MODULO V LIOFILIZACIN

Mercedes Fernndez Arvalo

LIOFILIZACIN: La ciencia del freeze-drying.

PROCESO DE DESECACIN DONDE EL SOLVENTE (AGUA) ES CONGELADO Y ELIMINADO POSTERIORMENTE POR SUBLIMACIN EN AMBIENTE DE VACIO.

Freeze-drying es la eliminacin completa del agua de un material sin producir ningn cambio ni en su estructura bsica ni en su composicin.

LIOFILIZACIN: un poco de historia

LIOFILIZACIN DE PATATAS Incas en Peru (y actualmente):
Eliminan la mayor cantidad de agua posible hasta obtener una pasta muy concentrada. Almacenan la pasta en lo ms alto de las montaas. Aqu, las bajsimas temperaturas congelan el alimento y el agua del interior se evapora muy despacio a las bajas presiones del aire en esas altitudes. El producto obtenido (CHUNO), es un polvo fino que se puede almacenar durante ms de 4 aos.

LIOFILIZACIN: un poco de historia

Freeze-drying se desarroll comercialmente durante la II Guerra Mundial para preservar el plasma sanguneo y la penicilina.

Desde los 60, la industria utiliza prcticamente la misma tecnologa para producir todo tipo de productos.

LIOFILIZACIN: un poco de historia

Sublimacion vs. Fusion

LIOFILIZACIN

VENTAJAS INCONVENIENTES

LIOFILIZACIN
VENTAJAS
EMPLEO DE TEMPERATURAS MUY BAJAS, circunstancia que permite aumentar la estabilidad del producto y disminuir la prdida de sustancias voltiles PRODUCTO FINAL LIOFILIZADO, es decir, con alta porosidad, solubilidad rpida y completa y condiciones estriles CONTENIDO FINAL DE HUMEDAD < 0.5 % EMPLEO DE VACO: no existe oxidacin

LIOFILIZACIN
INCONVENIENTES
COSTE ELEVADO DE LOS EQUIPO (X3) CONSUME ENERGTICO ELEVADO (X2) PROCESO LARGO (24 h)

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones ...

... en el campo farmaceutico

Ciertos antibiticos, vacunas, plasma, hemoderivados, sueros, vitaminas, extractos, leche materna, etc., son mucho ms estables durante su almacenamiento en formulaciones liofilizadas que en su estado natural.

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones ...

... en el campo farmaceutico La vacuna del sarampin es un ejemplo de vacuna liofilizada ampliamente utilizada.

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones ...

... en el campo farmacutico

Ratones genticamente modificados por la insercin de una porcin extra de DNA, utilizados en investigacin biomdica ACTUALMENTE ESTAN LIOFILIZADOS

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones ...

... en el campo farmacutico Proyecto Genoma: pptidos, protenas, DNA, ... (estabilidad)

Biofrmacos: frmacos de origen biolgico Muchas protenas y ptidos presentan inestabilidad qumica y fsica, desnaturalizndose rpidadmente incluso a temperatura ambiente. Muchos de los frmacos basados en este tipo de biomolculas pueden estabilizarse por liofilizacin.

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones ...

... en el campo farmaceutico
Adems de los cometados, existen otro tipo de molculas que para su uso como frmaco requieren de una previa liofilizacin: Ej.: agentes quimioteraputicos cisplatino y doxorubicina.

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones

... en el campo farmaceutico
La liofilizacin de microorganismos se hace actualmente de forma rutinaria; muchos de ellos se mantienen en medios de cultivos para almacenarse y distribuirse en forma liofilizada.

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones

... en el campo alimentario
Mantienen intactas todas sus cualidades: forma, gusto, sabor, color y valores nutricionales, libre de aditivos y conservantes. Tienen larga vida til. No necesitan demasiados cuidados de almacenamiento, solo requieren ser almacenados en un lugar fresco y seco. De fcil aplicacin. Rehidratacin instantnea. Excelente microbiologa.

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones

... en el campo alimentario
YOGOURT EN POLVOS FRUTAS: Manzana, Damasco, Banana, Mora, Zarzamora, Arndano, Meln Cantaloupe, Cerezas, Limn, Mango, Naranja, Papaya, Anan, Frambuesa, ... VEGETALES: Esprrago, Maz, Zanahoria, Brcoli, Coliflor, Apio, Patata, Hongos, Aceituna, Espinaca, Pimientos, ... USOS: Mezclas secas (sopas deshidratadas, postres, comidas para microondas, etc); Snacks; Mezclas con cereales; Industrias de confitera, chocolates y golosinas (barras de cereal, galletitas, cremas, mousses, postres, etc)

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones

... en el campo alimentario
VIDA UTIL Para frutas y verduras 12 meses en un lugar fresco y seco, aunque puede extenderse a 24 meses si son refrigerados. El resto de los productos tienen una vida til de aproximadamente 6 meses en su envase original.

PRESENTACION: Polvo, Grnulos, Cubos, Slices, o Enteros

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones

... en otros campos INVESTIGACIN: Ej.: Microscopa de muestras hmedas, pueden distorsionarse debido a un secado por evaporacin en condiciones normales. Estas distorsiones son debidas a las fuerzas de tensin superficial generadas durante todo el tiempo que dure la evaporacin. Si la muestra es previamente liofilizada, la distorsin se reduce enormemente, generando resultados ms fiables.

LIOFILIZACIN: algunas aplicaciones

... en otros campos Especialmente importante en SEM: en este caso, las muestras tiene que desecarse previamente y ser conductoras, porque la imagen se forma a travs del uso de electrones y no de la luz. La liofilizacin ha permitido usar esta tecnologa en campos de actuacin muy mplios.

LIOFILIZACIN
CARACTERSTICAS DE LOS PRODUCTOS A LIOFILIZAR
Productos inestables Sustancias termolbiles Cuando se requieran condiciones de asepsia Resolucin rpida y completa Productos de elevado coste

LIOFILIZACIN
TIPOS DE PRODUCTOS A LIOFILIZAR
Materiales no vivientes tales como plasma sanguneo, suero, soluciones de hormonas, productos farmacuticos y alimentos ... Transplantes quirrgicos de especies tales como arterias, piel y huesos Clulas vivas destinadas a permanecer en ese estado por largos perodos de tiempo. Ejemplos incluyen bacterias, virus y levaduras

LIOFILIZACIN: Descripcin del

proceso
CONGELACIN

DESECACIN PRIMARIA

DESECACIN SECUNDARIA

LIOFILIZACIN: Descripcin del

proceso
P
Diagrama de estado fsico de agua
En los puntos de cada curva, el agua est en equilibrio en las dos fases. En el punto triple coexisten las tres fases.

P.T.

4.6 mm

- 0.008 C

LIOFILIZACIN: Descripcin del

proceso
Diagrama de estado fsico de agua

P CONGELAR POR DEBAJO DEL PUNTO TRIPLE

P.T . 4.6 mm

ES ESTO SUFICIENTE?
- 0.008 C

LIOFILIZACIN: Descripcin del

proceso
T
Solucin de NaCl

PUNTO EUTCTICO

0 C
Hielo + Solucin

Sal slida + Solucin

Temperatura mnima a la que congelan todos los componentes

-21.5 C 100 % W 0 % NaCl

Hielo + sal slida

23 % NaCl

100 % NaCl 0%W

LIOFILIZACIN: Descripcin del

proceso
T
0 C Solucin de NaCl Hielo + Solucin -21.5 C 100 % W 0 % NaCl Sal slida + Solucin

ENFRIAR POR DEBAJO DEL PUNTO EUTCTICO

Hielo + sal slida 100 % NaCl 0%W 23 % NaCl

Resistividad, A.T.D.

ESQUEMA GENERAL DE UN LIOFILIZADOR

CMARA DE LIOFILIZACIN COMPRESOR CONDENSADOR

T liof. > T cond. Pv(s-g) > P liof.

BANDEJAS CALENTADAS

P liof. > P cond. > Pv (T liof.)

SERPENTN REFRIGERADO BOMBA DE VACO

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

DISPOSICIN DEL MATERIAL:
1. GRANEL: Bandejas de acero inoxidable Fondo plano Capas finas (1.5 - 2 cm) 2. DOSIS UNITARIAS: Viales, ampollas, frascos (hemoderivados)

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

CONGELACIN:
En congeladores independientes o en el propio liofilizador OPERACIN CRTICA (cualidades producto final) 1. ESTTICA: Bandejas, viales 2. ROTACIN: Frascos grandes (EN BANDA) TEMPERATURA CONGELACIN (- 40 C - - 50 C) VELOCIDAD DE CONGELACIN

OBJETIVO: Congelar el agua libre del producto VELOCIDAD DE CONGELACIN

Condiciona la estructura de la matriz congelada. LENTA CRISTALES MAYORES

RPIDA CRISTALES PEQUEOS

VELOCIDAD DE CONGELACIN
Condiciona la estructura de la matriz congelada.

CRISTALES MAYORES Estructura porosa mayor Menor resistencia al flujo del vapor de agua Menor duracin de la desecacin primaria Estructura menos resistente

CRISTALES PEQUEOS Estructura porosa ms fina Mayor resistencia al flujo del vapor de agua Mayor duracin de la desecacin primaria Estructura ms resistente

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

DESECACIN PRIMARIA: SUBLIMACIN
HIELO VAPOR (PRESIN MUY REDUCIDA) BOMBA DE VACO APORTE DE CALOR (Resistencias elctricas
Fluido caliente)

Velocidad de secado Velocidad de calentamiento

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

DESECACIN PRIMARIA: SUBLIMACIN
El vapor de agua que se origina se recoge en la superficie del CONDENSADOR. El condensador ha de tener suficiente superficie y capacidad de enfriamiento para condensar todo el agua que sublima a una temperatura inferior a la del producto. (Si la temperatura del condensador es superior a la del producto, el vapor de agua tender hacia ste y se parar el proceso de secado).

P liof. > P cond. > Pv (T liof.)

Es necesario reducir la presin en el interior de la cmara y aplicar calor al producto (no subir la temperatura) para que se produzca la sublimacin (proceso endotrmico).

T liof. > T cond.

DIAGRAMA DE CONTROL T (C)

40

Temperatura de las bandejas

P (mm Hg)
500

20 0

Temperatura del producto

300

20 40
CONGELACIN DESECACIN PRIMARIA

Presin
DESECACIN SECUNDARIA

100

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

DESECACIN PRIMARIA: SUBLIMACIN CONTROLES
CONTROL de la velocidad de secado: Si es demasiado rpido, el producto seco fluir hacia el condensador escapando junto al vapor de agua. PRDIDA DE PRODUCTO POR ARRASTRE SUSTANCIAS DE CARGAS (sacarosa, manitol, glicina)

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

DESECACIN PRIMARIA: SUBLIMACIN CONTROLES
CONTROL de la velocidad de calentamiento de las bandejas:
Si se calienta demasiado rpidamente, el producto fundir y a esas bajas presiones se producir una ebullicin (PUFFING). Consecuencia: cambios en las caractersticas fsicas del producto, visualmente inaceptable y mucho ms difcil de reconstituir.
MIENTRAS EXISTA AGUA LIBRE CONGELADA, LA TEMPERATURA DEL PRODUCTO DEBE ESTAR POR DEBAJO DE SU PUNTO EUTCTICO.

DIAGRAMA DE CONTROL T (C)

40

Temperatura de las bandejas

P (m Hg)
500

20 0

Temperatura del producto

300

20 40
CONGELACIN DESECACIN PRIMARIA

Presin
DESECACIN SECUNDARIA

100

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

DESECACIN PRIMARIA: SUBLIMACIN CONTROLES
T (C) P (m Hg)

Temperatura de las bandejas

Mientras dure la sublimacin del agua congelada, el producto se mantendr fro. Por lo tanto, durante esta fase la T del producto deber estar por debajo de la T de las bandejas, que est proporcionando el calor de sublimacin.

Temperatura del producto Presin CONGELACIN DESECACIN PRIMARIA DESECACIN SECUNDARIA

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

DESECACIN PRIMARIA: SUBLIMACIN CONTROLES
T (C) P (m Hg)

Temperatura de las bandejas

Temperatura del producto Presin CONGELACIN DESECACIN PRIMARIA DESECACIN SECUNDARIA

Al finalizar la desecacin primaria, la T del producto subir asintticamente hacia la T de las bandejas. Esto (y otros mtodos) permite detectar el punto final de esta etapa.

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

DESECACIN SECUNDARIA: DESORCIN (30 %)
AGUA LIGADA (no congelable) VAPOR

Productos cristalinos: % muy bajo Productos amorfos: % muy elevado

DURACIN de esta etapa

HUMEDAD FINAL: << 1%

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

DESECACIN SECUNDARIA: DESORCIN (30 %) T (C) Temperatura de
las bandejas P (m Hg)

Como en este punto no existe agua libre, la T de las bandejas puede subir sin riesgo de que se produzca fusin.

Temperatura del producto Presin CONGELACIN DESECACIN PRIMARIA DESECACIN SECUNDARIA

La T se aumenta para producir la desorcin del agua ligada (ej., de cristalizacin) hasta que la humedad residual del producto baje hasta los lmites exigidos para garantizar su estabilidad. Normalmente se realiza a la mxima capacidad de vaco que el desecador pueda alcanzar.

LIOFILIZACIN: Etapas del proceso.

DESECACIN SECUNDARIA: DESORCIN (30 %) T (C)
P (m Hg)

Temperatura de las bandejas

HUMEDAD FINAL: << 1%

Temperatura del producto Presin

CONGELACIN DESECACIN PRIMARIA

DESECACIN SECUNDARIA

CONTROL FINAL DEL CONTENIDO DE HUMEDAD Ej.: protenas y pptidos requiren de un contenido de humedad determinado para mantener sus estructuras secundarias y terciarias y, por tanto, su actividad.

Lyophilization equipment has improved over the years, and, with the advent of automated, sophisticated control mechanisms, has become much easier to use. The complexity of the controls, however, has made validation efforts more complicated and usually quite time consuming. In addition to cooling, heating, and vacuum control functions already discussed, many freeze dryers will also incorporate clean in place (CIP), sterilize in place (SIP), computerized cycle control, and cycle monitoring functions. The reliable reproducible performance of all these functions must be validated rigorously to insure consistent product quality.

Quik-Dry Flasks When a product is frozen in a thin layer on the inner wall surface of a large-diameter flask using a shell freezer, the overall sublimation rate significantly increases as compared to the product frozen as a plug in the bottom of a similar flask. Quik-Dry flasks feature a special shape to achieve a thin layer of product when shell-freezing a horizontally placed flask. Multi-Tainers Rugged, stainless steel Multi-Tainers are used for freezedrying bulky materials or products which have already been frozen in Petri dishes, serum vials, or similar containers.

Acid Filters Acid filters protect vacuum pumps when freeze drying acidic or organic solvents. Models are available for manifold freeze-dryers with a vapor stream or in-line design. Replacement cartridges are also available.

FREEZE-DRYERS BENCHTOP ACCESSORIES

http://www.tradar.com.ar/Castellano/Productos/Liofilizados/Alimentos% 20liofilizados.htm https://www2.seguridad.com/edelweiss/secure/cat2/cocina/alimen/liofil.htm http://www.agrotecnica.net/espanol/marcospductos.html http://home.howstuffworks.com/freeze-drying2.htm http://www.ftssystems.com/