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DBIO1069

LABORATORIO DE
BIOLOGIA CELULAR
Práctico 8: Ácidos nucleicos
¿Cuáles son las características químicas del ADN?
Extracción de ADN como base para las técnicas de biología molecular
Metodología de Extracción de ADN
¿Tipo de célula?
¿Qué hace a este tipo celular
Preparación
resistente? de la muestra
Homogenizado
+

Tampón Solubilización
de de las membranas
¿Cómo ingresar a la
célula?
Lisis

Detergente o Jabón NaCl Bicarbonato de Sodio

Disuelve las membranas Neutraliza cargas (-) Regula el pH


del ADN
Extracción de ADN de Plátano

Muela medio plátano en


agua destilada
(media taza)
Extracción de ADN de Plátano
(Tampón de lisis)

Mientras tanto mezcle:


10ml de agua
Una pizca de sal
2ml detergente
Extracción de ADN de Plátano
Agregar unos 70mL del homogeneizado al tampón de lisis
(Solución de jabón y sal), mezclar 10 minutos evitando formar
espuma

Se logran romper
las membranas y
solubilizar las
proteínas
Luego ...
Detergente: Agente Solubilizante
Sal: Agente estabilizador

El Na+ neutraliza las cargas


negativas de los grupos
fosfato del ADN

El Na+ disminuye la
solubilidad entre las
proteínas y el ADN
Extracción de ADN de Plátano

Se filtra la
mezcla utilizando
un embudo y  un
tubo de ensayo
hasta recolectar
10ml aprox
Extracción de ADN de Plátano

Dejar en reposo 3
minutos, sin agitar el
tubo

Agregar sobre el producto del


filtrado

Agregar
cuidadosamente
5ml etanol frío
Extracción de ADN como base para las técnicas de
biología molecular

1. Obtención de muestra

2. Extracción de ADN 

3. Reacción en cadena de la
polimerasa (PCR) u otra
técnica … CONTINUARÁ
Midamos lo Aprendido
______ El detergente es utilizado para romper las
membranas 

______ La sal permite la solubilización de las


proteínas

______ El ADN se disuelve en el etanol frío


Midamos lo Aprendido

 1

 2
Extracción de ADN
Preguntas de Reflexión

1. ¿De acuerdo a sus conocimientos de Biología celular, por qué es necesario moler el plátano (o la fruta que utilizaron)?

2. ¿Por qué es necesario filtrar?

3. Explique el efecto del detergente.

4. Explique el efecto de la sal.

5. ¿Cuál es el efecto del etanol frío en la separación del ADN?

6. El ADN que usted observa al final de su experiencia ¿es ADN codificante, no codificante o ambos? Explique.

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