Introducción al diagnóstico

microbiológico de infecciones
por cocos piógenos
 Generalidades
 Infecciones con abundante producción de
pus.
 Cocos grampositivos:

Staphylococcus : S. aureus,
Staphylococcus sp.

Streptococcus: S. pyogenes
S. agalactiae
S. pneumoniae
S. mutans

.
 Cocos grampositivos de importancia clínica

Género Especies Morfología Localización Fisiología Entidades clínicas

importantes y anatómica
disposició
n
Staphylococcus S. aureus Mucosa nasal Nutricional Infecciones
S. epidermidis Piel mente no cutáneas, celulitis,
S. lugdunensis exigente bacteremias

S. Tracto Urinario Infecciones del

saprophyticus tracto urinario

Streptococcus S. pyogenes Orofaringe Muy Faringitis,

S. agalactiae Canal vaginal exigentes infecciones
S. pneumoniae Faringe nutricional cutáneas
S. mutans Mucosa oral mente Infecciones en
neonatos
Neumonía,
meningitis
Caries dental
Generalidades
 Cocos gram negativos:
Neisseria: Neisseria meningitidis ( meningococo),
Neisseria gonorrhoeae (gonococo).

Sacarolítico
Oxidasa positivo
Dnasa negativa

Moraxella catarrhalis

Asacarolítico
Oxidasa positivo

Dnasa positivo
 Cocos gramnegativos de importancia clínica

Género Especies Morfología Localización Fisiología Entidades clínicas

importantes y anatómica
disposición

Neisseria N. menigitidis Orofaringe Muy Faringitis, otitis

exigente media, meningitis,
N. Cervix nutricional bacteremia.
gonorrhoeae Uretra mente
Cervitis, salpingitis
Uretritis gonocócica

Moraxella M. catharralis Orofaringe Muy Faringitis, otitis

exigentes media en niños
nutricional Bronquitis
mente Neumonía en
inmunosuprimidos
Género Staphylococcus
Taxonomía
 Staphylococcus aureus

Pared celular
 Factores de virulencia de S. aureus
Componentes de la estructura de la pared

Cápsula Inhibe la quimiotaxis y la fagocitosis; inhibe la proliferación de

las células mononucleares; facilita la adherencia a los cuerpos
extraños.
Proporciona estabilidad osmótica; estimula la producción de
Peptidoglicano pirógenos endógenos (actividad de tipo endotoxina);
quimioatrayente leucocitario (formación de abscesos); inhibe la
fagocitosis

Ácido teicóico Regula la concentración catiónica de la membrana celular; se une

a la fibronectina.

Proteína A Inhibe la eliminación mediada por anticuerpos al unirse a los

receptores Fe de lgG1, lgG2 e lgG4; quimioatrayente leucocitario;
anticomplemento.
 Factores de virulencia de S. aureus
Toxinas estafilocócicas
Citotoxinas (a, p\ 8, Tóxicas para muchas células, incluyendo leucocitos,
y, eritrocitos, macrofagos, plaquetas y fibroblastos
y leucocidina)

Toxinas exfoliativas Proteasas séricas que rompen los puentes intercelulares

(ETA, ETB) del estrato granuloso de la epidermis

Enterotoxinas (A-E, Superantígenos (estimulan la proliferación de los linfocitos

G-l) T y la liberación de citocinas); estimulan la liberación de
mediadores inflamatorios en los mastocitos, aumentando
el peristaltismo intestinal y la pérdida de líquidos, así
como la aparición de náuseas y vómitos.

Síndrome del shock Superantígeno (estimula la proliferación de los linfocitos T

tóxico y la liberación de citocinas); produce la
toxina-1 extravasación o la destrucción celular de las células
endoteliales
 Factores de virulencia de S. aureus

Enzimas
Coagulasa Convierte el fibrinógeno en fibrina

Catalasa Cataliza la conversión del peróxido de hidrógeno

Hialuronidasa Hidroliza los ácidos hialurónicos en el tejido conectivo,

facilitando la diseminación de los estafilococos en los
tejidos

Fibrinolisina Disuelve los coágulos de fibrina

Lipasas Hidroliza los lípidos

Nucleasas Hidroliza el ADN

Penicilinasas Hidroliza las penicilinas

Procesos patológicos causados por Staphylococcus aureus

Mecanismo Enfermedad Factores de virulencia

Invasivo • Infecciones de la piel Enzimas:

• Osteomielitis • Hemolisinas
• Neumonía • Lipasas
• Bacteriemia • Proteasas
• Dnasa
• Hialuronidasa
• Fibrolisina
• Coagulasa

Toxigénico • Enteritis • Enterotoxinas

(A,B,C y otras)
• Síndrome de Piel • Exfoliatinas
escaldada (ETA, ETB)

Inmunitario • Síndrome de Shock • Toxina del Shock

Tóxico Tóxico ( TSST-1)
• Enterotoxina B y C

Prats, 2012
 Patogenia de infecciones invasivas por
S. aureus

Puerta de entrada
Adherencia y Acidos teicóicos y proteínas superficiales (adhesinas)
Penetración

Proteina A: Inhibe la eliminación`por anticuerpos

Colágeno Anticomplemento, antifagocitario
Fibronectina
Cápsula: Evasión de la fagocitosis
Elastina
Enzimas: Hemolisinas
citotoxinas( leucocidina panton- Valentin) producen
DESTRUCCION CELULAR y LISIS DE HEMATÏES,
MACRÔFAGOS y LEUCOCITOS.
DESTRUCCIÖN TISULAR
Infecciones de la piel
Osteomielitis Enzimas:Dnasa, lipasa,
estafiloquinasa,hialuronidasa:
Neumonía NECROSIS TISULAR.

Formación de pus:
Torrente sanguíneo Material necrótico
Neutrófilos
BACTERIAS PIOGENAS
Bacteremia
Prats,2012
 Cuadros Clínicos producidos por Staphylococcus .
aureus
Infección.
Infecciones de la Piel de herida
quirurgica
Impétigo

Foliculitis Celulitis
 Patogenia de infecciones toxigénicas por
S. aureus (Intoxicación alimentaria estafilocócica)

Puerta de entrada: 2 - 6 horas Alimento con enterotoxina preformada

Ingestión de alimentos
mal conservados o no refrigerados (termoestable y resistente a la acción de las enzimas intestinales)
Enterotoxinas A, B, C

Receptores neurales del intestino

Estimulación del centro del vómito del Sistema Nervioso Central

Vómito
Diarrea
Prats,2012
 Patogenia de Sindrome de piel escaldada por
S. aureus

Puerta de entrada: Piel con

infección localizada Estafilococos produtores de TOXINAS EXFOLIATINAS o EXFOLIATIVAS

Proteasas séricas que rompen

los puentes intercelulares del
estrato granuloso de la
epidermis
Eritema
Vesiculación intradérmica (AMPOLLAS)
Descamación

Impétigo bulloso

Áreas muy extensas de la piel ( donde no se puede aislar las bacterias)

Prats,2012
 Patogenia del Síndrome Shock Tóxico
Puerta de entrada

Canal vaginal
(tampones vaginales) Estafilococos productores de Toxina :
STSST-1 ( Superantígeno)

Fiebre Activa los Linfocitos T CD4

Hipotensión Macrófagos
Vómito
Mialgias
Exantema
Se activan las interleukinas inflamatorias
Vómi

SHOCK : fracaso multiorgánico

(renal, cardíaco, pulmonar) lleva a la
Perfusión celular
muerte
Prats, 2012
 Staphylococcus sp.

Determinantes de Patogenicidad:

 Las infecciones por SCN suelen asociarse a la

presencia de dispositivo artificiales como catéteres,
sondas.

 Algunas cepas de S. epidermidis sintetizan sustancias

con actividad bactericida, enzimas extracelulares y
toxinas.
 Staphylococcus sp.

 Tienen la capacidad de sintetizar el biofilm o biopelícula

1 fase: Adhesión de las células bacteriana a la superficie protésica

2 fase: Acumulación de agregados celulares favorecidos por la síntesis

de un polisacárido que funciona como adhesina intercelular
 Staphylococcus sp.

S. epidermidis

S. lugdunensis

S. saprophyticus
 Diagnóstico microbiológico
Pre-análisis
• Datos clínicos , microbiológicos y
epidemiológicos del paciente.
• Proceso infeccioso: Tipo, tiempo
de evolución ( fase de la
enfermedad).
• Selección adecuada de la muestra
y del método microbiológico para
el diagnóstico certero de la
enfermedad
 Diagnóstico microbiológico
Análisis
• Características macroscópicas y
microscópicas de la muestra.

Microscopía óptica: Exámenes

directos: GRAM: Abundantes
leucocitos polimorfonucleares y
cocos grampositivos en pares ,
tétradas o racimos intra o
extracelulares.
 Diagnóstico microbiológico
Análisis
Método convencional: Cultivo ,
aislamiento, identificación y pruebas de
susceptibilidad del microorganismo

Aerobiosis por 24 horas

Agar sangre

Agar manitol salado

 Diagnóstico microbiológico
Análisis
Identificación
bacteriana

COLORACION DE GRAM : cocos grampositivos

Prueba de la catalasa: Positivo (prueba diferencial de

Estreptocococos y Enterococos).

Prueba de la coagulasa: divide al género en dos grandes grupos

Staphylococcus coagulasa positiva: S. aureus (2018 complejo

S. aureus: S. argentun y S
Grupo de Staphylococcus sp
 Diagnóstico microbiológico
PRUEBA DE LA CATALASA
PRUEBA DE LA COAGULASA
Género Staphylococcus

IDENTIFICACION BACTERIANA
CARACTERISTICAS DE IDENTIFICACIÓN
Staphylococcus
Detección
de la proteína A

Positiva COAGULASA Negativa Manitol

Manitol negativo
positivo
Staphyloccus coagulasa negativa
Staphylococcus aureus
Novobiocina 5 mcg

Esquema Sensible Resistente

simple de las
siete pruebas
Staphyloccus coagulasa negativa S. saprophyticus
 IDENTIFICACIÓN PRESUNTIVA DE SCN POR EL
ESQUEMA SIMPLE

Especies Novobiocina Ureasa Manosa PYR Ornitina

5 mg
más frecuentes
S. epidermidis* S + + - +/-
S. haemolyticus* S - - + -
S. saprophyticus* R + - - -
S. lugdunensis S +/- + + +
S. warneri* S + - - -
S. schleiferi subs. S - + + -
schleiferi
De Paulis y col., 2003
* Grupo bacteriano
Diagnóstico microbiológico
Análisis
Pruebas de susceptibilidad

Beta lactámicos: oxacilina, penicilina

Aminoglucósidos: Gentamicina,
Amikacina.
Macrólidos: Eritromicina o
Azitromicina.
Lincosaminas: Clindamicina.
Quinolonas: Ciprofloxacina
Fluoroquinolonas: Levofloxacina.
Método de Kirby- Bauer y Método Glicilciclinas :Tigerciclina.
epsilométrico (E-test) Rifamicina: Rifampicina.
Tetraciclinas: Tetraciclina.
Disco de cefoxitin de 30mcg : Evaluación de susceptibilidad a oxacilina o meticilina
Vancomicina: Sólo cuantitativo por CIM ( Concentración Inhibitoria Mínima)
D test Discos de Eritromicina y Clindamicina.
QUE MECANISMO DE RESISTENCIA BUSCAR????
 Diagnóstico microbiológico

Post-análisis
• Correlación del las etapas de
preanálisis y el análisis.
• Redacción de resultados
definitivos.
• Elaboración y emisión de reporte
definitivo.
 Tratamiento antimicrobiano de elección

 Infecciones de piel: Oxacilina

En cepas SARM: Eritromicina y Clindamicina

 Osteomielitis:
En cepas de Estafilococos sensibles a los betalactámicos
se utiliza cefalosporinas de segunda y tercera
generación.

En cepas de Estafilococos resistentes a betalactámicos

se utiliza quinolonas
(a excepción en niños y mujeres embarazadas)
Tratamiento antimicrobiano de elección

Intoxicación alimentaria: Ninguno, sólo de sostén.

Síndrome de Choque Tóxico:

Clindamicina
Linezolid : en cepas resistentes a clindamicina.
En cepas de SARM: Vancomicina y Teicoplanina.
 Género Streptococcus

N
e
u
m
o
c
o
Streptococcus pyogenes c
o
 Caracteristicas Fisiológicas
y de Cultivo
Cocos gram positivos dispuestos en
cadena

Inmóviles

Requerimientos Nutricionales:
Exigentes, requieren de medios
enriquecidos. Agar Chocolate

Anaerobios facultativos
 Caracteristicas Fisiológicas
y de Cultivo
Fermentan carbohidratos

No producen gas

Catalasa negativo

Producen hemólisis: β, α, γ

No son esporulados

Algunas especies son capsuladas

 ClASIFICACIÓN GÉNERO Streptococcus

Grupo Serológico o Lancefield: según el polisacárido:

A,B,C,D
Clasificación del género Streptococcus

2.-Tipo de hemólisis: β, α, γ
 Clasificación del género Streptococcus

3.-Análisis de Secuencia de la subunidad pequeña

ribosoma:

I piógenico

II S. bovis

III S. mitis

IV S. mutans

V S. salivarius

VI S. milleri

VIII Especies sin filiación

Procesos patológicos causados por Streptococcus pyogenes

Mecanismo Enfermedad Factores de virulencia

Invasivo • Faringitis Enzimas:

• Erisipela • Estreptolisinas
• Impétigo ( hemolisinas)
• Celulitis • Estreptocinasa,
Dnasas
• Hialuronidasas

Toxigénico • Escarlatina • Toxina eritrogénica

(Superantígeno)

Inmunitario • Fiebre reumática • Reacción cruzada

• Glomerunefritis • Complejos inmunes
aguda.

Prats, 2012
Enfermedad: Faringoamigdalitis

Fiebre mayor a 38.5ºC

Exudado blanquecino , grisáceo y purulento
Inflamación de ganglios
Eritema en tronco cuello y extremidades

Datos relevantes de laboratorio

1. Aumento de la Proteína C reactiva
2. Aumento de títulos de ASLO
 Streptococcus agalactiae o Streptococcus del
Grupo B

• Colonias grandes mucoides más grandes que

S. pyogenes.

• Produce infecciones oportunistas en el

hombre siendo el grupo de riesgo el recién nacido
.
• Produce β-hemólisis

• Hidroliza el hipurato de sodio.

• Prueba de CAMP positiva (Acción sinérgica

con S. aureus beta hemolítico)

• Microbiota habitual en Tracto Gastrointestinal

y por contaminación coloniza la vaginal.
Etapas de la patogenia de Infección del recién nacido por
Streptococcus agalactiae o Streptococcus del grupo B
Streptococcus agalactiae o Streptococcus del Grupo B
Streptococcus pneumoniae
 Streptococcus pneumoniae
Estructura antigénica Determinantes de
patogenicidad
Antígeno capsular: 84 Cápsula
serotipos
Antígeno somático:
Enzimas: Neurominidasa
POLISACARIDO C
Antígeno F

Proteinasas M
Toxinas: Neumolisinas
 Etapas de la patogenia de Streptococcus
pneumoniae
1.- Puerta de entrada: Orofaringe: Adherencia y
colonización en senos paranasales y traquea
( primera multiplicación del neumococo)

2.- Broncoaspiración

3.- En los Bronquios : Disminución de la función ciliar y

aumento en la producción de secreciones o moco por la
cápsula y la pared del neumococo ( segunda
multiplicación).

4.- Aumento en la respuesta inflamatoria y evasión de la

fagocitosis por los polisacáridos
capsulares del neumococo.
 Etapas de la patogenia de Streptococcus
pneumoniae
5.- Reclutamiento de leucocitos en el pulmón por la
acción del ácido teicóico y peptidoglicano

6.-Aumento de las citocinas,NEUROMINIDASA del

neumococo y activación de la via alterna del
Complemento.

7.- Respuesta inflamatoria severa a nivel ALVEOLAR

8.- Lesión hística y NEUMONIA

9.- Complicaciones: Otitis media, sinusitis, meningitis

y bacteremia (70%) y septicemia.
 Diagnóstico microbiológico
Pre-análisis
• Datos clínicos , microbiológicos y
epidemiológicos del paciente.

• Proceso infeccioso: Tipo, tiempo de

evolución ( fase de la enfermedad).

• Selección adecuada de la muestra y

del método microbiológico para el
diagnóstico certero de la enfermedad
 Diagnóstico microbiológico
Análisis
• Características macroscópicas
y microscópicas de la
muestra.

Microscopía óptica:
Exámenes directos: GRAM:
Abundantes leucocitos
polimorfonucleares y cocos
grampositivos en cadenas
cortas o largas.
 Diagnóstico microbiológico
Análisis
Método convencional: Cultivo ,
aislamiento, identificación y pruebas de
susceptibilidad del microorganismo
SGA
Microaerofilia 24-48 horas a
37ºC neumococo

Agar sangre

Agar chocolate
Streptococcus grupo
SGB
viridans
 Género Streptococcus

Catalasa negativo

Vancomicina Sensible

PYR: Negativo

Hidrólisis de la Esculina: Negativo

Desarrollo en NaCl: negativo

Desarrollo a 10°C y 45°C: Negativo

 Género Streptococcus

Bacitracina de 0,04 Unidades: Sensible: S. pyogenes

Trimetoprim-Sulfametoxazole: Resistente: S. pyogenes

Optoquina: Sensible: S. pneumoniae

Resistente: Streptococcus grupo viridans

Solubilidad en bilis: Soluble: S. pneumoniae

Insoluble: Streptococcus grupo viridans
 Diagnóstico microbiológico
Agar chocolate
Prueba de la Catalasa

Caldo
Básico
 Diagnóstico microbiológico
Taxo de bacitracina de 0,04
unidades
 Diagnóstico microbiológico
Taxo de optoquina: Medir
El halo de inhibición
 Diagnóstico Microbiológico
Análisis
Catalasa negativo
Hemólisis

Hemolisis β Hemólisis α Hemólisis γ

S. pyogenes S. pneumoniae
S. agalactiae Streptococcus
Streptococcus
S. Grupo C,F,G grupo D
grupo viridans
Enterococcus sp. Enterococcus sp.
Enterococcus sp.
Diagnóstico microbiológico
Pruebas de Susceptibilidad en el Género
Streptococcus
Medio Mueller Hinton con 5% de Sangre de Carnero

Streptococcus pyogenes:

Penicilina: tratamiento de elección.

Mecanismo de Resistencia: Proteínas fijadoras de penicilina

Eritromicina: Alergia a las penicilina
Clindamicina: Droga alternativa
Cefalosporina de primera generación: cefalotina
cefaloridin
 Diagnóstico microbiológico
Pruebas de Susceptibilidad en el Género Streptococcus

Streptococcus pneumoniae

Penicilina: Resistencia cruzada a todo el grupo de betalactámicos

Mecanismo de Resistencia : Alteración de las proteínas fijadoras de

penicilina.
Oxacilina: Resistencia o no a la Penicilina.

Cefalosporinas de tercera generación: cefotaxime.

Macrólidos, Lincosaminas y estreptograminas, actúan sobre el ribosoma

(Resistencia MLS)

Alternativa:

Vancomicina , Rifampicina , Azitromicina.

 Diagnóstico microbiológico
Pruebas de Susceptibilidad en el Género Streptococcus

Streptococcus grupo viridans:

Penicilina: Mecanismo de Resistencia: Proteínas

fijadoras de penicilina

Vancomicina
 Diagnóstico microbiológico

Post-análisis
• Correlación del las etapas de
preanálisis y el análisis.
• Redacción de resultados
definitivos.
• Elaboración y emisión de reporte
definitivo.