de estas especies en el agua es evidencia de
contaminacin fecal y el camino est abierto a los patgenos ya que se
encuentran en las materias fecales.
La evaluacin rutinaria del agua en busca de microorganismos patgenos, como
Salmonella spp. y Shigella spp. puede ser difcil de realizar ya que el nmero de
estas bacterias es relativamente escaso, por lo que se tiene que recurrir a pruebas
bacteriolgicas del agua potable que demuestren la presencia de microorganismos
indicadores que siempre estn presentes en materia fecal, fcil de demostrar y
que sirva de gua para conocer el grado de contaminacin fecal.
Surge as el concepto de "Indicador de contaminacin fecal", el cual ser
utilizado para la valoracin de la potabilidad bacteriolgica de las aguas.
De acuerdo con lo anterior, se ha adoptado con carcter general, el "Grupo
Coliforme" como indicador ms digno de confianza.

103

MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio

La OMS incluye dentro del grupo coliforme todos los bacilos aerobios y anaerobios
facultativos Gram negativos, no esporulados, que producen cido y gas al
fermentar la lactosa, a 35 37 C.
Las especies clsicas de este grupo son Escherichia coli y Enterobacter
aerogenes.
El microorganismo indicador ms comnmente utilizado es Escherichia coli,
considerando la OMS preferible emplear la expresin "Coliforme fecal" que
comprende un nmero ligeramente mayor de variedades, todas ellas de claro
origen fecal e indicadores de contaminacin fecal reciente.
Para los efectos del anlisis sanitario del agua, se define el Coliforme fecal como
un bacilo aerobio o anaerobio facultativo, Gram negativo, no esporulado, que
fermenta la lactosa con produccin de cido y gas a 44 C (0.5 C) en menos de
24 horas.
El mtodo se basa en la inoculacin de alcuotas de la muestra sin diluir que
pueden ser volmenes de 50, 10 y 1 mL, de 10, 1 y 0.1 mL, o diluida en caso
necesario, en una serie de tubos por triplicado o quintuplicado con un medio que
contiene lactosa (caldo lactosado o caldo lauril triptosa).
La valoracin del contenido microbiano de una muestra de agua por el mtodo del
NMP supone la utilizacin de tablas numricas que tienen en cuenta los
volmenes de agua y las cantidades de tubos sembrados en una ms series.
Realmente consiste en tratar estadsticamente el nmero de tubos de cada serie
sembrada que resulten positivos despus de su incubacin.
En cuanto a la investigacin de patgenos en agua, no existe un mtodo nico
que permita aislar e identificar todos estos microorganismos.
En general, los mtodos con los que se obtienen mejores resultados comprenden
una fase de concentracin, seguida de tcnicas de enriquecimiento y aislamiento
especficas para cada microorganismo.
El procedimiento para la recoleccin de las muestras de agua para el anlisis
bacteriolgico, depende del tipo de agua que se desee muestrear.
Este se har de acuerdo a la normatividad mexicana vigente.
Las muestras para el anlisis bacteriolgico, se deben tomar en frascos
muestreadores que se hayan lavado con extremo cuidado y esterilizado. En su
interior aadir, previo a la esterilizacin, 0.1 mL de solucin de Na 2S2O3 (tiosulfato

104

MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio

de sodio) al 10%, por cada 120 mL de muestra con el propsito de neutralizar la

accin del cloro que pudiera contener la muestra, cubriendo adems el tapn del
frasco hasta el cuello con papel aluminio.
El anlisis bacteriolgico de la muestra debe practicarse inmediatamente despus
de su recoleccin. Es por ello que se recomienda que de no efectuarse as el
anlisis, se inicie dentro de las dos horas prximas a la recoleccin de la muestra
y en ningn caso, este lapso debe de exceder de 24 horas para agua potable y de
6 horas para otros tipos de agua para que sea vlido el resultado del anlisis.
Durante el perodo que transcurre del muestreo al anlisis, se debe conservar la
muestra a 4 C, con objeto de inhibir la actividad bacteriana para no obtener
resultados falsos o dudosos.
III. MATERIAL Y SUBSTANCIAS
Muestras de agua potable de diferente origen (Grifo, purificada y embotellada,
tinaco, cisterna u otro), de un volumen mnimo de 100 mL.
5 Tubos de 20 x 180 mm con campana Durham en su interior, conteniendo 20
mL de caldo lactosado lauril triptosa estril de doble concentracin.
10 Tubos de 18 x 150 mm campana Durham en su interior, conteniendo 10 mL
de caldo lactosado estril de simple concentracin.
1 Pipeta de 10 mL graduada en dcimas, estril.
2 Pipetas de 1 mL graduadas en dcimas, estriles.
10 Tubos de 18 x 150 mm con campana Durham en su interior, conteniendo 10
mL de caldo Lactosa bilis verde brillante (LBVB) estril de concentracin
sencilla.
10 Tubos de 18 x 150 mm con campana Durham en su interior, conteniendo 10
mL de caldo E.C. (Escherichia coli) estril de concentracin sencilla.
Mechero Bunsen.
Cerillos encendedor.
Asa bacteriolgica.
Gradillas para tubos de 18 x 150 y de 20 x 200.
Agitador de tubos Vortex.
Incubadora a 35 C.
Bao Incubador para C. Fecales a temperatura constante de 44 C (0.5 C).
IV. TECNICAS
Descripcin de la metodologa de anlisis:
La tcnica del NMP comprende siempre una prueba presuntiva y otra confirmativa.

105

MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio

Esto es as porque una positividad en un tubo de la prueba presuntiva no indica

necesariamente la presencia del grupo bacteriano a determinar (Coliformes
Totales, Coliformes Fecales o Estreptococos Fecales), sino tan solo es una
presuncin, que habr de confirmarse posteriormente.
Sin embargo, una negatividad en la prueba presuntiva permite dictaminar la
ausencia de dicho grupo bacteriano en el agua examinada.
La denominada prueba presuntiva consiste en una metodologa de tipo general
para cualquier grupo de bacterias, mientras que la prueba confirmativa es
especfica.

PRUEBA PRESUNTIVA:
Todas las operaciones debern efectuarse en absolutas condiciones de
asepsia.
1. Preparar tres series sucesivas de 5 tubos con caldo lactosado, una de doble
concentracin y las otras dos de concentracin sencilla.
2. Etiquetar las series con 10, 1 y 0.1 mL.
3. Agitar vigorosamente la muestra por lo menos 20 veces antes de tomar el
volumen que se va a inocular, a efecto de homogeneizar.
4. Antes y despus de realizar las inoculaciones, la boca del frasco de la muestra
deber ser flameada con objeto de evitar contaminacin.
5. Inocular con una pipeta de 10 mL este volumen de muestra en la serie de
tubos con caldo de doble concentracin, con otra pipeta de 1 mL para 1 mL de
muestra en la segunda serie de tubos con concentracin sencilla. (Fig. 17.1)
6. Igualmente con la misma pipeta podr inocularse la tercera serie de tubos con
0.1 mL de muestra.
Normalmente, siempre que no se sospecha que el agua contenga elevada
carga bacteriana, solo se inoculan estas tres primeras series de tubos.
En caso contrario, ser necesario inocular otras series y por lo tanto, realizar
diluciones de la muestra original.
7. Incubar todos los tubos a una temperatura de 35 C durante 24-48 horas.

106

MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio

8. Despus de 24 horas de incubacin efectuar una primera lectura para observar

si hay tubos positivos, es decir, con produccin de cido, si el medio contiene
un indicador de pH, turbidez y produccin de gas en la campana Durham.
Al hacer esta verificacin es importante asegurarse que la produccin de gas
sea resultado de la fermentacin de la lactosa en cuyo caso se observar
turbidez en el medio de cultivo y no confundir con burbujas de aire.
Para evitar este tipo de confusiones es recomendable revisar las campanas
Durham antes de proceder a la inoculacin y desechar aquellos que contengan
burbujas de aire de alguna manera eliminar stas y as poder utilizarlos.
9. De los tubos que en esta primera lectura den positivos, ya se pueden hacer las
pruebas confirmatorias para coliformes totales y coliformes fecales.
10. En caso de no apreciarse alguno o todos los cambios mencionados en el resto
de los tubos, continuarn en incubacin 24 horas ms.
11. Despus de 48 horas (2h) a partir de la inoculacin, se hace la lectura final.
12. Si pasadas estas 48 h tampoco se aprecia turbidez ni produccin de gas, los
tubos se toman como negativos.
INTERPRETACION:

Si el total de tubos son NEGATIVOS: El examen se da por terminado,

reportando la AUSENCIA DE COLIFORMES TOTALES Y FECALES en la
muestra analizada.

Todos aquellos tubos que den POSITIVOS para prueba presuntiva se anotarn
convenientemente y se proceder a realizar la PRUEBA CONFIRMATORIA
para Coliformes Totales y Fecales.

PRUEBA CONFIRMATORIA PARA COLIFORMES TOTALES:

1. A partir de cada uno de los tubos que han resultado positivos en la prueba
presuntiva, agitndolos previamente para homogeneizar, inocular con tres
asadas tubos conteniendo caldo Lactosa Bilis Verde Brillante (LBVB). (Fig.
17.2)
2. Incubar durante 48 3 h a 35 0.5 C.
3. Despus de la incubacin observar la presencia de turbidez y de gas.

107

MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio

INTERPRETACION:

Si se observa turbidez y produccin de gas:

La prueba se considera POSITIVA, debiendo anotar el nmero de tubos
positivos para posteriormente hacer el clculo del NMP.

Si en ninguno de los tubos se observa produccin de gas, aun cuando

se observe turbidez:
Se consideran negativos, establecindose el Cdigo 0,0,0 para efecto del
clculo del NMP.

PRUEBA CONFIRMATORIA PARA COLIFORMES FECALES:

1. A partir de cada uno de los tubos que han resultado positivos en la prueba
presuntiva, agitndolos para homogeneizar, inocular con tres asadas tubos
conteniendo caldo E.C. (Escherichia coli). (Fig. 17.3)
2. Incubar durante 24 horas a 44 C (0.5 C), observar presencia de turbidez y
gas. (Fig. 17.4)

INTERPRETACION:

Si se observa turbidez y produccin de gas:

La prueba se considera POSITIVA, debiendo anotar el nmero de tubos
positivos para posteriormente hacer el clculo del NMP.

Si no se observa produccin de gas, aun cuando se observe turbidez:

Se reporta la AUSENCIA DE COLIFORMES FECALES.

CALCULOS.
De acuerdo a los tubos positivos en las pruebas confirmativas para Coliformes
Totales y Fecales:
Establecer los cdigos correspondientes para calcular por referencia en la tabla
estadstica correspondiente (Tablas 17.1 17.4), el NMP de Coliformes Totales y
Fecales en 100 mL de agua.

108

MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio

En caso de no encontrar en las tablas la combinacin de tubos adecuada, emplear

para los clculos la siguiente ecuacin:
NMP/100 mL =

No. De tubos positivos x 100

mL de muestra en tubos negativos mL de muestra en todos los tubos

ELABORACION Y PRESENTACION DE RESULTADOS.

Los resultados se elaboran de la siguiente manera:

Si nicamente se inoculan tres series de cinco tubos cada una con 10, 1 y 0.1
mL de muestra, la lectura de los resultados nos permite tener dos cdigos de
valores uno para coliformes totales y otro para coliformes fecales los cuales
ledos en la tabla del NMP nos dar el valor de bacterias correspondientes en
100 mL de muestra, de manera directa.

Si se han realizado diluciones, se ha de obtener una serie final con valor cero.

A continuacin se establece el triplete de valores correspondiente a las tres

series anteriores a la del valor cero que podr ser leda en la tabla del NMP.

Para efectos de expresar el valor obtenido basndose en 100 mL de muestra

habr de dividirse el resultado de la tabla por el volumen real de muestra
inoculada en cada tubo de la serie central de cada triplete escogido.

Se tendr un triplete de valores para cada tipo de determinacin.

En general se tiene:

NMP/C =

NMP ledo en la tabla

Volumen real de muestra inoculada
en cada tubo de la serie central (mL)

Los resultados obtenidos se expresarn de la siguiente manera:

NMP DE COLIFORMES TOTALES: __________ / 100 mL
NMP DE COLIFORMES FECALES: __________ / 100 mL

109

MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio

EJEMPLOS:
1) La lectura de los resultados obtenidos en el anlisis del agua de un grifo es la
siguiente:
Volumen de
muestra
inoculada.
(mL)

Denominacin de
la serie de 5
tubos.

10
1
0.1

1 CT.CF
2 CT.CF
3 CT.CF

Tubos positivos
en la prueba
presuntiva para
coliformes totales
y fecales.
5
3
2

Tubos positivos
en la prueba
confirmativa para
coliformes totales.

Tubos positivos en
la prueba
confirmativa para
coliformes fecales.

4
2
1

2
1
0

Con estos datos consultando la tabla del NMP correspondiente tenemos:

Para coliformes totales los resultados obtenidos finalmente en la prueba

confirmativa son: 4,2,1 que en la tabla nos indica un valor de 26 es decir el
resultado ser:
NMP DE COLIFORMES TOTALES: 26/100 mL.

Para coliformes fecales el triplete de valores obtenido es: 2,1,0 y consultando

la tabla del NMP se tiene el valor de 7.
El resultado se expresar:
NMP DE COLIFORMES FECALES: 7/100 mL

2) La lectura de los resultados obtenidos en el anlisis de un agua de la que fue

necesario hacer diluciones, es la siguiente:

Volumen de
muestra
inoculada.
(mL)

Denominacin de
la serie de 5
tubos.

0.1
0.01
0.001

3 CT.CF
4 CT.CF
5 CT.CF

Tubos positivos
en la prueba
presuntiva para
coliformes totales
y fecales.
4
2
1

Tubos positivos
en la prueba
confirmativa para
coliformes totales.

Tubos positivos en
la prueba
confirmativa para
coliformes fecales.

3
1
1

2
1
0

Para coliformes totales se establece el cdigo del triplete: 3,1,1 y consultando

la tabla del NMP se observa un valor de 14, por lo tanto se tiene:
14 / 0.01 = 14 x 100 = 1400.
El resultado se expresar:

110

MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio

NMP DE COLIFORMES TOTALES: 1400/100 mL

Para coliformes fecales con el mismo razonamiento se establece el cdigo:

2,1,0 que en las tablas del NMP correspondientes se observa un valor de 7,
por lo tanto se tiene:
7 / 0.01 = 7 x 100 = 700
El resultado se expresar:
NMP DE COLIFORMES FECALES: 700/100 mL

CONFIABILIDAD
El procedimiento de fermentacin en tubos mltiples es el mtodo ms usado por
su facilidad y economa.
El resultado de esta prueba se expresa por el nmero ms probable (NMP), pero
debe entenderse que este mtodo no es exacto ya que slo nos da la probable
densidad de bacterias coliformes totales o fecales de una muestra determinada.
La confiabilidad est dada por los niveles superiores o inferiores del lmite de
confianza al 95% establecidos en las tablas para cada NMP/100 mL, no obstante,
es una indicacin importante para evaluar la calidad sanitaria del agua.
V. CUESTIONARIO
1. Mostrar los clculos realizados para obtener el NMP de Coliformes Totales y
Fecales en el agua analizada.
2. Cules son las caractersticas que debe reunir un Microorganismo Indicador?
3. Por qu el nmero de Coliformes Totales es siempre mayor que el de
Coliformes Fecales?
4. De acuerdo a la normatividad mexicana vigente Cules son los lmites
permisibles en cuanto a Coliformes Totales y Coliformes Fecales en el agua
para consumo humano? Dar los nmeros de las Normas Oficiales Mexicanas
correspondientes.
5. Por qu aun cuando los microorganismos patgenos se encuentran en poca
concentracin en un agua stos pueden causar enfermedad?

111

MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio

TABLA 17.1: Indice del NMP y lmite confiable de 95% para varias
combinaciones de resultados positivos y negativos cuando se usan: 5 tubos
con porciones de 10 cm3 en cada uno, 5 con porciones de 1 cm3 y 5 con
porciones de 0.1 cm3.
No. De tubos con reacciones Indice
positivas.
del
NMP
5 tubos 5 tubos 5 tubos
por
con 10
con 1
con 0.1
100
cm3.
cm3.
cm3.
cm 3.

Lmite confiable de
95%.

No. De tubos con reacciones

positivas.

Inferior

Superior

5 tubos
con 10
cm3.

5 tubos
con 1
cm3.

5 tubos
con 0.1
cm3.

Indice
del
NMP
por
100
cm 3.

< 0.5
< 0.5
< 0.5

7
7
11

4
4
4
4

2
3
3
4

1
0
1
0

5
5
5
5
5
5

0
0
0
1
1
1

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5

0
0
0
0

0
0
1
2

0
1
0
0

<2
2
2
4

1
1
1
1
1

0
0
1
1
2

0
1
0
1
0

2
4
4
6
6

<
<
<
<
<

0.5
0.5
0.5
0.5
0.5

7
11
11
15
15

2
2
2
2
2
2

0
0
1
1
2
3

0
1
0
1
0
0

5
7
7
9
9
12

< 0.5
1
1
2
2
3

13
17
17
21
21
28

3
3
3
3
3
3
3

0
0
1
1
2
2
3

0
1
0
1
0
1
0

8
11
11
14
14
17
17

1
2
2
4
4
5
5

19
25
25
34
34
46
46

4
4
4
4
4
4

0
0
1
1
1
2

0
1
0
1
2
0

13
17
17
21
26
22

3
5
5
7
9
7

31
46
46
63
78
67

Tomado de NOM-AA-42-1987

112

Lmite confiable de
95%.
Inferior

Superior

26
27
33
34

9
9
11
12

78
80
93
93

0
1
2
0
1
2

23
31
43
33
46
63

7
11
15
11
16
21

70
89
110
93
120
150

2
2
2
3
3
3

0
1
2
0
1
2

49
70
94
79
110
140

17
23
28
25
31
37

130
170
220
190
250
340

3
4
4
4
4
4
5
5
5
5
5
5

3
0
1
2
3
4
0
1
2
3
4
5

180
130
170
220
280
350
240
350
540
920
1600
2400

44
35
43
57
90
120
68
120
180
300
640

500
300
490
700
850
1000
750
1000
1400
3200
5800

MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio

TABLA 17.2: Indice del lmite confiable de 95% para varias combinaciones de
resultados positivos y negativos cuando se usan: 1 tubo con porciones de
50 cm3, 5 tubos con porciones de 10 cm3 y 5 tubos con porciones de 10 cm3.
No. de tubos con
Indice del Lmite confiable de
No. de tubos con
Indice del Lmite confiable de
reacciones positivas
NMP por
95%
reacciones positivas.
NMP por
95%
3
3
1 tubo 5 tubos 5 tubos 100 cm
Inferior Superior 1 tubo 5 tubos 5 tubos 100 cm
Inferior Superior
con 50 con 10 con 1
con 50 con 10
con 1
cm3
cm3
cm3
cm3
cm3
cm3

0
0
0
0
0
0

0
0
0
1
1
1

0
1
2
0
1
2

<1
1
2
1
2
3

<
<
<
<
<

0.5
0.5
0.5
0.5
0.5

4
6
4
6
8

1
1
1
1
1

2
2
2
3
3

1
2
3
0
1

7
10
12
8
11

1
3
3
2
3

17
23
28
19
26

0
0
0
0
0
0

2
2
2
3
3
4

0
1
2
0
1
0

2
3
4
3
5
5

<
<
<
<
<
<

0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5

6
8
11
8
13
13

1
1
1
1
1

3
3
3
4
4

2
3
4
0
1

14
18
21
13
17

4
5
6
4
5

34
53
66
31
47

1
1
1
1
1

0
0
0
0
1

0
1
2
3
0

1
3
4
6
3

<
<
<
<
<

0.5
0.5
0.5
0.5
0.5

4
8
11
15
8

1
1
1
1
1

4
4
4
4
5

2
3
4
5
0

22
28
35
43
24

7
9
12
15
8

69
85
100
120
75

1
1
1
1

1
1
1
2

1
2
3
0

5
7
9
5

< 0.5
1
2
< 0.5

13
17
21
13

1
1
1
1
1

5
5
5
5
5

1
2
3
4
5

35
54
92
160
240

12
18
27
39

100
140
220
450

Tomado de NOM-AA-42-1987

113

MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio

TABLA 17.3 Indice del NMP y lmite confiable de 95% para varias combinaciones
de resultados positivos y negativos cuando se usan: 5 tubos con porciones de
50 cm3, 5 tubos con porciones de 10 cm3 y 5 tubos con porciones de 1 cm3.
No. De tubos con reacciones Indice
positivas.
del
NMP
5 tubos 5 tubos 5 tubos
por
con 50 con 10
con 1
100
cm3.
cm3.
cm3.
cm 3.

Lmite confiable de
95%.

No. De tubos con reacciones

positivas.

Inferior

Superior

5 tubos
con 50
cm3.

5 tubos
con 10
cm3.

5 tubos
con 1
cm3.

4
4
4
4
4
4

1
1
2
2
2
3

1
2
0
1
2
0

4
4
4
4
4
4

3
3
4
4
5
5

5
5
5
5
5

0
0
0
0
0
0

0
0
1
1
2
3

0
1
0
1
0
0

<1
1
1
1
1
1

<
<
<
<
<

0.5
0.5
0.5
0.5
0.5

2
2
2
2
2

1
1
1
1
1
1
1

0
0
1
1
2
2
3

0
1
0
1
0
1
0

1
1
1
1
1
2
2

<
<
<
<
<
<
<

0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5

2
2
2
2
2
4
4

2
2
2
2
2
2

0
0
1
1
2
2

0
1
0
1
0
1

1
1
1
2
2
2

<
<
<
<
<
<

0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5

2
2
2
4
4
4

2
2
2

3
3
4

0
1
0

2
3
3

< 0.5
1
1

4
7
7

3
3
3
3
3
3

0
0
1
1
1
2

0
1
0
1
2
0

2
2
2
2
3
3

<
<
<
<

0.5
0.5
0.5
0.5
1
1

4
4
4
4
7
7

3
3
3
3
3
3

2
2
3
3
4
4

1
2
0
1
0
1

3
4
3
4
4
4

1
1
1
1
1
1

7
9
7
9
9
9

4
4
4
4

0
0
0
1

0
1
2
0

2
3
3
3

< 0.5
1
1
1

4
7
7
7

Tomado de NOM-AA-42-1987

114

Indice
del
NMP
por
100
cm 3.

Lmite confiable de
95%.
Inferior

Superior

4
4
4
4
5
5

1
1
1
1
2
2

9
9
9
9
12
12

1
2
0
1
0
1

5
6
6
7
7
8

2
2
2
3
3
3

12
14
14
17
17
19

0
0
0
1
1

0
1
2
0
1

4
4
6
5
6

1
1
2
2
2

9
9
14
12
14

5
5
5
5
5

1
2
2
2
2

2
0
1
2
3

7
6
8
10
12

3
2
3
4
4

17
14
19
23
28

5
5
5
5
5

3
3
3
3
4

0
1
2
3
0

9
11
14
18
13

3
4
5
6
6

21
26
34
53
31

5
5
5
5
5

4
4
4
4
5

1
2
3
4
0

17
22
28
35
24

6
7
9
11
8

47
70
85
100
75

5
5
5
5
5

5
5
5
5
5

1
2
3
4
5

35
54
92
160
240

11
18
27
39

100
140
220
420

MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio

TABLA 17.4: Indice del NMP y lmite confiable de 95% para varias
combinaciones de resultados positivos y negativos cuando se usan: 3 tubos
con porciones de 10 cm3, 3 con porciones de 1 cm3 y 3 con porciones de 0.1
cm3.
No. de tubos con reacciones positivas.

3 tubos
con 10
3
cm
0
0
0

3 tubos
3
con 1 cm
0
0
1

3 tubos
con 0.1
3
cm
0
1
0

1
1
1
1
1

0
0
1
1
2

2
2
2
2
2
2

Indice del NMP

3
Por 100 cm

Lmite confiable de 95%

Inferior

Superior

<3
3
3

< 0.5
< 0.5

9
13

0
1
0
1
0

4
7
7
11
11

< 0.5
1
1
3
3

20
21
23
36
36

0
0
1
1
2
2

0
1
0
1
0
1

9
14
15
20
21
28

1
3
3
7
4
10

36
37
44
89
47
150

3
3
3
3
3
3

0
0
0
1
1
1

0
1
2
0
1
2

23
39
64
43
75
120

4
7
15
7
14
30

120
130
380
210
230
380

3
3
3
3
3
3
3

2
2
2
3
3
3
3

0
1
2
0
1
2
3

93
150
210
240
460
1100
2400

15
30
35
36
71
150

380
440
470
1300
2400
4800

Tomado de NOM-AA-42-1987

115

MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio

116

MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio

117

MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio

118

MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio

119