 OBJETIVOS:

 Diferenciar los organismos coliformes totales de los microorganismos coliformes fecales.

 Evaluar la calidad sanitaria de muestras de agua de consumo y reciduales mediante la
búsqueda de microorganismos coliformes totals y coliformes fecales.
 Conocer la tecnica del numero mas probable (NMP), usando tubos de fermentacion
multiple.
 INTRODUCCION:
El agua es un elemento vital para la existencia humana, de su uso adecuado depende nuestra
salud, alimentación y producción agrícola . El utilizar agua contaminada en la preparación de
alimentos u otras actividades nos podría producir un gran número de casos de infección.
A nivel mundial alrededor de 1,8 millones de personas mueren cada año debido a
enfermedades diarreicas (incluido el cólera); un 90% de esas personas son niños menores de
cinco años, principalmente procedentes de países en desarrollo. Además se ha estimado que
el 88% de las enfermedades diarreicas son producto de un abastecimiento de agua insalubre,
de un saneamiento y una higiene deficientes .
COLIFORMES.
La principal diferencia entre los coliformes totales y fecales es la capacidad de estos últimos de
crecer a mayor temperatura en condiciones de laboratorio.
Desde el punto de vista salud, este grupo es más importante que los coliformes totales, dado que
se relaciona más con la probabilidad de encontrar patógenos excretados (bacterias, parásitos y
virus entéricos).
 METODOS:
 Tecnica del Numero Más Probable (NMP)
La determinación de microorganismos coliformes totales por el método del Número más
Probable (NMP), se fundamenta en la capacidad de este grupo microbiano de fermentar la
lactosa con producción de ácido y gas al incubarlos a 35°C ± 1 °C durante 48 h., utilizando un
medio de cultivo que contenga sales biliares. Esta determinación consta de dos fases, la fase
presuntiva y la fase confirmativa.
 Técnica de Tubos Multiples.
 Diluciones seriadas.
Los análisis microbiológicos del agua, ya sea para la prueba de tubos múltiples o de filtro de
membrana requieren del empleo de cantidades variables de muestra, ésto se logra mediante el
proceso de diluciones decimales seriadas, las cuales se deben utilizar cuando se siembren
volúmenes de muestra menores de lmL- El diluente se debe preparar en tubos con tapa de
rosca añadiendo 9 mL de éste para la preparación de diluciones 1:10 (IO**1) o en botellas con
tapón esmerilado con capacidad para 99 mL para la preparación de diluciones 1:100 (10~2).
Es recomendable destinar tubos y botellas exclusivamente para dilución de muestras, conviene
calibrar los tubos y las botellas de dilución a 9 y 99 mi respectivamente, marcando el nivel con
un lápiz de diamante. Este procedimiento permite al técnico descartar tubos o botellas que
contengan volúmenes diferentes a los requeridos para realizar adecuadamente las diluciones
decimales seriadas.
 Aguas residuales 
Cuando se trata de agua no potable, se inoculan los tubos con cantidades decimales
del agua. La selección de éstas va a depender de la densidad probable de coliformes y
la experiencia del analista.
Esta técnica puede también ser usada para sedimentos, haciendo una dilución de 10" .
Se pesan 50 gr de muestra (sólida o semisólida) y se adicionan 450 mi de agua de
dilución y se agita por 1 ó 2 minutos.
Los resultados del análisis de los tubos de réplica y diluciones son reportados en
términos de el Número Más Probable (NMP).
El valor numérico de la estimación del contenido bacteriano es determinado por la
dilución que mostró ambos resultados positivos y negativos.
FIN