UNIVERSIDAD DE PANAMÁ

FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES, EXACTAS Y TEC

FACULTAD DE BIOLOGÍA

SECUENCIACIÓN DEL ADN

Elaborado por:
Hilary Peralta (8-1012-320)
Curso: Biologia molecular
Grace Navas (8-994-465)
Profesor: Pedro Arauz
Lucero Hou (8-1024-323)
Raúl Almanza (8-996-114)
¿QUÉ ES LA SECUENCIACIÓN?

Es una técnica en la que se hace un análisis

más detallado de la estructura del ADN .

Consiste en un conjunto de técnicas y

métodos bioquímicos que nos permiten
averiguar la secuencia de los nucleótidos (A,
C, G, T) en el ADN.
 ¿QUÉ ES LA SECUENCIACIÓN?

● Fragmento de ADN de cadena doble o

sencilla se marca en los extremos 5´ o 3´
de una o ambas hebras con 32 P.
● La muestra de ADN se divide en cuatro
alícuotas y se fragmenta en cuatro
reacciones químicas distintas.
● Los fragmentos de ADN generados
pueden ser separados por electroforesis en
cuatro carriles distintos con base en su
tamaño.
SECUENCIACIÓN DE
SANGER
Procedimiento

En 1977, Frederick Sanger desarrolló el

método de secuenciación de ADN conocido
como método de Sanger.
SECUENCIACIÓN DE MAXAM-GILBER

La secuenciación de Maxam-Gilbert es un método de

secuenciación de ADN desarrollado por Allan Maxam
y Walter Gilbert en 1976-1977.

Modificación química parcial del ADN específica de

la nucleobase y la subsiguiente escisión del esqueleto
del ADN en sitios adyacentes a los nucleótidos
modificados.
SECUENCIACIÓN DE MAXAM-GILBER

Un ejemplo de reacción de secuenciación de Maxam-Gilbert. La escisión del mismo

segmento marcado de ADN en diferentes puntos produce fragmentos marcados de
diferentes tamaños. A continuación, los fragmentos pueden separarse mediante
electroforesis en gel.
 PIROSECUENCIACIÓN

Es es una tecnología de determinación de

secuencia de ADN a gran escala; es la primera
alternativa al método de Sanger convencional
y se basa en la pññdetección de pirofosfato
durante la síntesis de ADN.
 PIROSECUENCIACIÓN
VENTAJAS DESVENTAJAS

● Es un método ● La secuenciación
rápido y en de tramos cortos
tiempo real. de ADN.
● Comienza con la ● La dificultad para
primera base a un determinar el
lado del primer, número de
de tal modo, que nucleótidos
 MEJORAS PARA LA SALUD
HUMANA
Comparar largos tramos de ADN
Las comparaciones generan una gran cantidad de
información de la herenecia y en otras cosas.

Uso para algunos investigadores

Los investigadores en el Programa de Enfermedades sin
Diagnosticar y otros investigadores.

Su uso en Programas y Proyectos

Como en el Proyecto Atlas del Genoma del Cáncer, el
programa de Intitutos Nacionales de Salud y en otros
proyectos a gran escala.

Comparación de secuencias
genómicas en animales
Proporcionar sabiduría sobre biología del desarrollo.
ESTRATEGIAS DE SECUENCIACIÓN A GRAN
ESCALA
El Proyecto Genoma Humano fue
terminado en el año 2003 ● Cortando o cizallando fragmentos grandes para
obtener otros más pequeños.

● Se clona en un Vector de ADN amplificado en

Escherichia coli.

● El ADN amplificado se puede purificar a partir de

células bacterianas.

● Se secuencia completa y se ensambla

computacionalmente en una secuencia larga y
contigua.
 NUEVOS MÉTODOS DE
SECUENCIACIÓN
La secuenciación de nueva generación (Next Generation
Sequencing [NGS]) es un grupo de tecnologías diseñadas para
secuenciar gran cantidad de segmentos de ADN de forma masiva
y en paralelo, en menor cantidad de tiempo y a un menor costo
por base.
NUEVOS MÉTODOS DE
SECUENCIACIÓN:
Illumina

Nanoporos y detención electrónica

NUEVOS MÉTODOS DE
SECUENCIACIÓN:
Ion Torrent Sequenciog

Tipos de secuenciación por

generación
 PRINCIPALES HITOS EN LA
SECUENCIACIÓN DEL ADN
El proceso de secuenciación del genoma humano fue evolucionando a lo largo del
tiempo. Frederick Sanger inició, en 1977, el campo de la genómica con su
revolucionario desarrollo de la secuenciación del ADN.
 Contexto historico…

El desarrollo de instrumentos comerciales con este método produjo hitos temprano

que culminaron en la secuenciación del primer genoma humano.
GRACIA
S!