Chaperones moleculares en el plegamiento de protenas y

proteostasis

La mayora de las protenas deben plegarse en estructuras

tridimensionales definidos para tener actividad funcional. Pero en
el entorno celular, las protenas recin sintetizadas estn en gran
riesgo de plegamiento aberrante y agregacin, formacin de
especies potencialmente txicas. Para evitar estos peligros, las
clulas de invertir en una red compleja de las chaperonas
moleculares, que utilizan mecanismos ingeniosos para evitar la
agregacin

promover

plegamiento

eficiente.

Debido

las

molculas de protena son muy dinmicas, se requiere vigilancia

constante acompaante para asegurar la homeostasis de protenas
(proteostasis). Los avances recientes sugieren que una disminucin
relacionada con la edad en la capacidad de proteostasis permite la
manifestacin

de

diversas

enfermedades

de

agregacin

de

protenas, incluyendo la enfermedad de Alzheimer y enfermedad de

Parkinson. Las intervenciones en estos y otros numerosos estados
patolgicos pueden surgir de una comprensin detallada de las vas
que subyacen mantenimiento proteoma.
Las protenas son las macromolculas biolgicas ms verstiles y
estructuralmente compleja. Estn involucrados en casi todos los
procesos biolgicos. Las clulas de mamfero expresan tpicamente en
exceso de 10.000 especies diferentes de protenas, que son sintetizadas
en los ribosomas como cadenas lineales de hasta varios miles de

aminocidos.

Para

funcionar,

estas

cadenas

deben

plegarse

generalmente en su "estado natural", un conjunto de unos pocos

estrechamente relacionada con las estructuras tridimensionales. Cmo
se logra esto y cmo las clulas garantizar la integridad conformacional
de su proteoma en vista de los desafos agudas y crnicas constituyen
uno de los problemas ms fundamentales y clnicamente significativo en
la biologa.
Central de este problema es que las protenas deben conservar la
flexibilidad conformacional para funcionar, por lo que son slo
marginalmente termodinmicamente estables en su entorno fisiolgico.
Una fraccin sustancial de todas las protenas en clulas eucariotas
(20-30 % del total en clulas de mamfero) incluso parece ser
inherentemente

carente

de

cualquier

estructura

tridimensional

ordenada y adoptar conformaciones plegadas slo despus de la

interaccin con parejas de unin. El comportamiento aberrante de
algunas de estas protenas metaestables, tales como tau y sinuclena, puede dar lugar a la formacin de agregados fibrilares que
estn asociados con la demencia y la enfermedad de Parkinson. Por lo
tanto, el control de calidad de la protena y el mantenimiento de la
homeostasis del proteoma (conocido como proteostasis) son cruciales
para la salud celular y del organismo. Proteostasis se consigue mediante
una red integrada de varios cientos de protenas, incluyendo, lo ms
prominente, chaperones moleculares y sus reguladores, que ayudan en
la de novo de plegado o replegado, y el sistema de la ubiquitina proteasoma (UPS) y el sistema de la autofagia, que median la
eliminacin oportuna irreversible de las protenas mal plegadas y

agregadas. Las deficiencias en proteostasis se han mostrado para

facilitar la manifestacin o la progresin de numerosas enfermedades,
tales como la neurodegeneracin y la demencia, la diabetes de tipo 2, la
amiloidosis perifrica, enfermedad de almacenamiento lisosomal, la
fibrosis qustica, el cncer y la enfermedad cardiovascular. Un factor de
riesgo importante para muchas de estas enfermedades es la edad
avanzada. De hecho, los estudios en organismos modelo indican que el
envejecimiento est ligada a una disminucin gradual en la capacidad
celular proteostasis.
Aqu se discuten los ltimos conocimientos en los mecanismos de
chaperona asistida por el plegamiento de protenas y el mantenimiento
proteoma. Nos centramos en cmo las protenas utilizan la maquinaria
acompaante para navegar con xito el complejo panorama de plegado energa en el ambiente celular lleno de gente. La comprensin de estas
reacciones ser guiar futuros esfuerzos para definir la red proteostasis
como un objetivo para la intervencin farmacolgica en enfermedades
de plegamiento de la protena aberrante.
Papel fundamental de las chaperonas moleculares
Muchas protenas pequeas replegamiento despus de su eliminacin
del desnaturalizante in vitro, en ausencia de otros componentes o una
fuente de energa. Esto significa que la secuencia de amino-cido,
codificada en el ADN, contiene toda la informacin necesaria para
especificar la estructura tridimensional de una protena 1. Sin embargo,
la investigacin en el ltimo par de dcadas se ha establecido
firmemente que en el entorno celular, muchas protenas necesitan
chaperones moleculares que se pliegan de manera eficiente y en un

plazo de tiempo biolgicamente relevante. Por qu es necesario este

nivel adicional de complejidad?
Aunque las pequeas protenas pueden plegarse a velocidades muy
rpidas (de microsegundos), en soluciones tampn diluidas,, protenas
multidominio ms grandes pueden tardar minutos en horas a plegarse,
e incluso a menudo no llegan a sus estados nativos in vitro. El plegado
de tales protenas se hace considerablemente ms difcil in vivo, debido
a que el entorno celular es muy lleno, con protenas citoslicas que
alcanzan concentraciones totales de 300-400 gl-1. Los efectos de
volumen excluidos resultantes, a pesar de la mejora de las interacciones
funcionales entre macromolculas, tambin aumentan fuertemente la
tendencia de las protenas no nativas y estructuralmente flexible para
aadir. Parece probable, por lo tanto, que el requisito fundamental para
los chaperones moleculares surgi muy temprano en la evolucin de las
clulas densamente aglomeradas, debido a la necesidad de minimizar la
agregacin de protenas durante el plegado y mantener las protenas en
estados solubles, sin embargo, conformacionalmente dinmicos. Por
otra parte, como a menudo mutaciones alteran la capacidad de una
protena para adoptar un pliegue, se deduce que el sistema chaperona
proporciona un tampn fundamental, lo que permite la evolucin de
nuevas funciones de las protenas y los rasgos fenotpicos.

Algunos conceptos bsicos sobre el plegamiento de las protenas y

cmo se puede ir mal
Debido a que el nmero de posibles conformaciones de una cadena de
protena puede adoptar es muy grande, reacciones plegables son muy

complejas y heterogneas, basndose en la cooperacin de muchos

dbiles, las interacciones no covalentes. En el caso de las protenas
solubles, fuerzas hidrofbicas son particularmente importantes en la
conduccin de colapso de la cadena y el enterramiento de residuos de
aminocidos no polares en el interior de la protena (vase la ref. 13
para una discusin de la membrana de plegamiento de protenas). Se ha
logrado un progreso considerable en los ltimos aos en la comprensin
de estas reacciones a travs de experimentos biofsicos y anlisis terico
de 1,2. En el modelo actual, se cree que las cadenas polipeptdicas para
explorar superficies de energa potencial en forma de embudo a medida
que avanzan, a lo largo de varias rutas cuestan abajo, hacia la
estructura nativa (fig. 1). Colapso de la cadena y el incremento
progresivo

en

el

nmero

de

interacciones

nativas

restringen

rpidamente el espacio conformacional que necesita ser buscado en

ruta hacia el estado nativo. Sin embargo, la superficie de energa libre
que debe ser navegado es a menudo resistente, lo que significa que las
molculas deben cruzar las barreras cinticas sustanciales durante el
plegado. Como consecuencia de ello, los estados parcialmente plegados
pueden ser transitoriamente poblados como especies cinticamente
atrapados. Tales intermedios de plegamiento son la regla para las
protenas de ms de 100 aminocidos ( 90 % de todas las protenas en
una clula), que tienen una fuerte tendencia a sufrir colapso hidrofbico
rpida en conformaciones globulares compactas 2. El colapso podra
traducirse bien en glbulos desorganizados que carecen de contactos
especficos y retener gran entropa configuracional o intermedios que
pueden ser estabilizados por interacciones no nativas (estados mal

plegados). En el primer caso, la bsqueda de contactos nativos

cruciales dentro del glbulo se limitar la velocidad de plegado,
mientras que en este ltimo, la rotura de los contactos no nativos puede
ser limitante de la velocidad 1 (fig. 1). La propensin de las protenas
para rellenar los intermedios globulares con un alto grado de
flexibilidad puede aumentar ms grandes, con pliegues de dominio
topolgicamente ms complejas que estn estabilizadas por muchas
interacciones de largo alcance (por ejemplo, / arquitecturas de
dominio). Dichas protenas son a menudo altamente dependiente
acompaante.
Estados parcialmente plegados o mal plegadas son problemticos
debido a que tienden a agregarse en una manera dependiente de la
concentracin (Fig. 1). Esto es debido al hecho de que estas formas
tpicamente exponen residuos y regiones del esqueleto del polipptido
no

estructurada

de

aminocidos

hidrfobos

al

disolvente

caractersticas que se entierran en el estado nativo. Como plegable

intermolecular, la agregacin es impulsado en gran medida por fuerzas
hidrofbicas y principalmente los resultados en estructuras amorfas
(Fig. 1). Alternativamente, los agregados fibrilares llamados amiloide
pueden formar, definida por - filamentos que corren perpendiculares
al eje largo de fibrillas (estructura en cruz ). Aunque muchas protenas
pueden

adoptar

estas

estructuras

altamente

ordenadas,

termodinmicamente estables bajo condiciones en vitro, la formacin de

estos agregados en vivo est fuertemente limitado por la maquinaria
chaperona, lo que sugiere que pueden llegar a ser ms generalizada bajo
estrs o cuando el control de calidad de la protena no. Es importante

destacar que la formacin de agregados fibrilares suele ir acompaada

de la formacin de estados oligomricos solubles, que se cree que tienen
un papel clave en las enfermedades de plegamiento aberrante (Fig. 1).
La toxicidad de estas formas menos ordenadas y bastante heterognea
se ha sugerido que se correlaciona con la exposicin de superficies
hidrfobas, pegajosas y accesible estructura de pptido - columna
vertebral que an no est integrado en un ncleo transversal estable.
Los

oligmeros

reordenamiento

solubles
a

las

deben

fibrillas

someterse
de

formulario,

una
el

considerable
estado

final

termodinmico del proceso de agregacin, y por lo tanto pueden ser

comparables

los

intermedios

cinticamente

atrapados

en

el

plegamiento (Fig. 1). Cabe destacar que algunos eptopos estructurales

comunes se han detectado en los oligmeros prefibrillar de diferentes
polipptidos, pero, cmo estas caractersticas estn relacionadas con la
toxicidad an no se entiende. Esta informacin es una necesidad
urgente de desarrollar tratamientos para los numerosos estados
patolgicos asociados con la agregacin de protenas.
Las principales clases de chaperonas
Se define un chapern molecular como cualquier protena que
interacta o estabiliza o ayuda a otra protena para adquirir su
conformacin

funcionalmente

activa,

sin

estar

presente

en

su

estructura final. Existen varias clases diferentes de chaperones

estructuralmente no relacionados en las clulas, formando caminos y
redes de cooperacin. Los miembros de estas familias de protenas son
a menudo conocidos como protenas de estrs o protenas de choque
trmico (HSP), ya que son regulados hasta en condiciones de estrs en

el

que

las

concentraciones

de

agregacin

propensos

aumento

intermedios plegables. Los chaperones se clasifican generalmente de

acuerdo a su peso molecular (HSP40, HSP60, HSP70, HSP90, Hsp100 y
los pequeos HSP). Estn involucrados en una multitud de funciones
proteoma

- mantenimiento,

replegamiento

de

las

incluyendo de

protenas

de

estrs

novo

de

plegado,

desnaturalizados,

el
de

ensamblaje oligomrico, el trfico de protenas y la asistencia en la

degradacin proteoltica. Los acompaantes que participan en trminos
generales en el plegamiento de protenas de novo y replegamiento, tales
como los Hsp70s, HSP90s y la chaperoninas (HSP60s), son mquinas
moleculares de mltiples componentes que promueven plegable travs
de la ATP - y el cofactor - regulado ciclos de liberacin y de unin. Por lo
general

reconocen

cadenas

laterales

de

aminocidos

hidrfobos

expuestos por protenas no nativas y pueden cooperar funcionalmente

con chaperonas ATP - independientes, tales como las pequeas HSP,
que funcionan como 'holdases', agregacin de almacenamiento en bfer.
En el mecanismo dependiente de ATP de accin chaperona, de novo de
plegado

replegado

de

protenas

se

promueve

travs

de

particionamiento cintica (Fig. 2). Unin (o reconsolidacin) a las

regiones hidrfobas de una protena no nativa transitoriamente bloques
de agregacin Chaperona; ATP - liberacin desencadenada permite el
plegado de proceder. Es importante destacar que, a pesar de los Hsp70s
y las chaperoninas tanto operan por este mecanismo bsico, que se
diferencian fundamentalmente en que la primera liberacin (como todos
los otros chaperonas dependientes de ATP) la protena sustrato para el
plegado en solucin a granel, mientras que las chaperoninas cilndricas

permiten el plegado de un solo molculas de protenas en el interior de

una jaula. Los dos sistemas actan secuencialmente, mediante el cual
HSP70 interacta aguas arriba con polipptidos nacientes y recin
sintetizada y la funcin chaperoninas aguas abajo en el final de plegado
de las protenas que no llegan a estado nativo por el ciclismo en solo
HSP70 20,21 (figuras 2 y 3). En las siguientes secciones, se utilizar la
HSP70, HSP90 chaperonina y modelos para ilustrar los mecanismos
bsicos de las principales mquinas de plegamiento de protenas
citoslicas. Chaperonas especfica del cliente que funcionan aguas abajo
de plegado en la mediacin del ensamblaje de complejos oligomricos no
se discuten (vase, por ejemplo, refs 22 y 23).
El sistema de HSP70
El expresan constitutivamente (HSC70, tambin conocido como
HSPA8) y formas inducibles por estrs de HSP70 son actores centrales
en el plegamiento de protenas y el control proteostasis. El aumento de
los niveles de HSP70 tambin ha demostrado ser eficaz en la prevencin
de la agregacin de protenas txicas en modelos de enfermedad. El
ciclo de reaccin dependiente de ATP de HSP70 se regula por
chaperonas de la HSP40 (tambin conocido como DnaJ) de la familia y
los factores de cambio de nucletidos. Algunos de estos factores
tambin estn involucrados en la vinculacin de las funciones de
acompaante con el SAI y la autofagia para la eliminacin de las
protenas mal plegadas. Encuadernacin y la liberacin por la HSP70 se
logra a travs del acoplamiento alostrico de un dominio de pase AT
amino - terminal conservado con un dominio de unin al pptido
carboxi-terminal, este ltimo consiste en un subdominio - sndwich y

un segmento de tapa - helicoidal (Fig. 2). El - reconoce segmentos

largos, siete

residuos enriquecidos en

aminocidos

hidrofbicos,

preferentemente cuando estn enmarcadas por residuos de carga

positiva. Tales segmentos se producen en promedio cada 50-100
aminocidos en las protenas, y la exposicin de estos fragmentos se
correlaciona con la propensin de agregacin de la protena. La tapa helicoidal y un cambio conformacional en el dominio - sndwich
regulan el estado afinidad por el pptido de una manera dependiente de
ATP. En el estado de ATP de ruedas, la tapa adopta una conformacin
abierta, lo que resulta en lo alto de las tasas y tarifas de descuento para
el pptido. La hidrlisis de ATP a ADP est fuertemente acelerada por
HSP40, que conduce a cierre de la tapa y de unin del pptido estable
(baja en los precios y tarifas de descanso para el sustrato peptdico) (fig.
2). HSP40 tambin interacta directamente con desplegada polipptidos
y puede reclutar a los sustratos de protena HSP70. Despus de la
hidrlisis de ATP, un factor de intercambio de nucletidos - se une al
dominio pase AT de la HSP70 y cataliza el intercambio de ADP - ATP, lo
que resulta en la apertura de la tapa y la liberacin de sustrato.
Lanzamiento permite que las molculas de rpido plegado para enterrar
residuos hidrofbicos, mientras que las molculas que necesitan ms
que unos pocos segundos para el plegado se vuelva a enlazar a la
HSP70, evitando as la agregacin. Unin HSP70 tambin pueden
resultar en la remodelacin conformacional, tal vez la eliminacin de las
barreras cinticas para el proceso de plegado.
Las protenas que son incapaces de particin de trayectorias de rpido
plegado despus de ciclismo HSP70 pueden ser transferidas en el medio

especializado de la jaula chaperonina para el plegado. Entre ellas se

encuentran varias protenas esenciales, tales como actinas tubulinas,
que se enfrentan a altas barreras energticas en el plegamiento y son
completamente

incapaces

de

llegar

sus

estados

nativos

espontneamente, incluso en solucin diluida in vitro.

Las chaperoninas
Chaperoninas son grandes complejos doble timbre de 800-900 kDa
que funcionan por todo el mundo encierra protenas sustrato hasta 60
kDa para el plegado. Grupo I chaperoninas (tambin conocido como
HSP60s en eucariotas y GroEL en bacterias) tienen anillos de siete
miembros en bacterias, mitocondrias y cloroplastos, y funcionalmente
cooperar con HSP10 (protenas GroES en bacterias), que forman la tapa
de la jaula plegable. El grupo de chaperoninas II en arqueas
(thermosome) y el citosol eucaritico (TRiC, tambin conocido como
AAC)

por

lo

general

tienen

anillos

de

ocho

miembros.

Son

independientes de HSP10 factores.

El sistema GroEL-GroES chaperonina de Escherichia coli ha sido
estudiado ms extensivamente (fig. 3). GroEL interacta con al menos
250 diferentes protenas citoslicas. La mayora de ellos tienen entre 20
y 50 kDa en tamao y tienen complejo / o + topologas de
dominio, como el barril TIM 33 veces. Estas protenas se estabilizan por
muchas interacciones de largo alcance y se cree que rellenar flexibles,
plegables intermedios cinticamente atrapados exponiendo superficies
hidrfobas. Los dominios apicales de las presentes residuos de
aminocidos hidrfobos GroEL para la unin en el centro del anillo
sustrato. Plegado subsiguiente depende de encapsulacin global de

sustrato por GroES (fig. 3). GroES de unin de ATP es regulado y se

asocia con un cambio conformacional marcada de GroEL que conduce a
la formacin de una jaula con una pared altamente hidrfilo, neta cargado negativamente interior. Protena encapsulada es libre de doblar
en este ambiente durante 10 segundos - el tiempo necesario para la
hidrlisis de ATP en el anillo de GroES - enlazado (anillo cis). Sustrato
protena sale de la jaula despus de GroES disociacin, que se
desencadena por alostricamente ATP vinculante en el ring frente (anillo
trans). Sustrato an no doblado vuelve a enlazar rpidamente a GroEL
para nuevos intentos de plegado.
Encerrando desplegada protena, una molcula a la vez, evita la
interrupcin de plegado por la agregacin o (re) unin a chaperonas
aguas

arriba.

Adems,

un

efecto

de

confinamiento

estrico

probablemente modula el paisaje plegado - energa. Aunque las

funciones de chaperonina como un dispositivo de prevencin pasiva agregacin para algunas protenas, encapsulacin tambin pueden
acelerar plegado sustancialmente. Esta aceleracin de la frecuencia
puede

ser

debido

al

confinamiento

estrico,

entrpicamente

desestabilizar derrumb intermediarios de plegamiento pero flexibles, y

promoviendo su conversin a ms compactos conformaciones, nativo.
Como se muestra recientemente, el efecto de la jaula plegable puede ser
comparable a la funcin de los enlaces disulfuro en la restriccin de
espacio conformacional en el plegamiento de las protenas secretoras.
Adems, repite curso de los acontecimientos en la unin y los ciclos
sucesivos de liberacin se han sugerido para revertir mal plegadas,
estados cinticamente atrapados que se estabilizan por interacciones no

nativas. Por lo tanto, las chaperoninas puede ser capaz de suprimir las
barreras entrpicas y entlpico en escarpadas paisajes de energa libre
de plegado (Fig. 1).
TRiC, el II chaperonina grupo en el citosol eucaritico, consta de ocho
subunidades paralogous por anillo. Todos II chaperoninas grupo se
desvan

de

GroEL

en

que

sus

dominios

apicales

contienen

protuberancias en forma de dedo, que actan como un iris -como,

integrado en la tapa y reemplazar la funcin de GroES. Estos segmentos
se abren y cierran en un ciclo de protena - encapsulacin dependiente
de ATP, similar en principio a la de GroEL - GroES44. Sin embargo, el
ciclo de reaccin TRiC es mucho ms lento que el de GroEL,
probablemente proporcionar un perodo de encapsulacin de protenas
y el plegamiento en la jaula sustancialmente ms largo. TRiC interacta
con aproximadamente el 10 % de las protenas citoslicas recin
sintetizados, incluyendo la actina y la tubulinas. Curiosamente, TRIC
tambin funciona en la prevencin de la acumulacin de agregados
txicos de protena de la enfermedad de Huntington.
El sistema de HSP90
HSP90

formas

de

un

concentrador

proteostasis

que

controla

numerosos importantes vas de sealizacin en las clulas eucariotas.

Estas funciones pleiotrpicos incluyen, entre otros la progresin del
ciclo

celular, mantenimiento

de los

telmeros, la

apoptosis,

la

transduccin de seales mittico, el transporte de vesculas mediada, la

inmunidad innata y la degradacin de protenas especficas. De hecho,
se cree que la evolucin y el mantenimiento de estas redes funcionales a
depender de la capacidad de HSP90 para amortiguar los efectos de las

mutaciones estructuralmente desestabilizadores en los complejos de

protenas subyacentes, permitiendo de ese modo la adquisicin de
nuevos rasgos.
HSP90 funciones aguas abajo de HSP70 en la maduracin estructural
y

la

regulacin

conformacional

de

numerosas

molculas

de

transduccin de seales, tales como quinasas y los receptores de

esteroides. Adems, coopera en este proceso con varios reguladores y
compaeros de acompaantes, muchos de los cuales utilizan la
repeticin tetratricopeptide (TPR) dominios de atracar en HSP90. Por
ejemplo, el HOP protena TPR proporciona un vnculo directo entre la
HSP70 y HSP90, permitiendo transfer el sustrato. Aunque el mecanismo
por el cual la HSP90 y sus cofactores mediar cambios conformacionales
en protenas sustrato an no se entiende, las estructuras cristalinas de
los ltimos HSP90s de larga duracin proporcionan informacin
largamente esperada. HSP90 funciona como un dmero de subunidades
que se ensamblan por sus dominios C-terminales. Un dominio Nterminal se une e hidroliza ATP y se une al dominio C -terminal
mediante un dominio medio (Fig. 4). El dominio medio participa en la
unin al sustrato e interacta con el AHA1 co - chaperona. Similar a
otros chaperones, la HSP90 dmero se somete a un ciclo de reaccin
ATP

accionado

que

est

acompaada

por

una

considerable

reorganizacin estructural (fig. 4). La unin del ATP conduce a la

dimerizacin de los dominios N-terminales, formando abrazadera
molecular HSP90. Esto resulta en una compactacin del dmero
HSP90, en el que los monmeros individuales se entrelazan una con
otra. Despus de la hidrlisis, los dominios pase AT se disocian y las

HSP90 monmeros diferentes N- terminales. Varios cofactores regulan

este ciclo: Cdc37, que ofrece ciertos sustratos de quinasa para HSP90,
inhibe la actividad de pase AT, y HOP inhibe la dimerizacin N-terminal.
AHA1 estimula la hidrlisis de ATP, mientras que p23 se estabiliza la
forma dimerizada de HSP90 antes de la hidrlisis de ATP. Estos factores
se cree que ajustar las propiedades cinticas del ciclo para lograr ciertas
transiciones conformacionales en sustratos de HSP90 - enlazados, as
como su liberacin a partir de la HSP90.
Cmo HSP90 recluta diferentes tipos de protenas sustrato con la
ayuda de diversos co- chaperonas sigue siendo enigmtica. HSP90
parece tener varias regiones de interaccin sustrato y la fuerza de unin
parece estar fuertemente influenciada por la flexibilidad estructural del
sustrato, en lnea con la funcin propuesta de la HSP90 como un
condensador evolutiva en la proteccin de variantes de protenas
mutadas de la degradacin. Debido a varios sustratos de HSP90 son
quinasas con papeles bien documentados en el desarrollo del tumor, la
inhibicin de HSP90 con frmacos tales como geldanamicina ha surgido
como una estrategia prometedora para el tratamiento de ciertos tipos de
cncer. Estos frmacos inhiben especficamente la funcin de pase AT
de la HSP90. Probablemente sern tiles no slo en la terapia del
cncer, sino tambin en el tratamiento de enfermedades virales, debido
a el hecho de que varios virus patgenos secuestrar el sistema de
HSP90 y lo utilizan para ensamblaje de la cpsida. Sin embargo, la
inhibicin global de la HSP90 es probable que resulte en una alteracin
marcada de circuitos celulares, y sera deseable encontrar maneras de
inhibir slo aspectos especficos de la funcin de HSP90.

De ribosoma a la protena plegada

La sntesis vectorial de polipptidos en el ribosoma tiene importantes
implicaciones en el proceso de plegado que se entienden slo en parte.
Las preguntas claves se refieren a la fase en la que la cadena naciente
comienza a plegarse y la medida en que el proceso de traduccin
modula el paisaje de energa libre de plegado. Al abordar estas
cuestiones, es til considerar primero, las protenas de un solo dominio
pequeos, que tienden a plegarse de forma espontnea in vitro. El
proceso de traduccin para tales protenas parece aumentar el riesgo de
mal plegamiento y la agregacin considerablemente, debido a que un
polipptido naciente incompleta no es capaz de plegarse en una
conformacin nativa estable y la concentracin local de las cadenas
nacientes en el contexto de poli ribosomas es muy alta. Adems, el
canal de salida de la subunidad ribosmica grande, que es de 100 de
largo, pero en la mayora de 20 de ancho, es desfavorable para doblar
ms all de -hlices y pequeos elementos terciarios que pueden
comenzar a formar cerca de la salida del tnel; se por lo tanto evita que
las C-terminal de residuos de aminocidos de la cadena de participar en
interacciones de largo alcance que son necesarios para cooperativa
dominio plegado. Como consecuencia, puede ocurrir slo despus de
plegamiento productivo de la protena completa ha surgido del
ribosoma. Debido a que la traduccin es relativamente lento ( 4-20
aminocidos s - 1), cadenas nacientes estn expuestos en estados
parcialmente plegados, sensibles a la agregacin durante perodos de
tiempo considerables. Por otra parte, los contactos intracatenarios no
nativos formados durante la traduccin o interacciones con la superficie

ribosmico altamente cargado podran retrasar plegado despus de la

finalizacin de la sntesis. Por estas razones, se cree que las cadenas
nacientes de interactuar co - traduccional con chaperones ribosomas
determinada, que inhiben su plegamiento prematuro (mal) y mantener
la cadena naciente en un estado no agregado, plegable competente (Fig.
5). Por ejemplo, el factor de activacin bacteriana se une a la pequea
titina I 27 cadena ( 120 aminocidos) a lo largo de traduccin,
presumiblemente retrasar colapso de la cadena hasta que el dominio sndwich completo ha surgido del ribosoma y est disponible para
plegado. Por otra parte, la agregacin de cadenas nacientes se
desfavorecido por el densamente poblado, pseudohelical disposicin de
los ribosomas en los complejos polyribosome - una organizacin que
maximiza la distancia entre los sitios de salida de la cadena naciente en
ribosomes65 adyacente.
Aunque las protenas de un solo dominio alcanzarn su estado nativo
despus de la traduccin, las protenas multidominio pueden someterse
a

dominio

sabia

plegable

co

-traduccional,

como

plegar

independientemente unidades estructurales ( 50-300 aminocidos de

longitud) emerge de forma secuencial desde el ribosoma. Este proceso
evita el contacto entre dominios no nativos, suavizando as el paisaje
plegado - energa para las grandes protenas. Secuencial dominio
plegado durante la traduccin, que es altamente eficiente en ribosomas
eucariticos,

probablemente

promueve

la

evolucin

explosiva

de

protenas multidominio complejas en eucariotas. Se cree plegable Co

-traduccional que ser ayudado por la velocidad de elongacin ms lento
de los ribosomas eucariotas ( 4 aminocidos s - 1 en eucariotas frente a

20 aminocidos s - 1 en las bacterias) y, como resultado de diversas

adaptaciones de la maquinaria de plegado. Por ejemplo, los ribosomas
eucariotas se unen los complejos especializados chaperona HSP70 (Fig.
5) y la unin y liberacin de la HSC70 cannica de las cadenas
nacientes pueden coordinarse con velocidad de desplazamiento con el
fin de apoyar plegable dominio se refiere. El eucariota chaperonina TRiC
es reclutado para cadenas nacientes por HSC70 (ref. 69) y otros factores
de aguas arriba, tales como pre plegado, permitiendo de plegado co
-traduccional. Por otra parte, el ajuste de plegado co-translacional
puede conseguirse por traslacin haciendo una pausa en los codones
raros. En general, la traduccin y la chaperona maquinaria eucariota
han sido altamente optimizados a travs de la evolucin, asegurando
plegado eficiente

para

la mayor

parte

de

las protenas

recin

sintetizada..
El chapern vas de operar en el retculo endoplasmtico (ER) siguen los
principios de organizacin anlogos, pero maquinaria especializada se
utiliza en la formacin de disulfuro - bono y la glicosilacin de muchas
protenas secretoras.
Mantenimiento proteoma y la red proteostasis
Aunque en general se acepta que no se requiere la maquinaria
acompaante de plegado de protenas inicial, slo estamos empezando a
apreciar la medida en que muchas protenas dependen de la asistencia
macromolecular largo de su vida celular para mantener o recuperar sus
conformaciones funcionalmente activas. En comparacin con los
procariotas, los proteomas de clulas eucariotas son altamente
complejo, que comprende un nmero mucho mayor y la diversidad de

las protenas multidominio. En el entorno celular dinmico, estas

protenas se enfrentan constantemente a numerosos retos a sus estados
plegados ; son el resultado de modificaciones post -traduccionales
(fosforilacin y acetilacin), los cambios en la fisiologa celular y
alteraciones en la composicin y la concentracin de ligandos de
molculas pequeas que pueden influir en protenas estabilidad. Por
otra parte, el 20-30% de todas las protenas en clulas de mamfero son
intrnsecamente no estructurada, es decir, que pueden adoptar
conformaciones tridimensionales definidos slo despus de la unin a
otras macromolculas o superficies de membrana. Tales protenas
probablemente necesitan ayuda para evitar interacciones aberrantes y
de agregacin, en particular cuando se incrementa su concentracin y
no se encuentran en complejos con molculas asociadas.
Estas consideraciones ayudan a explicar por qu las clulas tienen que
invertir en una amplia red de factores, que comprende protenas 800 en
las clulas humanas ( 200 acompaantes y compaeros de chaperones
y 600 UPS y componentes autofagia), que cooperan para mantener la
integridad conformacional del proteoma y proporcionar la adaptacin a
los cambios en el medio ambiente. Esta red proteostasis integra
componentes generales y especializados chaperonas para plegamiento
de la protena y el trfico con la maquinaria para la desagregacin y la
degradacin

proteoltica

de

las

protenas

mal

plegadas

(irreversiblemente el SAI y el sistema de la autofagia) (Fig. 6). La notable

complejidad del sistema se deriva de la expansin, en los organismos
multicelulares, de la diversidad de los componentes reguladores para
los sistemas de chaperonas principales (HSP70 y HSP90) y de los

factores de acoplamiento funcionalmente estas chaperonas con el SAI y

el sistema de la autofagia. Por ejemplo, diversos cofactores HSP70, tales
como el athanogeno BCL2 - asociado (BAG) y ciertas protenas de la
familia HSP40s, contienen dominios de tipo ubiquitina o ubiquitina interactuando. El cofactor HSP70 y HSP90 conocido como carboxilo
terminal de la protena Hsp70 de interaccin (CHIP) tiene actividad
ubiquitina ligasa E3 y canales ciertas protenas mutantes o daado
hacia la degradacin proteasomal. En particular, CHIP es slo uno de
varios cientos de ligasas E3 diferentes, lo que refleja la enorme
importancia de las vas proteolticas para proteostasis y la regulacin
celular. Curiosamente, mientras que la eliminacin de especies de
protenas mal plegadas por el SAI requiere que estas molculas se
mantienen en un estado no agregado por chaperones, se cree que la
eliminacin de la autofagia para involucrar mecanismos activos para
obligar a esas molculas en grande, presumiblemente menos txicos,
agregados. Estas inclusiones son a menudo depositadas en sitios
subcelulares especficos cerca del centro organizador de microtbulos,
conocidos como agregados.
La red proteostasis est regulada por varias vas de sealizacin
interconectadas, algunas de las cuales son la tensin de respuesta y
garantizar que el plegamiento de protenas celulares y / o degradacin
est adaptada para evitar la acumulacin de mal plegada y especies
propensas a la agregacin (Fig. 6). Estas vas incluyen la respuesta al
estrs citoslica y la respuesta de la protena desplegada de las vas de
ER y mitocondrias, as como de sealizacin que controlan la biognesis
de ribosomas y la capacidad de traslacin (Cuadro 1). Cmo las

aportaciones de las diferentes ramas estn coordinadas y afinado es

slo parcialmente entendida, pero la capacidad proteostasis y capacidad
de respuesta al estrs puede variar considerablemente en diferentes
tipos de clulas.
Colapso Proteostasis en el envejecimiento y la enfermedad
La acumulacin de protenas mal plegadas y/u oxidada en las clulas
durante el envejecimiento es un reto para el sistema proteostasis y
eventualmente resulta en la deposicin de los agregados, como se
muestra en organismos modelo tales como Caenorhabditis elegans y
Drosophila. La incapacidad de las clulas para restaurar proteostasis
normal puede resultar en la enfermedad, e incluso en la muerte celular.
En efecto, numerosas enfermedades son ahora reconocidos para ser
asociado con el plegamiento de protenas aberrante y por lo general se
clasifican como de prdida de funcin o las enfermedades de ganancia
de funcin txica, aunque los estados patolgicos especficos a menudo
muestran elementos de ambos grupos. Los primeros son generalmente
causados por mutaciones hereditarias e incluyen numerosos trastornos
como la fibrosis qustica, enfermedades de depsito lisosomal y la
deficiencia de 1 - antitripsina. Este ltimo, trastornos de ganancia de
funcin, incluye la diabetes tipo 2 y las principales enfermedades
neurodegenerativas

(enfermedad

de

Parkinson,

enfermedad

de

Huntington, esclerosis lateral amiotrfica y la enfermedad de Alzheimer)

y son ya sea espordica o causada por mutaciones que hacen que las
protenas especficas ms de agregacin propensos. Estas enfermedades
ganancia de funcin son tpicamente relacionada con la edad y son
causadas por la acumulacin de amiloide o amiloide como agregados de

la protena de la enfermedad. Una posible explicacin para la aparicin

tarda de estas enfermedades es provista por la evidencia reciente de los
organismos

modelo

que

las

vas

de

sealizacin

que

regulan

proteostasis se integran con los mecanismos genticos y epigenticos

que controlan la longevidad (Cuadro 1). Por lo tanto, la disminucin
relacionada con la edad en proteostasis y especficamente en la
incapacidad para regular al alza chaperones en respuesta a las
presiones

de

conformacin

desencadenara

manifestacin

de

la

enfermedad y a su vez, acelerar el colapso proteostasis.

Aunque el principio de funcionamiento txicos en estos trastornos est
lejos de ser comprendido, est surgiendo un consenso que los agregados
oligomricos solubles, que pueden ser 'en - va "o" fuera de ruta' hacia
la formacin de fibrillas, son las especies citotxicos primarios (Fig. 1).
Una hiptesis destacada sugiere que estos oligmeros exponen a
superficies hidrfobas promiscuas que pueden mediar interacciones
aberrantes con varias otras protenas o con las membranas celulares.
En apoyo de esta propuesta, un estudio reciente de la protemica en
clulas humanas mostraron que ciertas protenas metaestables se
dirigen preferentemente por tales interacciones, lo que resulta en su co
- agregacin con la enfermedad amiloidognica protena. Las protenas
co - agregacin en general son grandes en tamao y se enriquecen en
regiones intrnsecamente no estructurados, las propiedades que se
acoplan con un alto grado de funcionalidad. En consecuencia, tienden a
ocupar posiciones de cubo esenciales en redes de protenas celulares,
incluyendo la regulacin de la transcripcin, la traduccin y el
mantenimiento de la arquitectura celular, lo que sugiere que su

secuestro por los agregados amiloides resultados en la toxicidad

multifactorial. Una manifestacin interesante de este mecanismo de
toxicidad es la reciente demostracin de que la agregacin de p53
mutante puede ejercer potencial oncognico dominante por el secuestro
de p53 de tipo salvaje en los compaeros de los agregados, lo que
resulta en una prdida completa de la funcin de p53.
Toxicidad agregada puede ser agravado por la incapacidad de las
clulas afectadas para responder adecuadamente a estmulos de estrs.
Esto es consistente con la evidencia reciente de que las especies de
protenas aberrante plegadas pueden interferir con las funciones
Proteostasis centrales, incluyendo el plegamiento de protenas y los
mecanismos de aclaramiento. En particular, la sobreexpresin de los
miembros del sistema de HSP70 se ha demostrado que inhiben la
formacin de oligmeros txicos y para prevenir la formacin de
agregados de amiloide de la enfermedad de diferentes protenas. En el
caso de las protenas de poliglutaminas - repeticin, la cual causa la
enfermedad de Huntington y varios trastornos neurodegenerativos
relacionados, HSP70 coopera con la chaperonina TRiC para evitar la
acumulacin de oligmeros potencialmente txicos, que es una
reminiscencia de la cooperacin funcional entre estos sistemas de
chaperonas en protenas de novo plegado.
Sobre la base de estos hallazgos, la regulacin al alza de la funcin
chaperona farmacolgica promete abrir nuevas estrategias para el
tratamiento de numerosos estados patolgicos asociados con el
plegamiento aberrante y la agregacin. Experimentos de prueba de
principio que utilizan compuestos de molculas pequeas para

aumentar la sntesis de acompaante y reequilibrar proteostasis (por

ejemplo,

mediante

la

activacin

de

choque

trmico

factor

de

transcripcin - 1 (vas HSF- 1) - regulados) ya han demostrado su

eficacia en la prdida de la funcin y modelos de enfermedad de
ganancia de funcin txica. Del mismo modo, recientemente identificado
activadores del proteasoma 94 tienen el potencial de acelerar la
liquidacin de especies de protenas txicas, particularmente cuando se
aplica en combinacin con la regulacin positiva chaperona. A
diferencia

de

los

frmacos

convencionales,

tales

"

reguladores

Proteostasis ' no sera especfica de la enfermedad o de la protena

especfica, por lo que puede ser aplicable a todo un grupo de
enfermedades relacionadas - un nuevo concepto en la prctica mdica.
Pronstico
Estudios realizados durante las ltimas dos dcadas han proporcionado
una visin fascinante de la mecnica de la chaperona asistida por el
plegamiento de protenas, pero todava hay grandes lagunas en nuestra
comprensin de cmo las vas de plegado en la clula se diferencian de
los estudiados en el tubo de ensayo. El progreso se ve frenada por el
problema de que los mtodos biofsicos sofisticados utilizados para
caracterizar intermediarios de plegamiento in vitro no son fcilmente
transferibles a la situacin in vivo. Mayor potencial de innovacin tanto,
se puede esperar de la evolucin de las tcnicas de imagen avanzadas,
con el tiempo que nos permite monitorear los cambios conformacionales
en una sola cadena polipeptdica como se desprende de los ribosomas,
lleva a cabo su funcin biolgica y es finalmente degradado en la clula
viva. Mucha investigacin tambin se estimula por el concepto

emergente de que las chaperonas moleculares funcionan como el

elemento central de una red celular mucho ms grande de control de
proteostasis, que comprende, adems, la maquinaria de la biognesis de
protenas, as como el SAI y el sistema de la autofagia. Desentraar el
complejo circuito de regulacin de esta red y entender por qu pierde su
agarre durante el envejecimiento plantear un reto importante en los
prximos aos. La solucin de este problema requerir un amplio
enfoque de biologa de sistemas basndose en una combinacin de
perfiles

de

ribosoma,

protemica

cuantitativa

modelado

computacional. Cmo reaccionan las clulas al estrs conformacional o

deficiencia proteostasis a nivel proteoma est claro. Las preguntas clave
incluyen la determinacin de cmo ciertos aberrante plegamiento de
protenas agregadas en especies txicas, mientras que otros se
degradan, cmo la composicin de los cambios proteosoma durante el
envejecimiento, lo que la firma de un proteoma juvenil es, y cmo
podemos encontrar maneras de mantener por ms tiempo de lo que
edad. Para abordar estas y otras cuestiones relacionadas no slo ofrece
grandes

oportunidades

para

la

intervencin

de

numerosas

enfermedades actualmente incurables, sino tambin con el tiempo

revelar la relacin fundamentalmente importante entre proteostasis y
longevidad.

Figura 1 | Conflicto de reacciones de plegamiento de protenas y

agregados. Esquema de la superficie en forma de embudo de energa

libre que las protenas explorar a medida que avanzan hacia el estado
nativo (verde) mediante la formacin de contactos intramoleculares
(modificado de referencias 19 y 95). La robustez de los resultados
paisaje de energa libre en la acumulacin de conformaciones
cinticamente atrapadas que necesitan para atravesar barreras de
energa libre favorable para llegar a una ruta cuesta abajo. In vivo, estos
pasos pueden ser acelerados por chaperones. Cuando varias molculas
se pliegan simultneamente en el mismo compartimento, la superficie
de energa libre de plegado puede solaparse con la de la agregacin
intermolecular, dando como resultado la formacin de agregados
amorfos, oligmeros txicos o fibrillas amiloides ordenado (rojo).
Agregacin

fibrilar

se

produce

normalmente

por

polimerizacin

dependiente de la nucleacin. Se puede iniciar a partir de intermedios

de poblacin durante el plegamiento de novo o despus de la
desestabilizacin del estado nativo (estados parcialmente plegadas) y,
normalmente, es impedido por chaperonas moleculares.

Figura 2 | El ciclo chaperona HSP70.HSP70 cambia entre alta y baja

afinidad para los estados desplegado y parcialmente plegado de
protenas de unin a ATP y la hidrlisis. Desplegada y sustrato
parcialmente

plegada

(cadena

naciente

protena

de

estrs

desnaturalizado), la exposicin de segmentos peptdicos hidrfobos, se

entrega a ATP determinada HSP70 (abierto; baja afinidad por el sustrato
con alta en las tasas de y fuera de tasas) por uno de varios cofactores
HSP40. La hidrlisis de ATP, que se acelera por HSP40, resultados en
cierre de la tapa un - helicoidal del dominio de unin al pptido

(amarillo) y la unin fuerte de sustrato por HSP70 (cerrado; alta

afinidad con baja en las tasas de y fuera de las tasas). La disociacin de
ADP catalizada por uno de varios factores de intercambio de nucletidos
(NEF) se requiere para el reciclaje. La apertura de la tapa un helicoidal, inducida por la unin del ATP, los resultados en la liberacin
de sustrato. Plegable se promueve la agregacin y se evita cuando tanto
la tasa de plegado constante (Kfold) es mayor que la constante de
asociacin (Kon) para la unin de chaperona (o reconsolidacin) de los
estados parcialmente plegados, y Kon es mayor que por la asociacin
intermolecular de orden superior agregacin tasa constante K agg
(Kfold> K en > Kagg) (particin cintica). Para las protenas mal plegadas
que pueblan estados, Kon puede ser mayor que K veces (K = K veces en
> Kagg). Estas protenas se estabilizan por HSP70 en un estado no
agregado, sino que requieren la transferencia en la jaula chaperonina
para el plegado. Despus de la tensin conformacional, K agg puede
llegar a ser ms rpido que Kon, y la agregacin se produce (Kagg > Kon
= Kfold), a menos que la expresin chapern es inducida a travs de la
va de respuesta al estrs. Estructuras en esta figura se refieren a la
protena Data Bank (PDB) la adhesin cdigos 1DKG, 1DKZ, 2KHO y
2QXL. Pi, fosfato inorgnico.
Figura 3 | plegable en el chaperonina cage.Substrate GroEL.GroES
unin a GroEL (tras el cambio de HSP70) puede resultar en desarrollo
local de 42. La unin del ATP a continuacin, desencadena una
reordenacin conformacional de los dominios apicales GroEL. Esto es
seguido por la unin de GroES (formando el complejo cis) y la
encapsulacin sustrato para el plegado. Al mismo tiempo, ADP y GroES

se disocian de lo contrario anillo de GroEL (trans), lo que permite la

liberacin del sustrato que haba sido encerrado en el antiguo complejo
cis 32 (omitido de la figura por simplicidad). El nuevo sustrato
permanece encapsulado, libre de doblar, durante el tiempo necesario
para hidrolizar los siete molculas de ATP en el complejo cis recin
formado ( 10 s). La unin de ATP y GroES al anillo trans provoca la
apertura del complejo cis. Un simtrica GroEL - (GroES) 2 complejo
puede formar transitoriamente. Modelo estructural se basa en 1AON
adhesin AP.

Figura 4 | ciclo de pase AT de un sistema HSP90.En sentido horario

desde la parte superior izquierda, la unin del ATP al pase del dominio
AT N-terminal (ND) de la apo-HSP90 induce un cambio conformacional
y el cierre de la tapa de la ATP en la ND. Despus de cierre de la tapa, el
NDs

dimerize,

formando

la

HSP90

dmero

cerrado

(abrazadera

molecular) con subunidades retorcidos. Esta conformacin metaestable

se compromete a la hidrlisis de ATP. Despus de la hidrlisis, la END
se disocian. La molcula de sustrato inactivo interacta principalmente
con el dominio medio (MD) y se conformacionalmente activa como
HSP90 procede a travs de la al ciclo de Pase. Los cofactores Cdc37,
salto, AHA1 y p23 acelerar o ralentizar determinadas etapas del ciclo.
Estructuras relacionadas con adhesiones AP 2IOQ, 2O1U, 2CG9 y
2O1V. CD, C-terminal AT Pase dominio.

Figura 5 | Organizacin de las vas de acompaantes en las

bacterias citosol. Bacteria a la (izquierda) y eucariotas (derecha),

chaperones esa funcin en la estabilizacin de polipptidos nacientes en
los ribosomas y en el inicio de plegado cooperar con la maquinaria que
acta aguas abajo en la realizacin de plegado. El nmero de sustratos
que interactan se indica como un porcentaje del proteoma total. La
primera categora incluye factores de chaperonas que se unen en
estrecha proximidad con el sitio de salida del polipptido ribosmico,
tales como el factor desencadenante (TF) en bacterias y complejos
HSP70

especializados

(complejo

ribosoma-asociado

(Rac)

en

Saccharomyces cerevisiae, MPP11 y HSP70L1 en clulas de mamfero) y

de la naciente cadena asociada al complejo (NAC) en eucariotas). Estas
chaperonas se unen segmentos de cadena hidrfobos. Los miembros no
ribosomas determinada de la funcin como chaperones de segundo
nivel para las cadenas nacientes ya la familia HSP70 (DnaK en bacterias
y en eucariotas HSC70), co-mediacin o plegado despus de la
traduccin. Tambin distribuyen subconjuntos de protenas chaperonas
de aguas abajo, tales como la chaperoninas (GroEL en bacterias y en
eucariotas TRIC) y HSP9052. Substrato de transferencia HSC70 a la
HSP90 se promueve por el HOP protena de acoplamiento. La flecha
indica que la va no est bien establecida. Estructuras relacionadas con
adhesiones AP 1DKG, 1DKZ, 2KHO, 1W26, 3IYF, 2AVY, 2AW4, 1FXK,
3LKX, 2IOQ, 2QWR y 1NLT. N, protena nativa; GrpE, GrpE protenas,
ARNm, ARN mensajero, PFD, pre plegado.

La figura 6 | destino de protenas en la red proteostasis.

Figura 5.
Un ejemplo de la Hsc70 modelo vinculante y la hidrlisis de ATP en
serie para el desmontaje de las jaulas clatrina destacando la secuencia
de eventos en una sola triskelion. 1: Auxilin tiene una alta afinidad para
las piernas triskelion que forman parte de una jaula de clatrina y se
une a una estequiometria de uno por triskelion. 2: Un Hsc70: complejo
de ATP se une a la clatrina: complejo auxilin. 3: La interaccin entre el
dominio J y Hsc70 de auxilin estimula la hidrlisis de ATP e induce un
cambio conformacional en Hsc70, aumentando su afinidad por clatrina.
4: reposiciona Auxilin, y una segunda Hsc70: ATP sea contratado a la
clatrina: complejo auxilin. 5: El segundo interacta con Hsc70 de
auxilin J dominio, el ATP se hidroliza, y el resultante Hsc70: complejo
de ADP se une fuertemente a la clatrina. Despus de la hidrlisis, la
auxilin reposiciona de nuevo, y la tercera Hsc70: El ATP se une a la
clatrina: complejo auxilin. 6: La hidrlisis de los terceros resultados de
ATP en una dbil interaccin entre el triskelion (Hsc70: ADP) 3 complejo
y la jaula. El paso limitante de la velocidad es el desmontaje de triskelia
que conduce al colapso de la jaula. 7: El Hsc70: ADP complejo tiene una
alta afinidad por el triskelia liberado y permanece unida, mientras que
la afinidad de triskelia (Hsc70: ADP) 3 para auxilin es baja; la auxilin
previamente consolidado es libre ahora para volver a enlazar la jaula de
una manera cataltica (8).